苦玄参化学成分研究论文

【摘要】对苦玄参的化学成分和定量分析的研究概况进行了综述，为深入研究该类中 药提供进一步参考。 【关键词】苦玄参化学成分定量分析 Abstract:Anoverviewwasmadeonchemicalconstituentsandquantitativeanal ysisofPicriafelterraeLour.Thepaperwillprovidereferencetothesubsequentstudy. Keywords:PicriafelterraeLour;Chemicalconstituents;Quantitativeanalysis 苦玄参为玄参科(Scrophulariacea)Scrophulariacea)植物苦玄参 PicriafelterraeLour.的干燥全草， 为广西常用中药，系玄参科苦玄参属唯一的一种植物，为一年生草本，其性寒味苦，具有 清热解毒、消肿止痛的功能。用于感冒风热、咽喉肿痛、痄腮、胃热腹痛、痢疾、跌打损 伤、疖痈、毒蛇咬伤［1,2］等证。在广西民间传统应用已有二百多年的历史，收载于广 西中药材标准中，具有良好的应用前景。现将其近年来在化学成分和质量分析的研究进展 综述如下。 1 化学成分 迄今为止，苦玄参中的化学成分主要集中在葫芦苦素(Scrophulariacea)Cucurbitacin)三萜成分和黄酮 类化合物的研究报道，国内外对苦玄参进行研究，发现其有效成分主要为四环三萜苷类。 三萜成分是苦玄参中最早被报道的一类化学成分，由于它们与葫芦科植物中的苦味素结构 相似，所以也有文献将其称为葫芦苦素(Scrophulariacea)cucurbitacin)［3］。成桂仁等自苦玄参药材中 共分离鉴定了 6 个葫芦苦素类苷元、1 个皂酮、10 个皂苷［4～17］和 3 个黄酮 ［18］。王力生等［19］从苦玄参乙醇提取物的较低极性部位中分离鉴定了 6 个化合物， 即 N-benzoylphenylalanyl-L-phenylalaninolacetate①，1-羟基-7 羟甲基蒽醌②， 9，16-二羟基-10，12，14-三烯-十八碳酸③，5，7，4''''-三羟基黄酮④，β-谷甾醇⑤和 胡萝卜苷⑥。化合物①～③的 13C-NMR 数据为首次提供。邹节明等［20］用硅胶和 MCI 柱色谱分离纯化，得到 2 个不含呋喃环的葫芦苦素类化合物，分别鉴定为 11，24-二酮5，21-二烯葫芦素-3α-O-β-D-吡喃木糖基-16α-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（脱氢拜俄尼苷）和 己降葫芦苦素 F，其中前者为新化合物，后者首次从苦玄参中分离得到。此外，他们还用 采用大孔树脂、硅胶柱色谱纯化得到一个新的三萜皂苷——11，22-三羰基-16α-羟基(Scrophulariacea)20s，24)-环氧苦味素-5，23-二烯-2β-O-β-D-吡喃葡糖苷（苦玄参苷 XI）［21］。现 将已从苦玄参中分离鉴定的三萜成分和黄酮类化合物结构整理如下。 1.1 四环三萜类苷及苷元 见表 1～2，图 1～6。表 1 四环三萜类苷及苷元结构式（略）表 2 四环三萜类苷及苷 元结构式（略）表 3 黄酮类化合物结构式（略） 2 定量分析 四环三萜苷类是苦玄参中主要活性成分，苦玄参 IA 和 IB 是其中的主要苷元，药理实 验证明，苦玄参干浸膏有明显的抗炎及镇痛作用［22］。2005 版《中国药典》正文中尚 未收载该品种，但有些以其为原料的中成药如妇炎净胶囊等已收载入《中国药典》（2000 年版及 2005 版）［23］。目前学者对苦玄参质量分析的研究主要集中在对苦玄参药材及 其中成药中苦玄参苷 IA 含量的测定方面。 2.1 高效液相色谱法陈勇等［24］用 RP-HPLC 法，采用 C18ODS2 柱 (Scrophulariacea)5μmm，4.6mm×250mm)，以乙腈-0.3％磷酸(Scrophulariacea)34∶66)为流动相，流速 lml／min，柱温 为 25℃，检测波长为 264nm，对不同产地、不同采收季节苦玄参中苦玄参苷 IA 进行含 量测定。结果显示，苦玄参苷 IA 进样量在 0．42～2．10μmg 的范围内呈良好的线性关系 （r=0.9999），平均回收率为 100.4％，RSD=1.64％(Scrophulariacea)n=6)。实验证明不同产地苦玄 参中苦玄参苷Ⅰ A 的含量不同，苦玄参采收季节不同是影响其含量的一个因素。 邹节明等［25］将超滤技术用于苦玄参等药材有效成分的分离提取，以提取物中有效 成分（苦玄参苷Ⅰ A）的转移率、药液的膜通量和干膏（固体物）降低率 3 个考察指标作 为评价的标准，对苦玄参水提液进行超滤实验，用 HPLC 法测定苦玄参苷 IA 的含量，结果 在超滤前药液中的含量约为 0.28％，而超滤后在药液中能达到 0.22％以上，转移率能够 达到 80％以上，干膏降低率达到了 45％以上，取得了良好的效果。 郑成远等［26］采用 RP-HPLC 法测定湖南张家界、广西梧州、安徽亳州、江西樟树 和河南商丘 5 个产地苦玄参中苦玄参苷 IA 含量，色谱条件为：Kro-masilC-18 柱 (Scrophulariacea)4.6mm×250mm,5μmm)，柱温 35℃；流动相乙腈-0.5%醋酸=36∶64，流速 1.0ml/ min，检测波长 264nm。结果显示各地苦玄参药材中苦玄参苷Ⅰ A 的含量差异较大，安 徽亳州和江西樟树所产苦玄参药材中苦玄参苷Ⅰ A 的含量较高。 邹节明等［27］以 HPLC 法测定苦玄参苷 IA 的含量为指标，筛选适用的大孔吸附树 脂型号，评价树脂吸附与解吸工艺，结果表明苦玄参提取物精制适用 HPD50 号树脂，吸 附阶段泄漏点和饱和点分别在 1.5 和 l1 左右，解吸阶段的适用乙醇浓度分别为 50%，苦 玄参苷 IA 含量可提高 4 倍以上。 甄汉深等［28］采用 AgilentZORBAXEclipseXDBC8 色谱柱 (Scrophulariacea)4.6mm×150mm，5μmm)，以乙腈-0.5%醋酸(Scrophulariacea)32∶68)为流动相，流速 1ml·min-1，检 测波长 264nm，测定广西两种不同产地种植的苦玄参药材的茎、叶中苦玄参苷Ⅰ A 的含 量。实验结果显示，苦玄参苷Ⅰ A 在 2.28～11.4μmg 范围内线性良好，平均加样回收率为 101.1%，RSD=2.4%(Scrophulariacea)n=5)。两种产地叶中苦玄参苷Ⅰ A 均明显高于茎。 胡慧玲等［29］用 KromasilODS-1HPLC 柱 C18(Scrophulariacea)250mm×4.6mm,5μmm)，以乙 腈-水-冰醋酸(Scrophulariacea)38∶62∶0.5)为流动相，流速 1.0ml/min，柱温 40℃，检测波长 264nm， 对妇炎宁片中的苦玄参苷 IA 进行了含量测定。结果为苦玄参苷 IA 在线性范围为 0.1～ 0.6μmg 范围内线性良好(Scrophulariacea)r=0.9995)，平均回收率为 101.22%，RSD=2.16%(Scrophulariacea)n=5)，10 批样品的平均测定结果为 3.44mg/g。 2.2 薄层扫描法邹节明等［30］采用薄层扫描法测定不同产地苦玄参的根、茎、叶中 苦玄参苷Ⅰ A 和Ⅰ B 的含量，以甲醇为溶媒，超声提取苦玄参各药用部位，提取物经大孔 树脂 D101 精制后，点于含 1%CMC-Na 的硅胶 GF254 板上，以氯仿-甲醇-水(Scrophulariacea)4∶1∶0.1) 为展开剂展开后，用 CAMAGTLCⅢ 型线性扫描仪测定，检测波长为 268nm，狭缝尺寸为 8mm×0．6mm。结果显示，苦玄参苷Ⅰ A 的点样量在 1.1～5.4μmg，苦玄参苷Ⅰ B 在 1.0～6.2μmg 范围内与各自峰面积呈良好的线性关系，r 分别为 0.9990 和 0.9992，加样 回收率分别为 98.3%和 97.5%；在同一产地不同药用部位中，苦玄参苷Ⅰ A 和 IB 的含量： 叶中最高，茎中次之，根中最低；在同一药用部位中，叶中苦玄参苷Ⅰ A 含量高于Ⅰ B， 根和茎中苦玄参苷Ⅰ B 含量高于Ⅰ A。 陈勇［31］采用双波长薄层扫描法分别测定炎肿化毒片、炎见宁片和妇炎净胶囊中苦 玄参苷Ⅰ A 的含量，用 5%CMC-Na 的硅胶 GF254 板，展开剂为氯仿∶甲醇=4∶1，在紫外 灯下（254nm）检视定位，进行光谱扫描，扫描条件为： λS=270nmS=270nm，λS=270nmR=350nm，SX=3，反射式锯齿形扫描。结果表明苦玄参苷Ⅰ A 的点样 量在 2.4～7.2μmg 间呈良好的线性关系，平均加样回收率为 97.9%，RSD=1.8% (Scrophulariacea)n=5)。蒋明廉［32］用同样的方法测定苦玄参中苦玄参苷Ⅰ A 的含量，从测定结果来看， 与成桂仁［12］报道从苦玄参中提取分离苦玄参苷Ⅰ A 和Ⅰ B 的收得率 0.25%和 0.17% 基本一致。 2.3 其他方法王力生等［33］以 TLC 为检测手段，考察 D-101 大孔吸附树脂对苦玄 参总皂苷的吸附和洗脱条件，并采用分光光度法测定提取物中苦玄参皂苷的含量。结果 D101 大孔吸附树脂可以把苦玄参总皂苷含量由浸膏中的 8.7%提高至 27.3%，增加 20% 乙醇洗脱操作可进一步提高至 52.1%；苦玄参总皂苷的最大吸收波长为 261nm，与苦玄 参苷Ⅰ A 一致。苦玄参苷Ⅰ A 在 4.56～91.2μmg/ml 与吸光度呈良好的线性关系，平均回 收率为 96.3%。结果表明，D-101 大孔吸附树脂能有效富集并纯化苦玄参总皂苷；分光 光度法测定苦玄参总皂苷含量具有快捷、准确的特点。 3 结语 苦玄参所含化学成分复杂，具有多种生物活性。本文依据皂苷元母核将其归纳分类， 为进一步探讨苦玄参的化学成分和构效关系研究提供了方便和依据。 苦玄参苷 IA 是苦玄参三萜部位中含量最高的成分，在干植物中的含量约为 0.25%［12］，有中枢抑制作用和抗补体作用［3］，是苦玄参的主要活性成分，因此苦 玄参定量分析方面报道最多的是苦玄参苷Ⅰ A 的含量测定，各地苦玄参药材中苦玄参苷 Ⅰ A 的含量差异较大，含量的差异与很多因素有关，与采收的季节也有关系，因此，今后 可对苦玄参的最佳采收期及最适加工方法进行进一步考究。 苦玄参苷Ⅰ A 的含量测定方法比较发现，薄层扫描法测定含量时易出现斑点不清、拖 尾等现象。高效液相色谱法集分离和测定为一体，简便、稳定、重复性好，易与其他干扰 成分分开，可作为苦玄参质量控制的研究方法。 【摘要】小叶榕含有萜类、黄酮、脂肪族化合物和甾体化合物等化学成分，具有止咳、 祛痰、平喘的作用，抗血小板活化因子和抗炎作用等药理活性。文章对小叶榕的化学成分 和药理活性的研究进展进行了综述，指出了小叶榕研究存在的主要问题和今后研究的主要 方向。 【关键词】小叶榕化学成分药理活性 Abstract:FicusmicrocarpaL.f.whichcontainsterpenes,flavonoids,poundsand steroidshasbeenusedforthereliefofcoughsandasanexpectorant，plateletactivat ingfactorinhibitorandantiinflammatoryagents．Thephytochemicalandpharmacologicalresearchprogressi nFicusmicrocarpaL.f.，includingthechemicalingredientsandthepharmaceutical activitieswerereviewedinthispaper．Atthesametime,themainproblemsatpresen tandtheresearchdirectionforthefutureonFicusmicrocarpaL.f.havealsobeenputfo rward． Keywords:FicusmicrocarpaL.f.；Chemicalconstituents； Pharmacologicalactivities 小叶榕为桑科植物榕树 FicusmicrocarpaL.f.的叶，异名落地金线(Scrophulariacea)《本草求原》)， 全世界有八百多种，主要分布在热带亚热带地区。我国榕属植物约 100 种，属热带雨林的 关键种类。主要分布在福建、广东、广西、海南、台湾和浙江等地,为当地的主要植物品种 之一。入药主要用其叶（FoliumFiciMicrocarpae），有研究表明小叶榕叶中主要含黄酮、 三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等。用小叶榕浸膏作为主要成分的哮喘和 慢性支气管炎治疗药咳特灵胶囊已收载在部颁标准中。其中药用成分对治疗心血管疾病、 抗炎、抑菌等方面都有显著的效果［1，2］，民间早有使用。其中黄酮类和内酯类等有效 成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方 面有显著效果，无毒副作用，并以此开发出多种药品和保健食品。近几年来，有关小叶榕 化学成分和药理活性的研究取得了较大进展，从中得到了一系列的新化合物。笔者就 20 世纪 80 年代以来的有关报道作一概述。 1 化学成分研究 1.1 国内的研究现状检索国内文献未发现有对其单体化合物的分离纯化研究方面的报 道，仅见有对其总黄酮进行分离报道： 叶荣科等［3］报道采用比色法对小叶榕叶中总黄酮水提醇沉工艺进行了较系统的研 究，方法：对不同比例醇沉结果进行比较，用芦丁为对照，比色法 500nm 处测定总黄酮 含量。结果：50%～60%醇沉含量最高。该结果对于生产工艺的改进有很好的参考价值。 夏杏洲等［4］报道用水、石油醚、乙醇分别从榕树叶中提取总黄酮类化合物的工艺， 着重研究醇提法的最佳工艺条件。结果表明：乙醇浓度 60%，固液化 1∶30，在 70℃下浸 提 2h，效果最佳。 龙光锦等［5］报道采用纯物理的工艺流程过程和分光光度法从榕树叶中提取黄酮类 物质,并对所提取的黄酮类物质进行验证。该工艺流程为：将烘干的小榕树叶，粉碎，烘干， 加蒸馏水煮沸。冷却后进行粗过滤，对滤渣用上述方法进行再浸取 2 次。将 3 次滤液合并， 滤液用高速离心机分离。并进行加热浓缩。浓缩冷却后加入乙醇，放入冰箱冷却，再用离 心机分离，过滤得到滤液滤渣，丢弃滤渣，对滤液进行蒸发浓缩，将浓缩液置于真空干燥 箱干燥成疏松固体，粉碎后得到最终产物。测得样品中总黄酮的含量 C=8.36%。回收率 为 97.9%,其纯度和产率均较高。 黄锁义等［6］采用超声波乙醇浸提法从榕叶中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮类 物质进行验证，并用分光光度法测定含量。结果测得样品中总黄酮的含量 C=2.660mg/ ml，回收率为 100.2%，其纯度和产率均较高。该方法采用全物理过程，无任何污染，是 提取榕树叶黄酮类物质的有效途径。 1.2 国外研究进展检索国外文献发现，已经有人陆续从小叶榕的叶、须、干、果、树 皮中提取其化学成分，并对其活性作了一些相关的报道。 早在 1987 年，Higa,M 等［7］就从小叶榕的叶子中提取分离出了脂肪族化合物 （pds）、甾体化合物(Scrophulariacea)steroids)、羽扇烯乙酯(Scrophulariacea)lupenylacetate)、无羁萜(Scrophulariacea)friedelin)、 粘霉醇(Scrophulariacea)glutinol)、表木栓醇(Scrophulariacea)epifriedelinol)、蒲公英醇(Scrophulariacea)taraxerol)和石竹素 (Scrophulariacea)oleanolicacid)等化合物。不过，后来未见有任何对其叶子化学成分的研究报道。 1996 年，Higa,M 等［8］报道了从小叶榕的果子中提取分离了：β-香树素乙酯、β香树素、谷物混合物酸、2α-羟基熊果酸、石竹素(Scrophulariacea)oleanolicacid)、β 谷甾醇和 3、4-二 羟苯甲酸等化学成分。 1997 年，Kuo,Y.H.,Li,Y.C.等［9］从小叶榕的树皮（bark）中提取分离了 2 个异黄 酮和其他 28 个化合物。其中 2 个异黄酮为新化合物。它们的结构为： 1998 和 2000 年 Kuo,Y.H.,Li,Y.C.等［10,11］又分别报道了从小叶榕的树干 （heartwood）提取分离了一种单萜类化合物。酚类化合物，一种木酚素和 γ-内酯。 1998 年，YEN-CHENGLIandYueh-HsiungKuo 等［11］从小叶榕的树干 （heartwood）中提取分离了 3 个新的化合物。它们的结构如表 1 所示。表 1 小叶榕树树 干中分离出的化合物结构（略） 从小叶榕的须中提取和分离的化学成分相对较多，在 2002 年 YiMingChiangandYueh-HsiungKuo 等人［12］报道从小叶榕的须中提取分离了 3 个新的 三萜类化合物（1，2，3）和 2 个已知化合物（4，5），结构分别如下： 在 2003 年，Yi-MingChiangandYueh-HsiungKuo 等报道了［13］从小叶榕的须 中提取分离了 2 个新的化合物，分别命名为 α-tocospirosA 和 α-tocospirosB，还有一种 维生素 E（tocopherol）.他们的结构分别如下 1，2，3： 在 2005 年，他们又报道了［14］从小叶榕的须中提取了 6 个三萜化合物和 9 个新化 合物。它们的名称和结构见表 2。表 26 个三萜化合物及 9 个新化合物名称及结构（略） 2 药理作用 2.1 镇咳、祛痰、平喘的作用韦锦斌等［15］对小叶榕水提物和醇提物止咳平喘作用 进行了比较研究。以小鼠制作动物咳嗽模型，采用浓氨水喷雾致咳法，以咳必清为阳性对 照药，观察小叶榕水提物、醇提物的止咳作用；以豚鼠制作动物哮喘模型，采用磷酸组胺 喷雾致喘法，以氨茶碱为阳性对照药,观察小叶榕水提物、醇提物的平喘作用。结果表明， 水提物、醇提物均有明显的止咳、平喘作用，且醇提物的作用稍强于水提物。 2.2 抗肿瘤和其他作用研究结果表明，小叶榕含有大量的三萜类成分，其中一些三萜 有明显的抗肿瘤活性［16～19］,抗血小板活化因子作用（anti-plateletactivity） ［14］，其中的黄酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、 降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用［20～22］。 3 小结 从以上论述中可看出，国内对小叶榕的化学成分研究还很缺乏，只是对其总黄酮的提 取有个初步的研究，迄今为止，国内还没有任何有关小叶榕的单体化合物的研究报道，相 对而言，国外对小叶榕的化学成分的研究比较多，特别是对其须、干、皮、叶等部位的研 究较多。另外，国内外对其有效活性部位和有效成分进行活性追踪的研究报道还相对缺乏。 小叶榕在我国南方地区有极其丰富的资源，用小叶榕浸膏作为主要成分的哮喘和慢性 支气管炎治疗药咳特灵胶囊已收载在部颁标准中，入药主用其叶，然而，到现今为止，仅 仅只是从小叶榕中叶子中提取分离了 6 个萜类化合物，并且在小叶榕浸膏质量标准中没有 详细的质量控制方法，仅仅是检查其水不溶物和测定其浸出物，这样的质量标准不能准确