翻白草化学成分研究论文

【摘要】目的研究翻白草的化学成分。方法用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等多种柱色谱 分离，得到单体化合物，用各种有机波谱鉴定化合物结构。结果分离得到 6 个化合物，鉴 定为坡模酸(pomolicacidpomolicacid，1))，3-O-O-O-乙酰坡模醇(pomolicacid3-O-O-O-acetyl-O-pomolicacid,2))，齐墩果 酸(pomolicacidoleanolicacid，3)，2)α-O-羟基白桦酯酸(pomolicacid2)α-O-hydroxylbetulinicacid,4),),槲皮素-O-3-O-O-Oβ-O-D-O-葡萄糖(pomolicacidquercetin-O-3-O-O-O-β-O-D-O-glucoside，5))，山萘酚-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖 (pomolicacidkaempferol-O-3-O-O-O-β-O-D-O-glucoside，6)。结论所有化合物均为首次从翻白草中分离得到。 【关键词】翻白草；化学成分；三萜；黄酮 Abstract： ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofPotentilladiscolor.MethodsChemica lconstituentswereisolatedbyrepeatedcolumnchromatographies.Thestructuresw ereelucidatedonthebasisofspectraldataanalysis.ResultsSiscompounds,pomolic acid(pomolicacid1)),3-O-O-O-acetyl-O-pomolicacid(pomolicacid2)),oleanolicacid(pomolicacid3),2)α-Ohydroxylbetulinicacid(pomolicacid4),),quercetin-O-3-O-O-O-β-O-D-O-glucoside(pomolicacid5)),kaempferol-O-3-O-O-O-β-O-D-Oglucoside(pomolicacid6)wereisolatedfromP.discolor.ConclusionAllthecompoundswereisolat edfromtheplantforthefirsttime. Keywords：Potentilladiscolor;Chemicalconstituents;Triterpenes;Flavonoids 中药翻白草又名鸡腿儿、鸡脚草、鸭脚参、天青地白，为蔷薇科植物翻白草 PotentilladiscolorBge.的干燥全草，是一种常见中草药。翻白草性平，味甘、微苦，无 毒，归肝、胃、大肠经，具有止血止痢,清热解毒、消肿之功效，常用于赤痢腹痛、久痢不 止、咳血、吐血、大便带血、崩漏、肺痈、痈肿及结核等［1)，2)］。现代医学研究表明， 翻白草具有抗菌、止泻、抗肿瘤、免疫抑制和降血糖的作用，在民间和临床上有抗糖尿病 的应用［3～5)］。文献报道从翻白草中分离得到的化合物主要有黄酮类，三萜类，单宁类 和一些脂肪酸和酚酸类化合物［6～8］。本研究报道从翻白草的醋酸乙酯提取物中分离到 的 6 个三萜类化合物，通过有机波谱解析鉴定了各单体化合物的结构，分别为坡模酸 (pomolicacid1))，3-O-O-O-乙酰坡模醇(pomolicacid2))，齐墩果酸(pomolicacid3)，2)α-O-羟基白桦酯酸(pomolicacid4),)，槲皮素-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖 (pomolicacid5))，山萘酚-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖(pomolicacid6)，所有化合物均为首次从翻白草中分离得到的化合物。 1) 仪器、试剂及药材 核磁共振仪，BrukerAVANCE5)00instrument(pomolicacidTMS 内标)；液质联用色谱仪， Alliance2)695),QuattroMicroTMESI(pomolicacidWaters)；凝胶色谱柱，ToyopearlHW-O4),0C(pomolicacidTosoh)；柱色谱和薄层色谱用硅胶均系青岛海洋化工厂生产，所用试剂均为分析纯。 翻白草 P.discolor 采自豫西伏牛山区(pomolicacid2)006 年 8 月)，由洛阳梓生生物技术公司王忠 东教授鉴定，标本存放于洛阳梓生生物技术公司。 2) 方法与结果 2).1) 提取分离翻白草 1)0.3kg，阴干，粉碎，用 95)%的乙醇浸泡 3 次，1) 周/次。提取 液减压浓缩，得浸膏 2)300g，浸膏加水混悬后，分别用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇进行萃 取，得醋酸乙酯提取物 4),5)0g，正丁醇浸膏 5)2)0g。醋酸乙酯和正丁醇提取物经反复硅胶柱 色谱、凝胶渗透色谱分离得到化合物 1)～6。 2).2) 结构鉴定 2).2).1) 化合物 1) 白色无定型粉末。ESI-O-MSm/z：4),71)［M-O-H］-O-(pomolicacid推出分子式 C30H4),8O4),)。1)H-O-NMR(pomolicacidCD3OD):δδ： 0.78(pomolicacid3H，s)，0.80(pomolicacid3H，s)，0.93(pomolicacid3H，d，J=6.4),Hz)，0.95)(pomolicacid3H,s),0.98(pomolicacid3H,s),1).1)9 (pomolicacid3H,s),1).33(pomolicacid3H,s),2).5)0(pomolicacid1)H,s,1)8-O-H),3.1)5)(pomolicacid1)H,m,3-O-H),5).2)8(pomolicacid1)H,brs,1)2)-O-H)。1)3C-ONMR(pomolicacidCD3OD)δ(pomolicacidC-O-1)～ 30):δ39.8，2)7.8，79.8，39.8，5)5).7，1)9.6，34),.2)，4),1).0，4),2).9，38.1)，2)4),.7，1)2)9 .5)，1)39.9，4),2).9，2)9.6，2)6.6，4),8.1)，5)5).0，73.6，4),2).5)，2)7.2)，38.9，2)8.8，1)5) .9，1)6.4),，1)7.5)，2)4),.9，1)82).3，1)6.7，2)7.2)。以上光谱数据与文献［9，1)0］报道的 数据一致，因此鉴定化合物为 3β,1)9α-O-二羟基-O-1)2)-O-烯-O-2)8-O-乌苏酸(pomolicacidpomolicacid)。 2).2).2) 化合物 2) 为白色无定型粉末。ESI-O-MSm/z:δ4),93［M-O-H］-O-(pomolicacid分子式 C32)H5)0O5))。1)H-ONMR(pomolicacid300MHz,CDCl3)δ:δ0.73(pomolicacid3H,s),0.85)(pomolicacid3H,s),0.87(pomolicacid3H,s),0.88(pomolicacid3H,s),0.94),(pomolicacid3H,s), 1).2)1)(pomolicacid3H,s),1).2)5)(pomolicacid3H,s),2).05)(pomolicacid3H,s,OAc),2).5)4),(pomolicacid1)H,s),4),.5)0(pomolicacid1)H,t,J=8.5)Hz),5).35)(pomolicacid1)H,b rs,1)2)-O-H)。1)3C-O-NMRδ(pomolicacidC-O-1)～ 30):δ37.5),2)7.4),,80.9,37.7,5)5).2),1)8.3,32).6,38.1),4),7.1),36.9,2)3.0,1)2)9.3,1)37.9,39.9, 2)8.2),2)4),.5),4),7.7,5)2).9,73.1),4),1).1),2)5).4),,36.9,2)8.0,1)5).3,1)6.1),1)6.9,2)3.7,1)82).4),,2)5).9,1) 6.7;乙酰基：2)1).3,1)71).0。以上光谱数据与文献［1)1)］报道的数据一致，因此鉴定化合 物为 3-O-O-O-乙酰坡模醇(pomolicacid3-O-O-O-acetyl-O-pomolicacid)。 2).2).3 化合物 3 白色无定型粉末。ESI-O-MSm/z:δ4),5)5)［M-O-H］-O-(pomolicacid推出分子式 C30H4),8O3)。1)H-ONMR(pomolicacidCDCl3)δ:δ0.76(pomolicacid3H,s),077(pomolicacid3H,s),0.91)(pomolicacid3H,s),0.92)(pomolicacid3H,s),0.93(pomolicacid3H,s),1).00(pomolicacid3H,s ),1).1)3(pomolicacid3H,s),2).82)(pomolicacid1)H,m，1)8-O-H),3.2)2)(pomolicacid1)H,m，3-O-H),5).2)9(pomolicacid1)H,brs,1)2)-O-H)。1)3C-ONMR(pomolicacidCDCl3)δ(pomolicacidC-O-1)～ 30):δ38.5)，2)7.3，79.0，38.7，5)5).3，1)8.3，32).7，39.3，4),7.7，37.1)，2)3.1)，1)2)2) .7，1)4),3.6，4),1).5)，2)7.7，2)3.4),，4),6.5)，4),1).2)，4),5).9，30.6，33.8，32).5)，2)8.1)，1)5) .3，1)5).5)，1)7.1)，2)5).9，1)82).5)，33.0，2)3.6。以上光谱数据与文献［1)1)，1)2)］报道的 数据一致，因此鉴定化合物为齐墩果酸(pomolicacidoleanolicacid)。 2).2).4), 化合物 4), 白色无定型粉末。ESI-O-MSm/z:δ4),71)［M-O-H］-O-(pomolicacid分子式 C30H4),8O4),)。1)H-ONMR(pomolicacidCD3OD)δ:δ0.77(pomolicacid3H,s),0.90(pomolicacid3H,s),0.95)(pomolicacid3H,s),0.98（3H,s）,0.99（3H,s）,1).6 8(pomolicacid3H,s),2).83(pomolicacid1)H,m),2).91)(pomolicacid1)H,d,J=9.6,3α-O-H),3.61)(pomolicacid1)H,m,2)β-O-H),3.02)(pomolicacid1)H,m,1)9-OH),4),.5)8(pomolicacid1)H,brs,30-O-Ha),4),.70(pomolicacid1)H,brs,30-O-Hb)。1)3C-ONMR(pomolicacidCD3OD)δ:δ4),8.2),69.8,84),.5),39.6,5)6.8,1)9.7,35).5),4),0.4),,5)1).8,39.5),2)2).2),2)6.8,39 .6,4),3.6,30.7,33.3,5)7.4),,4),8.3,5)0.5),1)5)1).5),31).7,38.1),2)9.2),1)7.2),1)6.7,1)9.4),,1)5).2),1)80 .0,1)1)0.2),1)9.5)。以上光谱数据与文献［1)3］报道的数据基本一致，因此鉴定化合物为 2)α-O-羟基白桦酯酸(pomolicacid2)α-O-hydroxyl-O-betulinicacid)。 2).2).5) 化合物 5) 黄色无定型粉末。ESI-O-MSm/z:δ4),63［M-O-H］-O-(pomolicacid推出分子式 C2)1)H2)0O1)2))。1)H-O-NMR(pomolicacidDMSO-O-d6)δ:δ7.5)9(pomolicacid1)H,d,J=2).5)Hz,H-O2)G),7.5)8(pomolicacid1)H,dd,J=8.5),2).5)Hz,H-O-6G),6.85)(pomolicacid1)H,d,J=8.5)Hz,H-O-5)G),6.4),0(pomolicacid1)H,d,J=2).5)Hz,H-O8),6.2)0(pomolicacid1)H,d,J=2).5)Hz,H-O-6),5).4),7(pomolicacid1)H,d,J=7.0Hz,H-O-1)″),3.09),3.09～3.65)(pomolicacid6H,m,H-O-2)″),3.09～ 6″),3.09);1)3C-O-NMR(pomolicacidDMSO-O-d6)δ:δ1)5)6.3(pomolicacidC-O-2)),1)33.6(pomolicacidC-O-3),1)77.7(pomolicacidC-O-4),),1)61).4),(pomolicacidC-O-5)),99.0(pomolicacidC-O6),1)64),.6(pomolicacidC-O-7),1)93.8(pomolicacidC-O-8),5)6.5)(pomolicacidC-O-9),1)04),.0(pomolicacidC-O-1)0),1)2)1).7(pomolicacidC-O-1)G),1)1)5).4),(pomolicacidC-O- 2)G),1)4),5).0(pomolicacidC-O-3G),1)4),8.6(pomolicacidC-O-4),G),1)1)6.3(pomolicacidC-O-5)G),1)2)1).3(pomolicacidC-O-6G),1)01).2)(pomolicacidC-O-1)″),3.09),74),.4),(pomolicacidC-O2)″),3.09),76.7(pomolicacidC-O-3″),3.09),70.1)(pomolicacidC-O-4),″),3.09),77.7(pomolicacidC-O-5)″),3.09),61).1)(pomolicacidC-O-6″),3.09) 。上数据与文献［1)4),，1)5)］报道的槲 皮素-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖苷的数据一致,故确定化合物为槲皮素-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖(pomolicacidquercetin-O3-O-O-O-β-O-D-O-glucoside)。 2).2).6 化合物 6 黄色针晶(pomolicacid甲醇),ESI-O-MSm/z:δ4),4),7［M-O-H］-O-(pomolicacid推出分子式 C2)1)H2)0O1)1))。1)H-O-NMR(pomolicacidDMSO-O-d6)δ:δ8.04),(pomolicacid2)H,d,J=9.0Hz,H-O2)G,6G),6.88(pomolicacid2)H,d,J=9.0Hz,H-O-3G,5)G),6.4),3(pomolicacid1)H,d,J=2).0Hz,H-O-8),6.2)1)(pomolicacid1)H,d,J=2).0Hz,H-O6),5).4),6(pomolicacid1)H,d,J=7.5)Hz,H-O-1)″),3.09),3.08～3.5)8(pomolicacid6H,m,);1)3C-O-NMR(pomolicacidDMSO-O-d6)δ:δ1)5)6.4),(pomolicacidC-O2)),1)33.2)(pomolicacidC-O-3),1)77.5)(pomolicacidC-O-4),),1)61).2)(pomolicacidC-O-5)),98.7(pomolicacidC-O-6),1)64),.1)(pomolicacidC-O-7),93.6(pomolicacidC-O-8),1)5)6.3(pomolicacidC-O9),1)04),.1)(pomolicacidC-O-1)0),1)2)0.8(pomolicacidC-O-1)G),1)30.9(pomolicacidC-O-2)G,6G),1)1)5).1)(pomolicacidC-O-3G,5)G),1)5)9.9(pomolicacidC-O-4),G),1)00.9(pomolicacidC-O1)″),3.09),74),.1)(pomolicacidC-O-2)″),3.09),76.3(pomolicacidC-O-3″),3.09),70.0(pomolicacidC-O-4),″),3.09),77.3(pomolicacidC-O-5)″),3.09),61).0(pomolicacidC-O-6″),3.09) 。以上数据与文献［1)4), ～1)6］报道的山萘酚-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡萄糖苷的数据一致，故确定化合物为山萘酚-O-3-O-O-O-β-O-D-O-葡 萄糖苷(pomolicacidkaempferol-O-3-O-O-O-β-O-D-O-glucoside)。 3 讨论 翻白草具有较强的降血糖的作用，民间有用其泡茶饮用防治糖尿病的报道。但对翻白 草具体的降血糖作用物质基础和降糖机制的研究仍未有报道。中药治疗糖尿病不仅具有毒 性低、副作用小的特点，而且具有较强的防治糖尿病并发症的作用。因此，开展对中药翻 白草的研究，对于开发具有降血糖作用的中药新药有非常重要的意义。 【摘要】目的对云南大理产水芹挥发油进行化学成分的研究，为水芹的进一步开发和 利用提供科学依据。方法采用水蒸气蒸馏法从水芹中提取挥发油，用气相色谱-O-质谱法对化 学成分进行分析，以归一化法计算各个化学成分的相对含量。结果共分离出 61) 个峰，鉴 定了其中 1)6 个化学成分，占挥发油总量的 96.4),6%。结论水芹挥发油中的主要成分为苯 氧乙酸烯丙酯（80.1)7%）、桉叶-O-4),(pomolicacid1)4),),1)1)-O-二烯（6.83%）、2),3-O-二氢-O-3-O-甲基-O-3-O-苯并 呋喃甲醇（2).94),%）、柠檬烯（1).63%），云南大理产水芹挥发油中萜类化合物及其衍生 物含量在 1)3%以上，苯氧乙酸烯丙酯含量高，可用作食品工业和化妆品工业的香料。 【关键词】水芹；挥发油；气相色谱-O-质谱法 Abstract： ObjectiveTostudythechemicalconstituentsoftheessentialoilinOenanthejavanica (pomolicacidBL.)DC,andprovidethescientificbasisforexploitation.MethodsTheessentialoilwa sextractedbysteamdistillation.Thechemicalconstituentsoftheessentialoilwerea nalyzedbyGC-OMS.Therelativecontentsoftheseconstituentswerecalculatedusingsquarepeaksto normalization.Results61)peakswereseparatedand1)6constituentswereidentified, whichwerecomposedofabout96.4),6%ofthetotalessentialoil.ConclusionThemainc onstituentsareallylphenoxyacetate(pomolicacid80.1)7%),eudesma-O-4),(pomolicacid1)4),),1)1)-Odiene(pomolicacid6.83%),2),3-O-dihydro-O-3-O-methyl-O-3-O-benzofuran-Omethanol(pomolicacid2).94),%),limonene(pomolicacid1).63%).TheessentialoilinOenanthejavanica(pomolicacidBL.)DC fromDali,Yunnancanbeusedinthefoodserviceindustryandthecosmeticindustryas spices. Keywords：Oenanthejavanica(pomolicacidBL.)DC;Essentialoil;GC-O-MS 水芹 Oenanthejavanica(pomolicacidBL.)DC.系伞形科植物，为多年生湿生或水生草本。民间多 用于治疗小儿发热、小便淋痛、白带、小便出血等［1)］。由于水芹挥发油成分比较复杂， 不同产地导致了水芹挥发油成分的明显差异。本实验所分析的云南大理产水芹挥发油化学 成分研究尚未见报道。本实验采用云南大理产水芹的干燥全草，以水蒸气蒸馏法提取挥发 油，经无水硫酸钠干燥后，用气相色谱-O-质谱法分析，共分离出 61) 个化学成分，鉴定了其 中 1)6 个化学成分，以归一化法计算了各个化学成分的相对含量，占挥发油总量的 96.4),6%，为云南大理产水芹的进一步开发和利用提供了科学依据。 1) 材料与方法 1).1) 仪器与试剂美国 ThermoQuestTrace2)000GC-O-MS 联用仪，色谱柱：DB-O-5)MS 石英毛细管柱（30m×0.2)5)mm，0.2)5)μmm）。水芹采自云南大理花甸坝，经大理学院药 学院生药教研室马晓匡教授鉴定为伞形科植物水芹 Oenanthejavanica(pomolicacidBL.)DC，标本存 于大理学院药学院药物化学实验室。 1).2) 挥发油的提取将水芹全草 5)0g 干燥、粉碎，按《中国药典》2)005) 年版附录 XD 水蒸气蒸馏法提取挥发油,经无水硫酸钠干燥后得样品，挥发油为淡黄色透明油状物，具有 浓郁的特殊气味,出油率为 0.5)3%。 1).3 气相色谱条件 DB-O-5)MS 石英毛细管柱（30m×0.2)5)mm,0.2)5)μmm）；色谱柱程 序升温条件：初始温度 5)0℃，保持 3min 后，以 5)℃/min 的速率升温至 1)2)0℃，然后以 1)℃/min 的速率升温至 1)60℃，再以 1)0℃/min 的速率升温至 2)60℃，恒温 1)0min；载 气 He（1).0ml/min）；进样量 1)μml；无分流进样；接口温度 2)60℃；气化温度 2)60℃。 1).4), 质谱分析条件电离方式为 EI；电子能量 70eV；离子源温度：2)00℃；质谱检测 器电压 35)0V；扫描质量范围 35)～4),5)0AMU。 2) 结果 用毛细管气相色谱法从云南大理产水芹挥发油中分离出 61) 个峰，通过 HP-O-MSD 化学 工作站数据处理系统，按面积归一化法测得挥发油各组分相对含量。按上述气相色谱-O-质谱 条件对水芹挥发油进行分析，得其总离子流图见图 1)。 图 1) 云南大理产水芹挥发油总离子流图（略） 对总离子流图中的各峰通过质谱扫描后得质谱图，经计算机用 NIST98 标准图库，人 工谱图解析，并查对有关质谱资料［2)］，从基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比 较、分析和鉴定，确认了其中 1)6 个化学成分，见表 1)。 表 1) 云南大理产水芹挥发油化学成分分析结果（略） 3 讨论 所鉴定出的 1)6 个化学成分占挥发油总量的 96.4),6%，主要成分为苯氧乙酸烯丙酯、 桉叶-O-4),(pomolicacid1)4),),1)1)-O-二烯、2),3-O-二氢-O-3-O-甲基-O-3-O-苯并呋喃甲醇、柠檬烯，其中苯氧乙酸烯丙酯 的量最高，占总量的 80.1)7%。苯氧乙酸烯丙酯俗称菠萝酯，因具有菠萝香气而得名，是 饮料、糖果、食品工业常用的香料，也用作化妆品香料［3］。水芹在这方面的应用尚未 见报道，可见云南大理产水芹挥发油可用作食品工业和化妆品工业的香料，应用前景非常 广阔。萜类化合物及其衍生物含量在 1)3%以上，其对云南大理产水芹挥发油的抗菌和抗肿 瘤活性值得进一步研究。