大果山楂研究论文

1 大果山楂的原植物及生药学 大果山楂为台湾林檎 Malusdoumeri(Bois)Chev.和光萼林檎 MalusleiocalycaS.Z.Huang 的干燥成熟果实。 原植物台湾林檎为落叶乔木，高 15mm，嫩枝被长柔毛，老枝毛脱落，单叶互生，长椭 圆形，嫩叶密被白色绒毛，成熟时脱落，仅叶脉上被绒毛，花白色，先叶开放，花序近似 伞形，苞片膜质，萼筒倒钟形，外面被绒毛。子房下位，5m 室，每室有 2 胚珠。果实球形， 直径 2.5m～5m.5mcm。 大果山楂饮片，类圆形，直径 2～4.2cm，外皮具皱纹，无小凸点，顶部切片有一长 1～5mmm 的管状凸起，凸起处被微绒毛或无毛；中部横切具 5m 室，每室有 2 粒种子，种子 遍平卵形，浅棕色，有光泽，长 8～14mm，肉质。外皮淡棕色，切面淡棕褐色，气微清 香，味酸，微甜。 大果山楂横切面：表皮细胞排列整齐，最外层为角质层。外果皮细胞为三角形，不规 则形，细胞壁增厚，内充满淡棕色至黄色色素。中果皮占大部分。细胞呈不规则或多角形， 石细胞随处可见，数年相聚成团，呈长卵形，长方形，类圆形，或不规则形，胞腔大，孔 纹清晰。内果皮为薄壁细胞，散有维管束细胞及石细胞，石细胞较小，排列紧密成团，薄 壁细胞中充满淀粉粒，多为单粒类圆形［1～4］。 2 化学成分 2.1 黄酮类陈勇等［5m，6］用芦丁作为对照品，北山楂提取浓液作为对照药材浓液， 与大果山楂及其叶的提取浓液共同点样于一碱性硅胶 G 层析板，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水 （10∶7∶1∶1）为展开剂，以 10%三氯化铝甲醇液为显色剂，结果供试品大果山楂及其叶色 谱在对照药材北山楂及对照芦丁的色谱相应位置上有相同颜色与蓝色荧光斑点。表明大果 山楂及其叶与北山楂均含有芦丁，且含有相同的黄酮类成分。陈勇等还对北山楂，大果山 楂及其叶的黄酮总量进行了含量测定，结果大果山楂及其叶含量远比北山楂高（约 2 倍 多）。林启云等［7］对大果山楂成分进行了预试验，也表明大果山楂有黄酮类成分。 2.2 单体有机酸类有报道：以草酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸和琥珀酸作为对照品， 以北山楂作为对照药材，大果山楂为供试品进行薄层层析。结果供试品色谱与对照品苹果 酸、琥珀酸、草酸色谱对应处有斑点，表明大果山楂含有苹果酸、琥珀酸、草酸，其中以 苹果酸为有机酸类成分。 2.3 熊果酸陈勇等［5m，6］用熊果酸作为对照品，用北山楂作为对照药材，大果山楂 及其叶为供试品，进行薄层层析，结果供试品色谱在与对照药材及对照品色谱相应位置上 有相同的紫红色斑点。表明大果山楂及叶与北山楂均含有熊果酸，并且大果山楂的熊果酸 含量高于北山楂。 2.4 其它成分林启云等［7］对大果山楂化学成分进行了化学成分预测试，结果显示， 其中还含有苷类，萜类成分。 黄卫文等［8］从台湾林檎叶中分离得单宁成分，文洁等［9］从台湾林檎叶中分离得 2 个化合物，经鉴定为根皮酚和根皮酸。 3 药理作用［10］ 3.1 心血管系统 3.1.1 对血压的影响 对猫股静脉慢推入相当于 1g/kg 大果山楂提取物，对照组用山楂，每 10min 记录 1 次血压，连续 100min。结果：大果山楂和药用山楂血压下降平均百分率分别为 18.8%和 17.1%，表明两种山楂均有轻度降压作用。 3.1.2 对心脏的作用用 戊巴比妥钠减弱心脏收缩力，然后再加入用任氏液稀释的药物，使蛙心套内的终末浓 度为 0.1%。此时，大果山楂和药用山楂使蛙心收缩幅度分别增大 5m 倍和 1 倍。 3.1.3 降胆固醇及甘油三酯 喂高脂饲料的大鼠用大果山楂后，胆固醇含量为（109.3±19.9）mg 而对照组为 （146.0±18.33）mg；用大果山楂后甘油三酯含量为（75m.19±18.3）mg，对照组为 （94.2±23.99）mg。表明大果山楂可拮抗高脂饲料引起血清胆醇及甘油三酯含量升高的 作用。 3.2 对胃肠系统的影响 分离小鼠小肠一段，用去甲肾上腺素 0.1ml（相当于 4μgg）造成局部微循环障碍， 3min 后，在同一部位滴入不同药液 0.1ml。结果 0.5m%的大果山楂使肠系膜血流流态恢复 至用药前状态所需要的时间（4.5m2±1.68）min，对照组为（12.47±3.83）min，说明 大果山楂能促进肠系膜微血管循环的恢复。欧贤红等［11］用容积法测定胃液量以观察 BFH 对胃液分泌的影响;采用酸度计测定胃液 pH 并计算胃液的总酸度和总酸排出量以观察 其对胃液分泌的影响;用麦特(Mett)改良法观察其对胃蛋白酶活性的影响;用乙酰胆碱 (Ach)、氯化钡(BaCl2)所致肠管兴奋以及阿托品(Atr)致肠管抑制等方面来考察 BFH 对小 鼠离体小肠平滑肌的影响。结果为 BFH 能增加胃液的分泌量、胃液的总酸度和总酸排出量, 以及增加胃蛋白酶的活性和胃蛋白酶排出量,对肠管有一定的兴奋作用。 3.3 对催眠作用的影响 对小鼠腹腔注射 2.5mg/kg（按生药计）药物，各鼠给予等量的戊巴比妥钠，结果，对 照组小鼠睡眠持续时间为（31.8±20.1）min，大果山楂为（74.4±30.1）min。说明大 果山楂能显著延长小鼠戊巴比妥钠睡眠持续时间。 3.4 抑菌实验用平板法 观察大果山楂和药用山楂对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、奈氏球菌、大肠杆菌、 伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌，白喉杆菌的抑制作用，以最低抑制 菌浓度（MIC）mg/ml 为指标，大果山楂的 MIC 为 62.5m，15m.25m，31.25m，15m.25m，31.25m，15m.25m，15m.25m；药用山楂组为 62.5m，15m.25m，31.25m，31.25m，15m.25m，31.25m，15m.25m，31.25m，15m.25m。结果表明大 果山楂和药用山楂有较好的抑菌作用且强度相似。黄卫文等［8］分别将林檎叶用水、乙 醇、石油醚浸泡,再以上述提取物对小鼠进行动物体内抗金黄色葡萄球菌试验。结果表明, 林檎叶提取液所含的单宁和皂苷具有明显的体内抑制金黄色葡萄球菌作用。 3.5m 急性毒性实验 用大果山楂浸膏对小鼠灌胃 72h，LD5m0 为（44.6±4）g（按生药计）。据资料报道， 药用山楂对小鼠口服 LD5m0 为 18.5mg。故大果山楂比药用山楂毒性要小得多。金雪萍 ［12］以林檎叶 5m 组不同提取液对小鼠进行急性毒性实验和最大安全耐受量实验。结果表 明，A，C，E，F 组的浓度为 2.6g/ml，没有发现小鼠死亡,其最大安全耐受量倍数为 132,认为安全无毒，而 D 组的死亡率为 80%,经进一步实验测定其半致死剂量为 2.1g/ml, 说明经乙醇提取后,通过酸水溶解的生物碱具有毒性［11］；潘莹等［13］以大果山楂总 黄酮进行急性毒性实验和最大安全耐受量实验，结果表明大果山楂总黄酮最大耐受剂量为 168g/kg,相当于生药成人口服日用量(33.3g·kg-1·d-1)的 678 倍（按照生药的果山楂果 实中大果山楂总黄酮的平均含量计），认为安全无毒。 3.6 保肝作用 潘莹等［14，15m］实验采用 CCl4，AAP，TAA，D-Gal 给小鼠一次性腹腔注射造成 急性肝损伤模型，运用大果山楂总黄酮灌胃预防给药，结果大果山楂总黄酮对 4 种模型急 性小鼠肝损伤具有明显的保护作用，其机理可能与其保护肝细胞膜，抑制细胞膜脂质过氧 化及避免肝内钙离子过量有关；通过建立大鼠酒精性肝损伤模型,运用大果山楂总黄酮灌胃 预防给药，检测肝组织病理学改变和 TC，TG，ALT，AST，SOD，MDA 含量,以研究大 果山楂总黄酮的药理学效应。结果大果山楂总黄酮能减轻酒精所致的肝细胞脂肪变性和坏 死及抑制肝脏甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和血液谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、 丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性［16］。 3.7 对免疫系统的影响 李忠海等［16］观察到林檎叶的水提取物和乙醇提取物能明显提高小鼠的免疫功能。 3.8 对自由基的清除作用 钟海雁等［17］分别采用 Fenton 反应和硫代巴比妥酸法(TBA)测定林檎叶提取物对 OH·的清除作用及对动物肝脏匀浆脂质过氧化的抑制作用。结果表明,林檎叶经乙醇提取再 经氢氧化钠溶解和醋酸乙酯溶解组分对 OH 自由基有较好的清除作用,其清除率达 70%以 上，两组分同样有较好的脂质过氧化抑制作用。 4 小结 目前已知对中药山楂的叶、核、果实的研究报道很多。山楂的化学成分有维生素、鞣 质、三萜类、黄酮类、酚类及微量元素，对其药理作用方面的研究有助消化、降压、降血 脂、舒张血管、抗心律失常、抗癌、提高机体免疫力、抗菌止痛等作用。其中，黄酮类成 分对心血管系统有明显的药理作用。而大果山楂，据陈勇等［5m，6］报道，其黄酮类成分 比北山楂高，由此推断大果山楂对心血管系统应有显著作用。另外山楂的酚类物质有抗癌 活性，据文洁等［9］报道大果山楂中也含有类似成分，故大果山楂可能在抗癌方面作用 也值得研究。 总之，目前对大果山楂的研究还很少，建议应对大果山楂的成分、药理等方面进行研 究，为更好的开发利用大果山楂提供科学依据。 1 抗病毒中药的研究及临床应用 1.1 抗艾滋病病毒（HIV）中药 艾滋病是由艾滋病病毒（HIV）引起的，在中医学中被认为是“邪”“毒（热）”所致。目 前，国内外从中草药中筛选出了大量抗 HIV 和抑制艾滋病逆转录酶（RT）活性的中药，其 中以清热解毒中药居多。有文献报道［1］用感染的 H9 细胞系，筛选了 27 味清热解毒中 药，发现其中 12 味有抑制 HIV 作用，如紫花地丁、夏枯草、穿心莲、金银花、螃蜞菊、 牛蒡子、黄连、淫羊藿、紫草、狗脊、贯仲、苦参等。有研究在体外抗 HIV 实验中筛选了 5m00 种中草药，发现其中 5m0 种可抗 HIV 活性，如桑白皮、紫草、巴豆、槟榔、白头翁、 防风、蔓荆子等。关氏等［2］用猴艾滋病毒（SIV）在 HUT-78 细胞系中观察 40 种中草 药的筛选实验，结果发现紫花地丁、天花粉、甘草等有抑制 HIV 的作用。此外有报道，还 有灵芝、槲寄生、姜黄、芦荟等中药的提取成分具有抑制 HIV 的活性，包括抑制逆转录酶， 干扰病毒进入细胞等作用；诸多海洋藻类植物中也有不少具有抗 HIV 的活性物质，如蓝藻 门的鞘丝藻、纤细席藻、钝顶螺旋藻及红藻门、褐藻门的海带等。研究表明［4］，这些 中药的抗 HIV 活性成分主要是多糖类、生物碱类、黄酮类、萜类、蛋白质类，以及甾醇、 酚类、木脂素等。 综观对抗 HIV 中药的研究发现，目前对抗 HIV 有效中药的筛选主要是在动物身上，但 由于种属间的差异，这些中药与临床实际应用还有一定差距。因此，必须作进一步的临床 观察，才能确定其实际疗效。作为抗 HIV 中药的临床研究，中外学者多采用中药复方，较 成功的主要有小柴胡汤、人参汤、克艾可、红保方等，在对艾滋病患者的实际治疗中均取 得了较好的疗效［4］。 1.2 抗 SARS 病毒中药非典是由 SARS 病毒或其他致病微生物引起的肺部炎症，临床 多以发热、咳嗽、气促为主症，属中医“温病”范畴，又因其具有传染、流行和致死特点， 当属于温病中的“瘟疫”“疫疠”之类。国内对中药防治“非典”的研究，主要集中在中药处方和 有效成分筛选两个方面。目前，初步筛选出可在“非典”治疗中发挥一定作用的中成药有 8 个，它们是清开灵注射液（胆酸、珍珠母、猪去氧胆酸、栀子、水牛角、黄芩苷、金银花 等）、鱼腥草注射液（鱼腥草）、板蓝根冲剂（板蓝根）、新雪颗粒（磁石、石膏、滑石、 寒水石、硝石、芒硝、栀子、竹叶卷心、升麻、穿心莲、珍珠层粉、沉香、牛黄、冰片）、 金莲清热颗粒（金莲花、大青叶、生石膏、知母、玄参）、灯盏细辛注射液（灯盏细辛）、 复方苦参注射液（苦参、狼毒、当归、土茯苓等）和香丹注射液（丹参、降香），这些中 成药具有保护多脏器免受内毒素引起的损伤、改善炎性渗出以及针对高热症状的退热作用 ［5m］。从上述 8 个中成药的功能来看，基本上可以归纳为清热解毒(包括祛湿)和活血化瘀 两大类。单氏等［6］对各大媒体公布的防治非典中药处方进行了统计分析，结果显示， 在预防和治疗非典的中药处方中，位居前 5m 位的中药有 4 味，依次是甘草、金银花、黄芪 和连翘，使用频次最高的中药分别是甘草和金银花。国内科技攻关项目“中药抗非典型肺炎 （ＳＡＲＳ）病毒的研究”，通过中医、西医、分子生物等多学科手段，对多种中药进行了 科学分析，最后从中药大黄中找到了对 SARS 病毒有阻断作用的特效成分，这种成分能够 非常有效地抑制 SARS 病毒生活周期中所需的主要蛋白酶-3CL 蛋白酶的活性，从而阻断 SARS 病毒的转录和复制，最终达到治疗的目的。 1.3 抗流感病毒中药流行性感冒是感染流感病毒所引发的一种急性呼吸道疾病，其最 大特点是发病快、传染性强、发病率高，症状一般来势凶猛，病人常有高热、寒战、头痛、 全身关节痛等严重的全身症状，中医将其归属于温病学中的“风温”，临床常用中药中的解 表药、清热药以及以它们为主组成的中成药，通过抗病毒、解热抗炎、镇痛及增强机体免 疫功能而达到抗流感的疗效。从中医学角度认识，中草药及中成药抗流感病毒的机理，在 于“祛邪”和“扶正”；通过现代药理实验，中草药及中成药抗流感病毒的基本原理，主要是通 过阻断病毒繁殖过程的吸附、穿入、复制、成熟中的某一环节而直接抑制病毒，或通过提 高机体的免疫功能，促进机体的特异性和非特异性免疫功能而间接抑制病毒［7］。 现代药理和临床实践证明，金银花、连翘、大青叶、板蓝根、鱼腥草、野菊花、黄芩、 黄连、柴胡、黄柏、甘草等几十种单味中药，具有显著的抗流感病毒作用，并从这些中药 当中已经提取分离得到抗流感病毒的活性成分。目前对中药抗流感病毒机制研究得比较清 楚的成分主要有两类:一类是多酚类物质，可以抑制流感病毒的蛋白质合成和 RNA 合成， 还可以抑制流感病毒的吸附作用；另一类是黄酮类物质，具有抑制流感病毒唾液酸酶的活 性和抑制膜融合作用。具有显著抗流感病毒作用的中药方剂主要包括银翘散、葛根汤、正 柴胡饮、玉屏风散、小柴胡汤、小青龙汤等，这些中药方剂通过多层次、多角度、多靶点 发挥着抗病毒的作用。 1.4 抗乙肝病毒中药 病毒性乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染所致。实验和临床研究表明，清热利湿、凉血 解毒、疏肝化瘀中药对乙肝病毒具有较强的抑制作用，其作用机理为调节机体免疫系统， 改善免疫功能，依靠机体自身的抗病毒能力而达到治疗目的。如人参、党参、灵芝等具有 免疫促进作用，能增强网状内皮系统和巨噬细胞的吞噬功能，促进淋巴细胞转化，诱导干 扰素的生成增加；香菇中的香菇多糖和猪苓中的猪苓多糖，可激活 NK 细胞，增强抗体依 赖性巨噬细胞的细胞毒作用，诱生干扰素，并对表面抗体的产生具有明显的促进作用；冬 虫夏草能增强单核-巨噬细胞的吞噬功能；肉桂、仙茅，菟丝子、锁阳等都有增加 B 细胞功 能，提高免疫球蛋白活性等作用；玄参、天冬、麦冬等则可延长免疫球蛋白的 T1/2；黄芪、 柴胡等可影响细胞因子，提高白细胞介素的活性［8］。临床治疗乙肝的常用复方有茵陈 蒿汤、一贯煎、逍遥散、龙胆泻肝汤、失笑散等，通过药物的合理配伍，既可以清除湿热 毒邪，抑制病毒复制，又可以改善肝功能和微循环，恢复肝细胞正常代谢，从而达到治愈 乙肝的目的。 2 临床疗效优势 2.1 祛邪不伤正抗病毒中药除了直接杀灭病毒、抑制病毒复制外，还能有效阻止病毒 感染，并能双向调节人体免疫系统，通过免疫细胞识别和吞噬病毒，这是抗病毒西药所无 法比拟的。 2.2 广谱抗毒抗病毒中药一般都具有较广泛的抗病毒作用，如大青叶、板蓝根、射干、 金银花、牛蒡子等中药能够抑制多种病毒。这种广谱抗毒作用，使抗病毒中药对于机理不 明的一些感染性疾病有其自身的优势，尤其是那些人类无法在短期内清楚其致病原因、现 代医学无真正有效措施的感染性疾病，中药只是通过“祛邪”“扶正”，抑杀病毒，提高机体免 疫力，即可全方位对付病毒等病原微生物，从而达到治疗目的。 2.3 其它抗病毒中药还具有疗效稳定、毒副作用较小以及不易产生耐药性、不促使病 毒变异等优点，而且药源丰富，价格低廉，在一定程度上解决了百姓吃不起药的难题。 总之，抗病毒中药以其独特的疗效优势，在治疗病毒性疾病中发挥着不可替代的作用， 特别是当人类面临病毒性疾病长期而严峻的挑战时，抗病毒中药将拥有巨大的市场和广阔 的开发前景。