金针菇挥发性化学成分研究论文

【摘要】目的研究金针菇的挥发性化学成分。方法以水蒸气蒸馏法提取金针菇挥发性 成分,应用 GC-MS 法鉴定其化学成分，并计算出各组分的相对含量。结果从水蒸气蒸馏法 所得物中分离出 30 个组分,其中亚麻酸、软脂酸和软脂酸乙酯相对含量分别为 32.74%，6.41%，4.96%。结论金针菇挥发性成分中富含活性物质亚麻酸等成分。 【关键词】金针菇；挥发性成分;气相质谱-色谱联用 Abstract： ObjectiveToanalyzethechemicalconstituentsofessentialconstituentsextractedb ysteamdistillationfromFlammulinavelutipes.MethodsThechemicalconstituents wereseparatedandidentifiedbyGCMS.Therelativecontentofeachconstituentwasdeterminedbyareanormalization.R esults30peakswereseparatedand6constituentswereidentified,whichaccountedf or54.36%ofthetotalcontents.Themainchemicalcomponentsoftheessentialconsti tuentswerelinolenicacid(32.74%)； Palmiticacid(6.41%)andEthylpalmitate(4.96%).ConclusionTheessentialconstitu entsofFlammulinavelutipescontainsthelinolenicacidwhichisrich. Keywords：Flammulinavelutipes；Essentialconstituents；GC-MS 金针菇 Flammulinavelutipes，又名朴菰、构菌、冬菇、毛脚金钱菌，为白蘑科 Tricholomataceae 金钱菌属 Flammulina 菌类植物［1］，是著名的药食两用菌，具有 广阔的开发前景。金针菇含有 8 种人体必需的氨基酸，其中赖氨酸含量占氨基酸总量的 6.3%［2］。医学证明赖氨酸可以增强记忆、开发智力，对幼儿成长十分有益，故金针菇 被誉为“增智菇”；金针菇所含的多肽、多糖有显著的抗癌作用［3］。金针菇干品具有独特 香气，然而尚未见有关其芳香成分研究的报道，为此作者对其挥发性成分进行了研究。 1 器材 1.1 仪器岛津 GCMS-QP-5000 型气质联用仪。 1.2 试剂乙醚、无水 Na2SO4（均为均为 AR）。 1.3 药材金针菇样品由广东省蚕桑研究所提供，经该所所员刘学铭研究鉴定，为白蘑 科菌类植物金针菇 Flammulinavelutipes。 2 方法 2.1 供试品溶液的制备药材切成约 1.5～2cm 的段，取约 80g，按照《中国药典》附 录 XD 挥发油测定法——甲法［4］操作，加蒸馏水 800ml，加热 4h，收取挥发油提取器 中油层和部分芳香水层，乙醚萃取，萃取液用无水 Na2SO4 脱水后备用。 2.2GC-MS 分析 2.2.1 色谱条件 GC：DB-1 石英毛细管色谱柱（均为30m×0.25mm），样口温度 250℃；接口温度 230℃；载气为氦气；流速 1.3ml·min-1；柱压 80kPa；分流比 10∶1；进样量为 1.0μll。升温程序：初始柱温 60℃，保持 1min，以 10℃·min-1 的速率 升到 280℃，保持 5min。 2.2.2 质谱条件 EI 源（均为70ev），350V，双灯丝；质量范围 m/z40～450 全程扫描， 扫描间歇 1.0s。检测电子倍增器电压 1.4kV。检索谱库名称 NIST。 3 结果 依法操作，得到挥发性成分的总离子流图。扣除乙醚溶剂本底后分离得到 30 个组分， 对相对含量较高的组分进行质谱分析，通过计算机检索并与标准谱图对照，鉴定出其中的 6 个组分。以扣除溶剂峰的色谱图的全部峰面积作为 100%，用归一化法确定了各组分在 挥发油中的相对含量。分析结果见表 1，总离子流图见图 1。表 1 金针菇挥发性成分中的 化学成分及相对百分含量（均为略） 4 讨论 从 GC-MS 总离子流图及 GC-MS 检测结果可以看出，金针菇挥发性成分以亚麻酸为主， 其相对含量达到 32.74%。亚麻酸具有增长智力、延缓衰老、降低血压和胆固醇、抗菌、 抗炎、抗肿瘤等活性［5～7］，是降血压、降血脂药物和保健品的重要原料之一，应进一 步研究，加以利用。 本研究首次从金针菇挥发性成分中鉴定出亚麻酸（均为32.74%）、软脂酸（均为6.41%）、 邻苯二甲酸异丁酯（均为5.23%）、软脂酸乙酯（均为4.96%）、邻苯二甲酸丁酯（均为3.07%）、苯 乙醛（均为1.95%）等成分，占其挥发性成分相对含量的 54.36%，但还有 24 个组分尚未能 鉴定出其结构，可能是由于金针菇挥发性成分属首次研究，其中一些成分尚未收入 NIST 检索谱库，有待于今后深入研究。 【摘要】目的研究豆叶霸王的化学成分，为完善和提高该常用中药的质量标准奠定良 好的物质基础。方法利用反复硅胶柱层析、SephadexLH-20 和制备 HPLC 等手段进行分 离，经光谱分析和理化常数进行鉴定。结果从该植物中分离鉴定了 7 种化学成分，其中 6 种首次从该植物分离得到。结论该研究结果具有一定的化学分类学意义，为进一步研究提 供了参考依据。 【关键词】豆叶霸王化学成分甾体皂苷黄酮 Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofZygophyllumfabagan ddevelopamoreefficientqualitycontrolproject.MethodsThechemicalconstituents fromzygophyllumfabagwereisolatedusingsilicalgelandSephedaxLH20colomnchromatographyandstructurallyidentifiedbymeansofvariousmoderns pectroscopictechnologiesbasedupontheirphysicalproperties.Results&Conclusio nSevencompoundswereisloatedandidentifiedfromZygolphylumfabag,inwhichsi xwereisolatedinZygolphylumfabagforthefirsttime. Keywords:Zygolphylumfabag;Chemicalconstituents;Steroidalsaponins;Flav onoids 豆叶霸王 Zygophyllumfabag 隶属于蒺藜科 Zygophyllaceae 驼蹄瓣属 ZygophyllumL.，具有祛热抗炎、降低血糖、抗高血压、止腹泻、抗菌等功效。文献调研 表明其化学成分研究未见报道，我们对其进行了较系统的化学成分研究。从该植物中低极 性分离鉴定了 7 种化学成分，它们分别是豆甾-4-烯-3-酮(stigmast-4-en-3-one）（均为Ⅰ)， 正二十八烷醇 n-noctacosanol(Ⅱ)，正三十二烷醇(Ⅲ))，胡萝卜苷（均为daucosterol） (Ⅳ)，β-谷甾醇（均为β-sitosterol）(Ⅴ)，紫云英苷（均为astragalin）(Ⅵ)，3-O-［β-Dglucopyranosyl］-quinovicacid(Ⅶ)。化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ 为首次从该植物中获得。 1 仪器与试剂 Inova-600 型核磁共振仪（均为中国人民解放军军事医学科学院分析中心）；BrukerAM500 型核磁共振仪（均为微量化学研究所分析中心）ZabspecE 型质谱仪（均为军事医学科学院分 析中心）；BuchiR-200 型旋转蒸发仪；Buchi615 中压液相色谱仪；Waters515 型高压 液相色谱仪，Waters2996 检测器；Empower 工作站；YMCPackPh(5μlm，250mm×10mm，I．D．)半制备柱；柱层析用硅胶(100～200 与 200 ～300 目，硅胶 H)均为青岛海洋化工厂产品；聚酰胺 100～200 目为浙江省台州市路桥 三甲生化塑料厂产品。 实验所用材料豆叶霸王（均为全草）11.5kg 为李国强博士于 20040808 间采自我国新疆维 吾尔族自治区，全部实验材料均经李国强博士鉴定其学名，原植物或原生药凭证标本藏于 中国医学科学院药用植物标本馆（均为IMD），中国科学院新疆生物土壤地理研究所植物标本 馆（均为XJBI），新疆农业大学植物标本馆（均为XJA）。 2 方法与结果 2.1 提取与分离豆叶霸王 11.5kg，粉碎成粗粉，先用 95%乙醇浸泡 24h，然后用 10 倍量 95%乙醇加热回流提取 3 次，4h/次，然后再用 60%乙醇回流提取 3 次。滤过，减压 蒸干溶剂，分散于水中，分别用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取。对低极性部分进 行了系统分离，得到了 7 个化合物。 2.2 结构鉴定 2.2.1 豆甾-4-烯-3-酮(Ⅰ))白色粉末（均为CHCl3），mp95～96℃，分子式为 C29H48O。Libermann-Burchard 反应阳性；EIMSm/z（均为%）： 412（均为M+，21），271（均为11），229（均为32），124（均为100）； 1HNMR(600MHz，CDCl3)δ:5.72(1H，s，H-4)，1.18(3H，s，Me19)，0.93(3H，d，J=6.0Hz，Me-21)，0.86(3H，t，J=7.2Hz，Me29)，0.84(3H，d，J=7.8Hz，Me-26)，0.82(3H，d，J=7.8Hz，Me27)，0.73(3H，s，Me-18)；13CNMR(150MHz，CDCl3)δ:35.7(C-1)，34.0(C2)，199.7(C-3)，123.7(C-4)，171.7(C-5)，32.9(C-6)，32.0(C-7)，35.6(C8)，53.8(C-9)，38.6(C-10)，21.0(C-11)，39.6(C-12)，42.4(C-13)，55.9(C14)，24.2(C-15)，28.2(C-16)，56.0(C-17)，12.0(C-18)，17.4(C-19)，36.1(C20)，18.7(C-21)，33.9(C-22)，26.1(C-23)，45.8(C-24)，29.1(C-25)，19.8(C26)，19.0(C-27)，23.1(C-28)，11.9(C-29)。以上数据与文献报道的豆甾-4-烯-3-酮 ［1］一致，故鉴定为豆甾-4-烯-3-酮。 2.2.2 正二十八烷醇(Ⅱ)白色粉末（均为CHCl3），mp82～83℃，分子式为 C28H58O； EIMSm/z（均为%）：392（均为M－ H2O，1），364（均为1），139（均为8），125（均为15），111（均为28），97（均为55），83（均为57） ，69（均为42），57(100)，55（均为42）； 1HNMR(600MHz，CHCl3)δ:3.64(2H，t，J=6.6Hz，H-1)，1.57(2H，m，H2)，1.25(50H，brs，H-3～H-27)，0.88(3H，t，J=7.2Hz，H-28)； 13CNMR(150MHz，CDCl3)δ:63.1(C-1)，31.9(C-2)，29.7，29.6，29.5，29.4(C-4 ～C-26)，25.7(C-3)，22.7(C-27)，14.1(C-28)。以上数据与文献报道的正二十八烷醇 ［2］一致，故鉴定为正二十八烷醇。 2.2.3 正三十二烷醇(Ⅲ))白色粉末（均为CHCl3），mp88～89℃，分子式为 C32H66O； EIMSm/z（均为%）：448（均为M－ H2O，28），420（均为10），392（均为15），364（均为7），139（均为15），125（均为25），111 （均为50），97（均为88），83（均为100），69（均为65），55（均为95）； 1HNMR(600MHz，CHCl3)δ:3.64(2H，t，J=6.6Hz，H-1)，1.57(2H，m，H2)，1.26(58H，brs，H-3～H-31)，0.88(3H，t，J=6.6Hz，H-32)； 13CNMR(150MHz，CDCl3)δ:63.1(C-1)，31.9(C-2)，29.7，29.6，29.5，29.4(C-4 ～C-30)，25.7(C-3)，22.7(C-31)，14.1(C-32)。以上数据与文献报道的正三十二烷醇 ［3］一致，故鉴定为正三十二烷醇。 2.2.4 胡萝卜苷（均为Ⅳ）白色无定形粉末，mp295～297℃，难溶于氯仿、甲醇， Liebermann-Burchard 反应和 Molish 反应均为阳性；EI-MS（均为m/z）：414（均为M+，Mglc，13），396（均为100），397(85)，381（均为17），329（均为8），303（均为10），255（均为2 0），213（均为18），145（均为25），81（均为22），69（均为20）。与胡萝卜苷对照品混合熔点不 下降，薄层层析 Rf 值。 2.2.5β-谷甾醇（均为Ⅴ）白色针状结晶，mp140～141℃，Liebermann-Burchard 反 应为阳性；EI-MS（均为m/z）： 414（均为M+，100），396（均为50），381（均为38），329（均为40），303（均为55），255（均为40） ，213（均为43），145（均为45），81（均为45），69（均为35）。与 β-谷甾醇对照品混合熔点不下 降，薄层层析 Rf 值与 β-谷甾醇一致。 2.2.6 紫云英苷(Ⅵ)黄色针状结晶，mp170～171℃，盐酸镁粉反应阳性； 1HNMR(400MHz，MeOD)δ:8.00(2H，d，J=8.8Hz，H2′，6′)，6.83(2H，d，J=8.8Hz，H-3′，6′)，6.56(1H，d，J=1.2Hz，H8)，6.29(1H，d，J=1.2Hz，H-6)，5.20(1H，d，J=6.8Hz，H-1"))，3.16～ 3.71(6H，m，H-2")～6"))；13CNMR(100MHz，MeOD)δ:156.9(C-2)，133.9(C3)，177.9(C-4)，161.5(C-5)，98.4(C-6)，164.6(C-7)，93.3(C-8)，157.5(C9)，104.1(C-10)，121.2(C-1′)，130.7(C-2′，6′)，160.0(C-4′)，114.4(C3′，5′)，102.6(C-1"))，74.2(C-2"))，76.5(C-3"))，69.8(C-4"))，76.9(C-5"))，61.1(C6"))。以上数据与文献报道的紫云英苷［4］一致，故鉴定为紫云英苷。 2.2.73-O-［β-D-glucopyranosyl］-quinovicacid(Ⅶ)白色粉末，mp266～ 268℃，分子式：C36H56O10，Liebermann-Burchard 反应和 Molish 反应均为阳性， 薄层酸水解检测含有葡萄糖；FAB-MSm/z：649［M+1］+，671［M+Na］+； 1HNMR(400MHz，pyridine-d5)δ:5.99(1H，m，H-12)，1.12(3H，s，H23)，0.94(3H，s，H-24)，0.83(3H，s，H-25)，1.08(3H，s，H26)，1.21(3H，d，J=6Hz，H-29)，0.79(3H，d，J=6.4Hz，H30)，4.77(1H，d，J=7.6Hz，H-1′)；13CNMR(100MHz，pyridine-d5)δ:40.6(C1)，28.0(C-2)，90.0(C-3)，41.3(C-4)，57.0(C-5)，19.9(C-6)，38.2(C7)，40.7(C-8)，48.4(C-9)，38.8(C-10)，24.6(C-11)，130.2(C-12)，135.4(C13)，58.1(C-14)，27.7(C-15)，26.8(C-16)，50.0(C-17)，56.2(C-18)，39.0(C19)，40.3(C-20)，31.9(C-21)，38.4(C-22)，29.3(C-23)，18.4(C-24)，17.8(C- 25)，20.2(C-26)，181.3(C-27)，179.3(C-28)，19.5(C-29)，22.6(C30)，108.2(C-1′)，77.0(C-2′)，79.5(C-3′)，73.1(C-4′)，80.0(C-5′)，64.4(C-6′)。 以上数据与文献报道的 3-O-［β-D-glucopyranosyl］quinovicacid［5］一致，故鉴定 为 3-O-［β-D-glucopyranosyl］-quinovicacid。 3 讨论 前期的文献工作表明皂苷类和黄酮类化合物是驼蹄瓣属植物特征化学成分，我们的研 究结果也表明了这一点，具有一定的化学分类学意义，为将来进一步的研究该类植物提供 了一定参考价值。 【摘要】介绍了近十年来，卷丹和百合化学成分和提取方法方面的研究进展，主要集 中在甾体皂苷、多糖和秋水仙碱；甾体皂苷的提取方法有醇提—大孔树脂吸附法、醇提— 正丁醇萃取法；多糖的提取方法有水提醇沉法和复合酶法；秋水仙碱的提取方法有有机溶 剂提取法和超临界二氧化碳流体萃取法。 【关键词】卷丹百合成分提取 Abstract： ThisarticleintroducedtheresearchadvancementofLiliumlancifoliumThunb.andL. browniiF.E.BrownVar.viridulumBakerchemicalcompositionsandtheextractionm ethodinrecenttenyears,mainlyconcentratedinthesteroidsaponin,thepolysaccha rideandthecolchicine,thesteroidsaponinextractionhasethanolextractthepocketresinabsorptionlawandethanolextractionthenormalbutylalcoholextractionmethod;thepolysaccharideextractionhaswater extractandethanoltosink,thecompoundenzymelaw;thecolchicineextractionhast heorganicsolventextractionprocessandthesupercriticalcarbondioxidefluidextra ctionmethod. Keywords： LiliumlancifoliumThunb.;L.browniiF.E.BrownVar.viridulumBaker;Ingredient;Extr action 中药百合来源于植物卷丹 LiliumlancifoliumThunb.百合 L.browniiF.E.BrownVar.viridulumBaker 和细叶百合 L.pumilumDC.的干燥肉质鳞叶， 最早记载于《神农本草经》，细叶百合主要分布于东北，野生为主，市场少见。卷丹和百 合在全国分布较广，在长江流域广为栽培，为百合药材的主要来源。其主要成分有皂苷类、 多糖、生物碱、微量元素及蛋白质、磷脂、无机元素等。研究表明，百合在止咳化痰、抗 疲劳与耐缺氧、升高外周白细胞、降血糖及抑制迟发过敏性反应、催眠安神等方面均具有 显著效果。 1 化学成分 1.1 皂苷类 近几年来百合皂苷的研究主要集中于甾体皂苷，侯秀云等［1］从百合中分离得到 β谷甾醇(Ⅰ))、胡萝卜苷(Ⅱ)、正丁基-β-D-吡喃果苷(Ⅲ))、26-O-β-D-吡喃葡萄糖 3β，26-二羟 基-5-胆甾烯-l6，22-二氧 3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)、26-O-βD-吡喃葡萄糖 3β，26-二羟基胆甾烷-16，22-二氧-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡