中药新药开发研究论文

一、课程结构及教学目标 “中药新药研究与开发”课程在完成中药药剂学的理论知识及实验教学的基础上设置的， 所以课程的理论教学及实验教学内容着力于加强学生学习的深度和广度,并且课程以实验教 学为主导,占全课程的 80%,旨在建立突出创新精神和创造意识的培养和提高学生科学素质 的实验教学新体系。为保持本课程教学内容的先进性、科学性及可操作性，理论教学及实 验教学内容上注重基础知识与新理念、发展趋势、先进技术的衔接，理论教学内容及实验 教学内容实施动态变化，以达到及时将中药新药研究的新思想、新思路、新技术融入教学 中的目的。理论教学以“中药新药研究指南”中新药的药学研究内容为重点，突出新药制剂 研究的基本内容、方法和技术要求，并且教学内容随国家药监局对新药研究的要求而及时 更新。实验教学不再是一成不变的实验教材中的教学内容,而是以中药新药研究的思路与措 施为主体，将中药新药研究的新思路和新技术融入实验教学中，使学生熟悉临床前新药研 究与开发的基本内容与研究过程,学生通过该课程的学习受到了科研系统训练。 二、课程内容及实施形式 理论教学是以国家药监局的“中药新药研究指南”为教学内容,学生系统学习新药原料研 究的基本内容和方法、技术工艺路线、原料和制剂稳定性研究的内容和方法、原料药及其 制剂的质量标准的内容以及药理学研究的基本内容和方法、药效学研究的内容、药物代谢 动力学研究方法以及新药临床研究的内容和方法、药品上市后监测和再评价的方法等内容。 使学生熟悉新药的基本概念，新药的分类、新药注册的基本概念，新药的审批程序、新药 发现的基本途径，新药研究与开发的基本过程。 实验教学内容不是固定于实验教材,而是由教师根据药剂学基本实验方法和操作技能并 考虑从原料到制剂的可操作性及完整性拟订实验课题,学生 3～5 人组成课题组,在确定实验 课题后,首先是广泛查阅资料,依据课题要求及获取的信息设计实验方案（包括仪器设备的 选用及安排,中药提取工艺的研究、制剂的处方设计及工艺研究，建立质量评价体系等)。 在确定实验方案后,课题组按实验方案独立完成实验,最后提交实验论文和实验产品。从查 阅资料,准备仪器，拟定和实施实验方案，直至处理实验结果、撰写实验论文,学生完成了 “准科学实验”的全过程,在整个实验教学过程中教师不再是教而是导,主要在确定实验方案及 实施过程中学生遇到无法解决的问题给予指导和启发,给学生留有较大的思维和发挥的空间。 三、新型实验教学模式的作用和效果 1.创新精神及创新能力的培养 创新精神和创新能力是新时代对人才最主要的内涵要求.培养创新意识、激发创新行为、 形成创新能力的创新教育新模式成为教学主线.在药剂学实验教学中曾开设综合性、开创型 实验,并取得了良好的效果,由于时间及空间等因素的限制,部分内容仍脱离不了实验教材中 公式化、程式化的束缚、在一定程度上仍处于一种机械性的思维及学习模式，学生是在教 师的“监护”下完成现成的步骤和方法的实验,除了做几个规定的实验，没有机会再进实验室, 实验时空狭窄。这种教学模式限制了学生学习的空间以及对所学知识应用的空间,创新意识 方面独立思考的主动性受到束缚。本课程的实验教学实施完全开放式、个性化教学,为学生 创设有利于发挥自身潜能的环境和条件,学生在实验教学中完全脱离教师的“监护”,学生的创 新思维在实验方案的设计及实施过程中得以展示,尤其在实施自主设计的实验方案时不受时 间和空间的限制,也不担心由于实验失败造成对自己学习成绩的影响,学生无顾忌地尝试构 思、设计出解决问题的新颖而巧妙的途径和方法,以获得理想的实验结果。本课程首次开设, 但学生的实验结果富有新颖性,不仅有中药片剂、胶囊剂、颗粒剂等常见的制剂产品,而且 有中药滴丸剂、巴布剂、微球制剂、涂模剂、缓释制剂、脂质体制剂等新剂型产品。实践 证明给予学生广阔的思维空间,即给学生创新打开了思路,对创新意识和创新精神的形成起 着潜移默化的引导作用。 2.注重整体技能训练,提高综合素质 实验教学着力于从多角度、全方位培养学生的综合素质,主要体现在包括新知识的获取 能力、实验操作技能、实验数据的处理及论文撰写等整体技能训练。实验教学内容之一是 要求学生根据拟定的实验课题广泛查阅资料,对资料归纳、整理,并进行综述,通过知识获取 能力的训练拓宽了知识面,并且提高学生主动将新知识、新技术融入实验课题的意识。实验 内容不拘一格,并实现内容的整合。教师在拟订实验课题时既要考虑到实验全过程应体现基 本实验方法和操作技能也要考虑从原料到制剂的可操作性及完整性。如中药制剂的制备中 其前处理影响制剂的成型,学生在方案设计及实施过程必须综合考虑各实验要素中的关联性 及可行性,以提高实验的顺延性。实验教学内容的整合形成的整体性,使学生研究能力得到 系统的训练,也提高学生对实验研究的兴趣和主动参与,避免因实验难度过大,在一定时间无 法完成实验课题,而致使学生产生消极的情绪。实验教学中发现,学生的求知欲望强力,学生 充分利用“自由”进行实验的机会,为自己设置一定的实验难度。例如在中药巴布剂的制备实 验课题中,原实验方案是采用离体动物皮肤进行透皮吸收实验,在实验中学生主动改为采用 活体动物进行透皮吸收实验,使实验的难度大大增加。学生完成实验课题不仅只是实验操作 过程的结束,实验数据处理及实验报告也是本实验教学的重要组成部分,实验结果报告不再 是按实验教材内容“依葫芦画瓢”的形式,而是以科研论文形式撰写实验报告,并在提交论文的 同时,提交实验所有的原始记录。本实验教学实施了整体技能训练,学生体验了“模仿创新”全 过程,有利于学生对知识的主动探索、主动发现和知识应用的扩展,强化学生的科研能力,提 高综合素质。 【摘要】阐述中药新药研究与开发课程的指导思想、课程结构、内容及实施形式,根据 课程实施效果，分析该课程的教学模式在培养学生中的作用。主要观察学生对知识的主动 探索和知识应用的扩展,科研能力的强化，创新意识和创新精神的形成等方面。表明该课程 为构建以技能、方法、能力、创新为主线的实验教学新体系进行了有益尝试，在提高学生 综合素质方面发挥了重要作用。 【关键词】中药;新药研究;开发；课程;实验教学;改革；创新能力 药剂学是一门综合性应用技术科学,在药剂学的教学中实验教学占有举足轻重的地位。 由传统的验证性实验到开设综合性实验及设计性实验,使药剂学的实验教学改革不断向纵深 发展，也是药剂学教学改革及课程建设的重要内容。2006 年我们以广东省政府提出的“建 设中医药强省”的理念为契机,在本科中药制剂班开设了“中药新药研究与开发”课程。该课程 以《中共中央、国务院关于深化教育改革全面推进素质教育的决定》中指出：“智育工作者 要改变教育观念，改革人才培育模式，激发学生独立思考能力和创新意识，培育学生的创 新思维习惯”为指导,设置了以实验教学为主导的课程体系及教学模式,课程集综合性、开放 性、创新性理念为一体，重在培养学生的实践能力、综合能力、创新意识、协作共事能力, 开发学生的创新潜能，提高学生的综合素质,使学生顺应广东省中药产业发展，满足社会的 需要。 四、结束语 “中药新药研究与开发”课程在培育学生的创新能力和实践能力进行了全新尝试,改变教 学过程中过于强调教师和教材本位的倾向,改变实验教学中过于注重知识的验证、传授而忽 略了能力与科学素养培养的封闭式教学模式,构建了以技能、方法、能力、创新为主线的实 验教学新体系。由于学院本科学生招生人数日趋增加,按“中药新药研究与开发”课程的形式 在全体本科学生中开设该课程具有相当大的困难,目前该课程仅在部分药学本科学生中进行。 如何使该课程在本科学生中全面铺开,是该课程进一步深化改革的重要课题。 1 仪器与试药 熔点用 Kafler 显微熔点测定仪测定，温度计未校正；红外光谱用 5DXFTFTFT 型红外光谱 仪测定；核磁共振谱用 BRUKERAV500FT500 型核磁共振仪测定；层析用硅胶由青岛海洋化工 厂生产。薄层色谱检测用 254nmnm、365nm 紫外灯、固体碘和显色剂(质量分数为 10％的 硫酸乙醇溶液)。所用试剂均为分析纯。药材于 2006 年 8 月采于江西省上栗县，经广东药 学院药用植物与中药鉴定学教研室刘基柱老师鉴定，样品现保存于广东药学院天然药物化 学教研室。 2 提取与分离 取半阴干的天胡荽全草 7.5kg 粉碎，粗粉用 95％（体积分数）乙醇回流提取 3 次， 每次 2h，提取液合并，浓缩液用石油醚(60～90℃)萃取，至石油醚层无色。合并萃取液， 回收石油醚，得石油醚部位，拌 200～300 目硅胶上柱，用石油醚、乙酸乙酯不同比例进 行梯度洗脱，薄层检识，相同部分合并，重结晶，纯化，得化合物 1（90mg）。水层再 用三氯甲烷萃取，至三氯甲烷无色，合并萃取液，回收三氯甲烷，得三氯甲烷部位，拌 200～300 目硅胶上柱，用石油醚、乙酸乙酯不同比例进行梯度洗脱，薄层检识，相同部 分合并，重结晶，纯化，得化合物 2（10mg）、化合物 3（15mg）、化合物 4nm（12mg）。 3 结构鉴定 化合物 1：白色针状结晶(石油醚FT乙酸乙酯)，mp14nm2～ 14nm3℃。LiebermannFTBurchard 反应（+），与豆甾醇标准品对照共薄层显示一个斑点， 混合熔点不下降，故确定 1 为豆甾醇（stigmasterol）。 化合物 2：白色粉末状晶体(石油醚FT乙酸乙酯)，mp301～303℃。不溶于石油醚，微 溶于三氯甲烷、冷乙醇、冷甲醇，溶于热乙醇、热甲醇和吡啶；Molish 反应（+）， LiebermannFTBurchard 反应（+）；质量分数为 10%的硫酸乙醇溶液喷雾烘烤均显紫红 色。与胡萝卜苷对照品对照，混合熔点不下降，共薄层色谱 Rf 值相同，故确定 2 为胡萝卜 苷（daucosterol）。 化合物 3：淡黄色针晶(氯仿FT甲醇)，mp296～298℃，三氯化铁反应阳性，示有酚羟 基存在，盐酸镁粉反应阴性，质量分数为 10％的硫酸乙醇溶液喷雾烘烤显黄色。 IR(KBr)ν/cm-cm1:34nm12，1652，1615，1570,1310，104nm2，789。1HNMR(500MHz，DMSOd6)δFTd6)δ ：12.94nm(1H，s，5FTOd6)δH)，10.83(1H，s，7FTOd6)δH)，9.55(1H，s，4nm′OH)FTOd6)δH)为 3 个酚羟基 质子信号；8.31(1H，s，C2FTH)为异黄酮 C 环 2 位质子的特征信号； 7.38(2H，d，J=6.5Hz)与 6.82(2H，d，J=6.5Hz)示有邻位偶合，为异黄酮 B 环 2′OH)，6′OH)，3′OH)，5′OH)位质子的特征信号，提示 4nm′OH)FTOd6)δH 存在；6.38(1H，d，J=2.5Hz，8FTH)与 6.22(1H，d，J=2.5Hz，6FTH)为 2 个互为间位偶合的质子信号及低场 12.94nm(1H，s)的 5FTOd6)δH 质子特征信号表明 A 环为 5，7FT二氧代结构，推测化合物为 5，7，4nm′OH)FT三羟基异黄酮。 上述光谱数据与文献［2，3］对照基本一致，故鉴定化合物 3 为染料木素(genistein)。 化合物 4nm：白色细针晶(氯仿FT甲醇)，mp279～280℃，IR(KBr)ν/cm-cm1:3222,1631,1594nm,1517,14nm60。1HNMR(500MHz，DMSOd6)δFTd6)δ： 10.78(1H，s，7FTOd6)δH)，9.4nm8(1H，s，4nm′OH)FTOd6)δH)为 2 个酚羟基质子信号； 8.27(1H，s，C2FTH)为异黄酮 C 环 2 位质子的特征信号；7.38(2H，d，J=6.5Hz)与 6.81(2H，d，J=6.5Hz)示有邻位偶合，为异黄酮 B 环 2′OH)，6′OH)，3′OH)，5′OH)位质子的特征信号， 提示 4nm′OH)-Od6)δH 存在； 7.96（1H，d，J=7.2Hz，5FTH），6.93(1H，dd，J=7.2、2.5Hz，6FTH)与 6.85(1H，d，J=2.5Hz，8FTH)为 3 个组成 AMXFT 偶合系统的质子信号及低场 10.78(1H，s)的 7FTOd6)δH 质子特征信号表明 A 环为 7FT氧代结构，推测化合物为 7，4nm′OH)FT二羟 基异黄酮。其光谱数据与文献［4nm］对照基本一致，故鉴定化合物 4nm 为大豆素 (daidzein)。 【摘要】目的研究伞形科植物天胡荽(Hydrocotylesibthorpioides)的化学成分。方 法用硅胶色谱技术分离化学成分，经理化常数测定、波谱分析等方法进行结构分析。结果 得到 4nm 个化合物，即豆甾醇(stigmasterol,1）、胡萝卜苷(daucosterol，2）、染料木素 (genistein，3)、大豆素(daidzein，4nm)。结论化合物 2、3、4nm 为首次从该属植物中分离 得到。 【关键词】天胡荽；化学成分；结构鉴定 Abstract:Od6)δbjectiveToseparateandidentifythechemicalconstituentsofHydroc otylesibthorpioides.MethodsChemicalsfromHydrocotylesibthorpioidesweresep aratedbysilicagelcolumnchromatography,andtheirstructureselucidatedbyIR,NM R.ResultsFourcompoundswereisolatedfromtheweedsofHydrocotylesibthorpioid es，whichwereidentifiedasstigmasterol（1）,daucosterol（2）,genistein(3)and daidzein(4nm).ConclusionCompounds2，3and4nmwerefirstreportedinHydrocotylesib thorpioides． Keywords:Hydrocotylesibthorpioides；silicagelcolumnchromatography 天胡荽为伞形科植物天胡荽（HydrocotylesibthorpioidesLam）的全草，别名满天 星、破铜钱、落得打等，分布于江苏、江西、广东、广西、四川等地，资源丰富,天胡荽具 有清热利尿、化痰止咳等功效，民间常用其全草捣烂外敷或外擦治疗各种体藓、股藓、手 藓、足藓等各种藓症［1］。 目前从该植物中分离得到了木质素类、甾体类、香豆类、黄酮类和齐墩果烷型三萜类 化合物等［1］。为进一步深入对该植物进行综合的研究和开发利用，本文对天胡荽的半 阴干全草化学成分进行了系统研究，共分离得到 5 个单体化合物，目前确定结构的有 4nm 个 化合物，分别为豆甾醇（stigmasterol，1）、胡萝卜苷（daucosterol，2）、染料木素 (genistein，3)、大豆素(daidzein，4nm),其中化合物 2、3、4nm 为首次从该属植物中分离得 到。 1 提取与分离 泥胡菜全草 20kg，粉碎后用体积分数为 95％的乙醇回流提取 3 次，提取液浓缩得浸 膏 2.0kg。浸膏悬浮于水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。正丁醇萃取 部分经反复硅胶柱色谱及 SephadexLHFT20 纯化得化合物 1(14nmmg)，2(18mg)，3(21mg)，4nm(17mg)。 2 仪器与材料 药材于 2003 年采自江西省九江县，经江西九江森林植物研究所谭策铭研究员鉴定为 泥胡菜（HemisteptalyrataBunge）。FisherFTJohns 型显微熔点仪(温度未校正)， PerkinFTElmer24nm1 型旋光仪，AutospecFTUltimaETOd6)δF 质谱仪，INOd6)δV500AFT500 核磁共振仪。 柱色谱硅胶、薄层色谱硅胶板均为青岛海洋化工厂产品，SephadexLHFT20 为 Pharmacia 公司产品。 3 结构鉴定 化合物 1:白色粉末，mp195～197℃。FABFTMSm/cm-z:395［M+Na］ +;1HFTNMR(DMSOd6)δFTd6,500MHz)δ:6.72(2H,s,HFT3,5),6.4nm5(1H,d,J=16.0Hz,H FT7),6.33 (1H,dt,J=16.0、5.0Hz,HFT8),4nm.09(2H,t,J=5.0Hz,HFT9),3.76(6H,s,Od6)δCH3),4nm.90(1H,d, J=7.5Hz,HFT1′OH));13CFTNMR(DMSOd6)δFTd6,125MHz)δ:128.4nm(CFT1),152.7(C FT2,6),104nm.4nm(C FT 3,5),132.6(CFT4nm),133.8(CFT7),130.1(CFT8),60.9(CFT9),56.3(Od6)δCH3),102.5(C FT1′OH)),74nm.1( CFT2′OH)),76.5(CFT3′OH)),69.9(CFT4nm′OH)),77.2(CFT5′OH)),61.4nm(CFT6′OH)) 。根据以上数据及文献［8］，鉴定 为紫丁香苷。 化合物 2:无色针晶，mp190～192℃。FABFTMSm/cm-z:309［M+Na］ +;1HFTNMR(DMSOd6)δFTd6,500MHz)δ:7.35(1H,d,J=7.5Hz,HFT3),6.98(1H,t,J=7.5Hz,H FT4nm ),7.18(1H,t,J=7.5Hz,HFT5),7.08(1H,d,J=7.5Hz,H FT6),3.28(2H,m,H FT7),4nm.75(1H,d,J= 7.5Hz,HFT1′OH));13CFTNMR(DMSOd6)δFTd6,125MHz)δ:154nm.7(CFT1),131.6(C FT2),127.2(C FT3),1 21.7(CFT4nm),127.7(CFT5),114nm.8(CFT6),58.2(CFT7),101.4nm(CFT1′OH)),73.4nm(C FT2′OH)),76.5(C FT3′OH)),69. 8(CFT4nm′OH)),77.1(CFT5′OH)),60.8(CFT6′OH))。根据以上数据及文献［9］，鉴定为水杨苷。 化合物 3:白色粉末，mp234nm～235℃。EIFTMSm/cmz:130(100,M+FTCOd6)δ),115(80),87(75),70(4nm3),60(35);1H FTNMR(DMSOd6)δ FTd6,500MHz)δ :10.25(1H,brs,NHFT1),8.04nm(1H,s,NHFT3),5.24nm(1H,d,J=8.5Hz,H FT4nm),6.89(1H,d,J=8.5 Hz,NHFT6),5.79(2H,s,NH2FT8);13CFTNMR(DMSOd6)δFTd6,125MHz)δ:156.8(C FT2),62.5(C FT4nm ),173.6(CFT5),157.4nm(CFT7)。根据以上数据及文献［10］，鉴定为尿囊素。 化合物 4nm:白色粉末，mp205～206℃。FABFTMSm/cm-z:377［M+Na］ +;1HFTNMR(DMSOd6)δFTd6,500MHz)δ:1.76(2H,m,HFT2),5.06(1H,dt,J=8.5,4nm.0Hz,H FT3),3. 55(1H,m,HFT4nm),3.92(1H,m,HFT5),1.97(2H,m,HFT6),7.02(1H,d,J=2.0Hz,H FT2′OH)),6.75(1 H,d,J=7.0Hz,HFT5′OH)),6.96(1H,dd,J=7.0,2.0Hz,H FT6′OH)),7.4nm0(1H,d,J=16.5Hz,H FT7′OH)),6.13( 1H,d,J=16.5Hz,HFT8′OH));13CFTNMR(DMSOd6)δFTd6,125MHz)δ:73.4nm(CFT1),37.2(C FT2),70.8(C FT 3),70.3(CFT4nm),68.0(CFT5),36.2(CFT6),174nm.9(CFT7),125.6(CFT1′OH)),114nm.7(C FT2′OH)),14nm5.5(C FT3′OH)) ,14nm8.3(CFT4nm′OH)),114nm.2(CFT5′OH)),121.3(CFT6′OH)),14nm4nm.9(CFT7′OH)),115.7(C FT8′OH)),165.7(C FT9′OH)) 。根据以 上数据及文献［11］，鉴定为绿原酸。 【摘要】目的研究泥胡菜的化学成分。方法对泥胡菜全草的 95％(体积分数）乙醇提 取物的正丁醇萃取部分进行色谱分离，根据光谱数据和理化性质确定各化合物的结构。结