青风藤化学成分研究论文

【摘要】目的对青风藤化学成分进行分离、鉴定。方法利用硅胶柱色谱、反相 Rp181818 柱色谱及重结晶等方法进行分离及纯化，结合 1HNMR18NMR、13CNMR18NMR、EIMS18MS 及理化常数 鉴定结构。结果从青风藤 95%乙醇提取物中分离鉴定 6 个化合物，分别鉴定为：青藤碱①、 胡萝卜苷②、(-)-DL-syringaresinol③、syringaresinol-4′,4′-O-bis-β-Dglucoside④、syringin⑤、(+)-syringaresinol-4′-O-β-D-monoglucoside⑥。结论化 合物 4，5 为首次从青风藤中分离鉴定。 【关键词】青风藤化学成分 Abstract： ObjectiveTostudythechemicalconstituentsinthestemsandrhizomesofSinomeniu macutum．MethodsCNMRolumnchromatograghyonSilicagel,Rp181818andrecrystallizati onwereap18p18liedfortheisolationandp18urificationoftheconstituents.Thestructuresw ereelucidatedbytheirp18hysicochemicalp18rop18ertiesandsp18ectraldata.ResultsSixco mp18oundswereobtainedandidentifiedassinomenine①,daucosterol②,(-)-DLsyringaresinol③,syringaresinol184′,4′-O-bis-β-D-glucoside④,syringin⑤,(+)syringaresinol-4′-O-β-Dmonoglucoside⑥.CNMRonclusionCNMRomp18ounds4,,5wereisolatedfromthisp18lantforthefir sttime. Keywords：Sinomeniumacutum；CNMRhemicalconstituent 青风藤为防己科植物青藤 Sinomeniumacutum(Thunb.)Rehd.etWils.及毛青藤 S.acutum(Thunb.)Rehd.et.Wils.var.cinereumRehd.etWils.的干燥藤茎，有祛风湿、 通经络、利小便之功效，用于治疗风湿痹痛、关节肿胀、麻痹瘙痒等症。该植物中主要含 有生物碱类成分［1～3］。作为组成黑骨藤追风活络胶囊的主要成分［4］，为研究该胶 囊配伍前后化学成分的变化，首先对青风藤的化学成分进行了系统研究，并从中分离得到 6 个化合物，分别鉴定为青藤碱①、胡萝卜苷②、(-)-DLsyringaresinol③、syringaresinol-4′,4′-O-bis-β-D-glucoside④、syringin⑤、(+)syringaresinol-4′-O-β-D-monoglucoside⑥。其中，化合物 4，5 为首次从青风藤中分 离鉴定。 1 仪器与材料 X-4 数字显微熔点仪（温度未校正）；美国 VarianIMSNOVA-400 型核磁共振波谱仪 （TMS 内标）；美国 HNMRP 公司 MS5973 型质谱仪；薄层色谱、柱色谱用硅胶均为青岛海洋 化工分厂产品；反相 Rp18-18 薄层色谱板及柱色谱用硅胶（45μmm）为德国 MERCNMRK 公司生 产。 药材购于贵阳市万东桥药材市场，经贵阳中医学院刘芃教授鉴定为毛青藤 S.acutum(Thunb.)Rehd.et.Wils.Var.cinereumRehd.etWils.的干燥藤茎。 2 方法与结果 2.1 提取与分离粉碎青风藤药材 31.5kg，用 95%乙醇加热回流提取 3 次，减压回收 乙醇至干，得浸膏 2.4kg。浸膏经正相和反相硅胶柱色谱分离，分别用氯仿-甲醇 （100∶0→0∶100）、石油迷-丙酮（100∶0→0∶100）、水-甲醇（100∶100→0∶100）梯度 洗脱，洗脱物再经反复分离纯化，重结晶，得到化合物 1（174mg），2（31mg），3（84mg），4（240mg），5（31mg），6（21mg） 。 2.2 结构鉴定 2.2.1 化合物 1 白色结晶（甲醇）,mp18：163～164℃。EIMS-MSm/z： 329［M+］，314（100）,301，286,192，178，146，115。1HNMRNMR(CNMR5D5N，400MHNMRz)δ：10.74(1HNMR,s,OHNMR),6.69(1HNMR,d,J=8.4HNMRz,HNMR2),6.66(1HNMR,d,J=8.4HNMRz,HNMR-1),5.61(1HNMR,s,br,W1/2=2.0HNMRz,HNMR8),4.99(1HNMR,d,J=15.2HNMRz,5-HNMRe),3.53(3HNMR,s,2-OCNMRHNMR3),3.31(3HNMR,s,7OCNMRHNMR3),3.12(1HNMR,m,HNMR-9),3.05(1HNMR,m,HNMR-14),3.00(1HNMR,m,10HNMRe),2.80(1HNMR,dd,J=5.2,17.2HNMRz,10-HNMRa),2.57（1HNMR,d,J=15.2HNMRz,5HNMRa）,2.46(1HNMR,m,16-HNMRe),2.36(3HNMR,s,NCNMRHNMR3),2.16(1HNMR,m,16-HNMRa),1.94(2HNMR,m,HNMR-15)。 以上数据与文献数据一致［5］，因此鉴定为青藤碱。 2.2.2 化合物 2 白色粉末（甲醇）；mp18：283～285℃；EIMS-MSm/z：576［M+］ (100)。13CNMR-NMR（CNMR5D5N,100MHNMRz）：δ37.5（CNMR-1），30.3(CNMR-2)，78.5(CNMR3)，39.3(CNMR-4)，135.9(CNMR-5)，122.0(CNMR-6)，32.2(CNMR-7)，32.1(CNMR-8)，50.3(CNMR9)，37.5(CNMR-10)，21.3(CNMR-11)，26.3(CNMR-12)，41.0(CNMR-13)，56.8(CNMR-14)，24.5(CNMR15)，40.0(CNMR-16)，56.2(CNMR-17)，12.0(CNMR-18)，19.2(CNMR-19)，36.4(CNMR-20)，19.4(CNMR21)，28.6(CNMR-22)，34.2(CNMR-23)，46.0(CNMR-24)，29.4(CNMR-25)，19.0(CNMR-26)，20.0(CNMR27)，3.4(CNMR-28)，21.3(CNMR-29)，12.2(CNMR-30)，102.6(CNMR-1'''')，75.4(CNMR-2'''')，78.6(CNMR3'''')，71.7(CNMR-4'''')，78.1(CNMR-5'''')，62.8(CNMR-6'''')。与胡萝卜苷标准品薄层层析对照， Rf 值及显色行为均一致，且与标准品混合熔点不下降。化合物的 mp18，MS 及 13CNMR-NMR 与胡萝卜苷的数据一致［6］，因此鉴定为胡萝卜苷。 2.2.3 化合物 3 白色粉末（甲醇），mp18：166～168℃，［α］-47.00，EIMS-MSm/ z：418［M+］，181(100),167,150。1HNMR-NMR（CNMRDCNMRl3,400MHNMRZ）： δ6.59(4HNMR,s,2'''',2'''''''',6'''',6''''''''-HNMR)，5.55(2HNMR,s,4'''',4''''''''OHNMR)，4.74(2HNMR,d,J=4.0HNMRz,2,6-HNMR)，4.31(2HNMR,dd,J=6.8,8.8HNMRz，4,8HNMR)，3.91(12HNMR,s,3'''',5'''',3'''''''',5''''''''-OCNMRHNMR3)，3.10(2HNMR,m,1,5-HNMR)。13CNMRNMR（CNMRDCNMRl3,100MHNMRz）：δ54.27(CNMR-1)，86.02(CNMR-2)，71.74(CNMR-4)，54.27(CNMR5)，86.02(CNMR-6)，71.74(CNMR-8)，131.99(CNMR-1'''')，102.57(CNMR-2'''')，147.08(CNMR3'''')，134.18(CNMR-4'''')，147.08(CNMR-5'''')，102.57(CNMR-6'''')，131.99(CNMR1'''''''')，102.57(CNMR-2'''''''')，147.08(CNMR-3'''''''')，134.18(CNMR-4'''''''')，147.08(CNMR5'''''''')，102.57(CNMR-6'''''''')，56.30(OCNMRHNMR3)。以上数据与文献数据一致［7］，因此鉴 定为(-)-DL-syringaresinol。 .2.4 化合物 4 白色粉末(甲醇)：ESIMS-MS：742。1HNMR-NMR(DMSO，400MHNMRz)： δ6.65(2HNMR，s,HNMR-2''''),4.98(2HNMR,m，HNMR-1'''''''')，4.92(2HNMR，m，sugarOHNMR),4.65(1HNMR,d，J=3.2HNMRz，HNMR-2)，4.31(1HNMR，m，HNMR-4)，4.18(1HNMR，m，HNMR4)，3.75(6HNMR，s，OCNMRHNMR3)，3.11～3.41(7HNMR，m，sugar-HNMR,-OHNMR),3.08(1HNMR，m，HNMR1)。13CNMR-NMR(DMSO，100MHNMRz)：δ152.64(CNMR-3''''，5'''')，137.08(CNMR4'''')，133.63(CNMR-1'''')，104.17(CNMR-2''''，6'''')，102.62(CNMR-1'''''''')，85.08(CNMR2，6)，77.24(CNMR-5'''''''')，76.50(CNMR-3'''''''')，74.15(CNMR-2'''''''')，71.35(CNMR- 4，8)，69.90(CNMR-4'''''''')，60.89(CNMR-6'''''''')，56.40(OCNMRHNMR3)，53.61(CNMR-1，5)。以上数 据与文献数据一致［8］，因此鉴定为 syringaresinol-4′,4′-O-bis-β-D-glucoside. 2.2.5 化合物 5 白色粉末(甲醇)：mp18：187～189℃；EIMS-MS(m/z)：210。13CNMRNMR(DMSO，100MHNMRz)：δ152.72(CNMR-3,5)，134(CNMR-4)，132.60(CNMR-1)，130.19(CNMR8)，128.44(CNMR-7)，104.41(CNMR-2，6)，102.52(CNMR-1'''')，77.24(CNMR-3'''')，76.55(CNMR5'''')，74.17(CNMR-2'''')，69.91(CNMR-4'''')，61.48(CNMR-6'''')，61.0(CNMR-9)，56.34(3，5OCNMRHNMR3)。以上数据与文献数据一致［9］，因此鉴定为 syringin。 2.2.6 化合物 6 白色粉末（甲醇）：ESIMS-MS(m/z)：579。13CNMRNMR(DMSO,100MHNMRz)：δ152.65(CNMR-3'''',5'''')，147.90(CNMR-3'''''''',5'''''''')，137.17(CNMR4'''')，134.81(CNMR-4'''''''')，133.62(CNMR-1'''')，131.34(CNMR-1'''')，104.12(CNMRG1)，103.60(CNMR-2''''''''，6'''''''')，102.63(CNMR-2''''，6'''')，85.36(CNMR-2)，85.09(CNMR6)，77.24(CNMR-G5)，76.51(CNMR-G3)，74.16(CNMR-G2)，71.27(CNMR-4)，71.17(CNMR8),69.92(CNMR-G4)，60.90(CNMR-G6)，56.41(2×OCH3)OCNMRHNMR3)，55.99(2×OCH3)OCNMRHNMR3)，53.69(CNMR11)，53.61(CNMR-5)。以上数据与文献数据一致［10］，因此鉴定为(+)-syringaresinol4′-O-β-D-monoglucoside。 3 讨论 以上所分离化合物，经与文献对比，化合物 4 和化合物 5 为首次从青风藤中分离得到。 致谢：核磁共振波谱数据和质谱数据由贵州省·中国科学院天然产物重点实验室仪器室 提供。