通光散化学成分分析论文

【摘要】综述了通光散中含有的 C21 甾体苷类、萜类等化学成分及其抗肿瘤药理作用 的研究进展，为进一步开发利用通光散提供参考。 【关键词】通光散；C21 甾体苷类；化学成分；药理作用 通光散 Marsdeniatenacissima 是萝藦科牛奶菜属植物，广泛分布于亚洲的热带和 亚热带地区，我国云南、贵州、福建、广东、广西、台湾等地也有分布。其藤茎又名乌骨 藤，其味苦，性微甘、凉，入肺、胃、膀胱经；具有消炎、清热解毒、止咳平喘、散结止 痛等功效。以通光散为主要原料制备而成的中药消癌平，临床用于治疗肝癌、胃癌等各种 晚期恶性肿瘤，疗效较好。现对通光散的化学成分及药理作用研究综述如下。 1 化学成分研究 1.1C21 甾体苷类 C21 甾体苷类化合物是通光散中研究最多的成分，也是其主要的生 理活性物质。从 20 世纪 80 年代开始，陆续从该植物的藤茎及种子中分离出 50 多种 C21 甾体苷类，含有多种 β去氧糖。糖链主要连接在苷元的 3 位。主要有 6 种不同结构的苷元： Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ和Ⅵ。见表和Ⅵ。见表 1。 1.2 其它成分［9］从该植物中分离得到两个环醇：牛奶菜醇和二氢牛奶菜醇［9］。 三个萜类化合物 13(31,32dimethyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh30methyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhδacetoxytetradecanyl)29methylperhacetoxytetradecanyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh)29methyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh perh ydrophenanthr1,3diene［17］、齐墩果18 烯3乙酯和a 香树脂醇乙酸酯。此外还 有琥珀酸、硬脂酸、棕榈酸、二糖 cymaroside 等［18］成分。 2 药理活性研究 2.1 抗肿瘤活性现代药理研究表明，通光散所含 C21 甾体苷类和多糖具有抗肿瘤活性， 通光散提取物对多种恶性肿瘤细胞有明显的抑制作用。 罗思齐等［3］测试了 6 种从通光散中分离得到的 C21 甾体苷元对 KB,KB-VI,P338 细胞株的毒性，只有化合物 10,11 和 52 对小鼠 KB-VI 细胞有弱的细胞毒活性，它们的 ED50 分别为 4.1，2.5 和 3.4μg/mlg/ml30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh。 应用 MTT 法观察通光散 70%乙醇提取物的正丁醇萃取部位上大孔树脂后的 95%乙醇 洗脱部分和乙醚萃取部位对人骨肉瘤细胞 Saos-2，人胃癌细胞 SGC-7901，人肝癌细胞 Bel30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh-7404 等的体外细胞毒作用，结果表明通光散对多种肿瘤细胞的生长抑制显示不同的 敏感性，并呈现一定的剂量依赖性，其中对人骨肉瘤细胞和人肝癌细胞的作用较强，而对 人胃癌细胞作用相对较弱。 用通光散提取物制备的消癌平口服液以 20，10，5g 生药/kg 剂量对小鼠灌胃给药， 发现消癌平口服液对小鼠体内移植的 S180、胃癌、P388 有明显抑制作用［19］。 李茂全等［20］研究了消癌平对 SGC-7901 胃癌细胞的作用及机制，体外抑制试验 结果显示其对 SGC-7901 胃癌细胞有较好的抑制作用，药物作用 7d 后的 IC50 为 21mg/ ml30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh。采用不同浓度消癌平抑制用胃癌细胞株移植后的昆明种小鼠体内肿瘤,用流式细胞仪 检测，发现消癌平能抑制 SGC-7901 胃癌细胞株的生长，对 G1 期细胞有明显的阻断作用， 使瘤体细胞主要停留在 G1 期。细胞形态学检查的结果表明消癌平能诱导癌细胞向正常细 胞转换。 孙珏等［21］采用 MTT 比色法和放射免疫法观察消癌平对体外培养的人肝癌 Bet7404 细胞、HepG2 细胞的作用，以及对人肝癌细胞甲胎蛋白(AFP)分泌的影响，结果显 示消癌平对上述肝癌细胞有显著的抑制作用，能显著降低 AFP 的分泌，提示消癌平在抑制 肝癌细胞增殖的同时，能使 AFP 分泌量降低，可能使肝癌细胞向正常方向分化。 2.2 平喘作用用组胺喷雾引喘法，豚鼠通光散苷 100mg/kg 腹腔注射，有一定的平喘 作用。家兔静脉注射 60mg/kg，能对抗组胺引起的气管痉挛松弛，还能减弱组胺引起的 豚鼠离体肠管收缩。苦味甾体酯苷 100～150mg/kg，腹腔注射能预防因组胺喷雾引起的 支气管痉挛，有一定的平喘作用；离体豚鼠支气管灌注，对痉挛状态的支气管有解痉作用； 对小鼠腹腔注射的 LD50 为 274mg/kg。 2.3 降压作用苦味甾体酯苷对离体兔耳血管灌注有直接扩张血管作用。麻醉犬静脉注 射通光散苷有短暂、轻度的降压作用，无快速耐受现象，其降压似与中枢无关，离体兔耳 血管灌流实验表明，它能直接扩张血管 2.4 其他作用本品能明显提高机体的免疫能力，其抗癌作用的实现可能不是通过细胞 毒，而是通过加强机体免疫力来达到抗癌效果。此外，尚有止痛、解毒、保肝利尿、恢复 肿瘤患者放疗、化疗后白细胞下降作用。通光散总苷对肺炎双球菌和流感杆菌有抑制作用。 表 1 通光散中的 C21 甾体苷类化合物（略） 3 结语 通光散对胃癌、肝癌、肺癌临床疗效显著，其化学成分和药理作用研究也较多，但是 化学成分和药理作用的结合研究报道还比较少，其抗肿瘤的活性成分还没有明确，应加强 此方面的研究。 【关键词】万年蒿;化学成分;药理作用 万年蒿 ArtemisiasacrorumLedeb.菊科蒿属植物,别名白莲蒿、铁杆蒿。几乎遍布全 国，性味苦,辛,平。具有清热、解毒、祛风、利湿之效，我国民间用于治疗急慢性肝炎、 小儿惊风、退热、杀虫、阑尾炎、急慢性胃肠炎［1］；可以作为“茵陈”代用品;又作为止 血药，饲料。药用部位一般为其地上部分,也可为全草。因此,对万年蒿的研究和应用具有 重要的意义和价值。近年来国内外对该植物的研究日趋深入,有关其化学成分和药理活性方 面的研究已进行了一定量的工作。为了进一步研究和开发利用该植物,笔者将万年蒿化学成 分和药理作用方面的研究综述如下。 1 化学成分 截至到目前，从万年蒿的地上部分中分得的化学成分如表 1 所示。除表中所列外，吕 惠子等［8］用水提醇沉法提取万年蒿多糖,用硫酸苯酚法测定含量,多糖含量测定结果为 22.45%。朴光春等［9］用电感耦合等离子体质谱仪测定了万年蒿水提液中宏量元素 Na，Mg，K 和微量元素 Cr，Mn，Fe，Cu，Zn 的含量,发现微量元素中 Fe，Mn 含量最 高；用高效液相法测定了维生素 A，D，E，B1，B2，B6，B12，β胡萝卜素,其中维生素 B6 含量最高。万年蒿挥发油的化学成分［10～13］与艾蒿、苦蒿类相仿，但倍半萜类化 合物，如 β石竹烯，β毕澄茄烯成分比苦蒿类植物多。万年蒿挥发油主要成分为樟脑 （Camphor）、樟烯(Camphor)、桉油精(Oneol30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhe)、石竹萜烯（Caryophyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhene）、桂 烯（Myrcene）、异松苷醇（1Oefen301）、葛缕酮(Carvone)、αδacetoxytetradecanyl)29methylperh水芹烯 (αδacetoxytetradecanyl)29methylperhphtl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhanedrene)、胡椒酮(Piperiton)、香烩烯（Sabinene）、侧柏酮(Thujone)、αδacetoxytetradecanyl)29methylperh 蒎烯(αδacetoxytetradecanyl)29methylperhpinene)、β-蒎烯(βpinene)、αδacetoxytetradecanyl)29methylperh松油醇(αδacetoxytetradecanyl)29methylperhterpineol30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh)、松油醇4、乙酸龙脑酯 (Bornyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhacetata)、莰烯(Camphene)、异蒎莰酮(Isopl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhnocamphone)、γ揽香烯 (γel30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhemene)、γ杜松油烯、反式-石竹烯(Transcaryophyl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhene)、绿叶萜烯酮 (Patchoul30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperhenone)及蒿酮；此外,还含有异缬草酸及黄酮类,花和叶含有伞形花酯［1］、东 莨菪内酯、胡萝卜素、有机酸、倍半萜内酯及维生素、粗蛋白、脂肪、纤维等。 表 1 万年蒿中已知的化学成分（略） 2 药理活性 张德志［6］发现万年蒿的水煎液具有明显的利胆等作用，抗菌实验表明，其对金黄 色葡萄球菌具有很强的抑制生长作用。邵红军等人［14］发现万年蒿叶的提取物对玉米大 斑病菌菌丝生长的抑制率在 72.39%以上，对苹果炭疽病菌菌丝生长有一定的抑制作用， 其抑制率在 64.01%，表明万年蒿具有一定的抗菌活性。万年蒿的其它药理活性研究较少， 而与它同属的植物茵陈蒿则研究较多，后者具有多种药理活性［18～20］，如利胆作用、 保肝作用、抗病原微生物作用、抗肿瘤作用、心血管系统作用、解热镇痛消炎作用，临床 上用于治疗急性传染性黄疸型肝炎、新生儿黄疸、胆道蛔虫症、高血脂症、婴儿湿疹、痤 疮等疾病。万年蒿经常作为“茵陈”的代用品，因此它们在药理活性上有很多相似之处。 3 结论 近年来对万年蒿的研究逐渐增多,但主要偏重于化学成分的分离与纯化,其药理活性研 究还有许多空白之处。万年蒿的资源丰富［17］，尤其是在东北、河北、山西、西北和内 蒙，分布广泛，在中、低海拔地区的山坡、路旁、灌丛地及森林草原地区很容易采到,所以 应采用现代科学手段对万年蒿化学成分及药理活性进行更深、更系统的研究,以使万年蒿更 好地应用于临床。 【关键词】围绝经期；模型研究；脏器指数；自由基；组织学 围绝经期综合征是指妇女在自然绝经前后或因手术切除卵巢、放射治疗等导致卵巢功 能衰竭或丧失而出现的以植物神经系统功能紊乱为主的一系列临床症状。实验及临床对此 病做了大量深入而细致的研究。现将近年来的实验研究综述如下。 1 模型研究 1.1 自然老化模型大鼠 3～6 月龄为青年期，8～12 月龄为中年期，24 月龄以后为老 年期，由中年向老年的过渡时期为老年前期。通常可选择 12～18 月龄的雌性大鼠作为女 性围绝经期综合征的动物模型，由于此阶段大量生殖内分泌功能衰退的表现与围绝期经期 妇女极为相似，因此，可采用自然老化的围绝经期大鼠模型［1］。 1.2 去卵巢动物模型去卵巢造模［2，3］是实验中使用较多的一种方法，即：将成年 雌性大鼠腹腔注射 2%戊巴比妥钠，麻醉后切除双侧卵巢，常规饲养 20d，待伤口充分愈 合后行阴道涂片检查，1 次/d，连续 5d，证明去势成功。 2 神经内分泌免疫系统 围绝经期综合征的发生，是由于卵巢功能的衰退，导致神经内分泌免疫系统功能改 变，引起一系列临床证候群。近年，神经内分泌与免疫系统之间的调节环路学说已成为引 人注目的课题。 2.1 内分泌肖炜［4］利用自制的补肾活血中药复方益妇宁软胶囊，观察去势大鼠血清 性激素水平，发现去卵巢后大鼠血清 E2 水平明显降低；FSH，LH 水平明显升高；T，P 水 平明显降低。各用药组对去卵巢后大鼠血清 E2 水平均有显著提高作用（P＜0.01 或 P＜ 0.05），益妇宁大剂量较小剂量作用显著，且大剂量组能增加去势大鼠 FSH，P 水平，但 都无意义。江仙远等［5］的实验发现更年鼠表现为 E2 水平减低，LH，FSH 水平升高， 运用更年康片后可使 E2 水平增高，LH，FSH 水平下降。王斌等［6］用自制的中药复方 对围绝期经期大鼠的实验也证实了上述结果。冯利等［7］通过中药对 60 只去势雌性大鼠 FSH，LH，PRL，E2，P，T 含量影响的实验研究认为，卵巢功能减退，雌激素水平下降 导致下丘脑垂体性腺轴生殖内分泌紊乱是引起围绝经期代谢变化和临床病症的主要原因。 张英等［8］观察电针治疗对去势大鼠血清 FSH，LH，E2 水平的影响，结果表明治疗前 去势大鼠血清 E2 水平明显低于正常组，而 FSH 和 LH 水平则明显高于正常组；电针治疗 后水平与模型组比较明显升高，FSH 和 LH 水平则明显下降。张雅萍等［9］研究结果表明， 围绝经期综合征患者血清 E2 水平低于正常对照组（P＜0.05），血清 FSH，LH 水平虽然 高于正常对照组，但无统计学意义，而血清 PRL，T 水平与正常对照组比较无显著差异。 经坤宁安治疗 2 个月，患者 E2 水平明显上升与治疗前比较差异显著；FSH，LH 水平是有 下降，但无统计学意义；PRL，T 水平在疗前、疗后均无显著性差异。赵建英等［10］认 为围绝经期妇女，由于卵巢功能的逐渐衰退，体内生殖激素水平的变化，使神经内分泌失 调，FSH 对卵巢功能早期下降更敏感。而陈训华［11］认为围绝经期血清 E2 水平变化无 规律可循。 2.2 神经递质植物神经功能紊乱是围绝经期综合征发病的主要表现，随着机体的老化， 神经递质相应地发生增龄性改变，进而可能诱发潮热、抑郁等多种植物神经功能紊乱的症 状。因此，对植物神经递质的测定成为探讨围经期综合征发病机理的热点之一。肖炜等 ［4］的实验观察了补肾复方对大鼠神经递质的影响：去卵巢对照组与假手术相比， 5HT，5HIAA 的含量均明显升高（P＜0.05），DA 含量降低（P＜0.05），NE 含量略 有降低，但无统计学意义。各用药组对去卵巢大鼠升高的 5HT，5HIAA 的含量均有显著 性降低作用（P＜0.01），益妇宁软胶囊大剂量组作用优于小剂量组。王斌等［6］的实验 说明中药具有部分地纠正围绝经期大鼠中枢单胺类神经递质紊乱的作用，改善衰退的下丘 脑功能，从而延缓大鼠神经内分泌免疫网络的老化。 2.3 免疫系统正常的免疫调节依赖于复杂的细胞间的相互作用，IL2 在其中起重要的 调节作用，是免疫应答过程中细胞活化不可缺少的一个信号。围绝经期大鼠血浆 IL2 水平 明显低于青年组，而中药可提高 IL2 水平，增强血清 IL2 的活性，从而调节机体的细胞与 体液免疫功能［6］。张雅萍等［9］的实验表明，围绝经期综合征患者外围血 T 淋巴细胞 亚群 CD3+，CD4+，CD8+，CD4+/CD8+等细胞比例与正常围绝经期妇女比较，均无 显著性差异。然而，两组围绝经期妇女 CD3+，CD4+，CD4+/CD8+比例明显升高，IL2 活性水平亦显著升高，与治疗前比较有极显著性差异，而 CD8+则明显降低，与治疗前 比较有显著性差异，而且治疗后的这些细胞比例接近正常参考值。因此认为围绝经期综合 征患者和正常围绝经期妇女的免疫功能均衰减。雌激素受体（ER）是激素调节的转录因子 的重要代表，在女性生殖组织的生长分化中起着非常重要的作用。张英等［8］的实验结 果显示，去势后大鼠出现激素水平紊乱情况，外周血淋巴细胞上 ER 的含量也比正常大鼠 明显降低；电针治疗后大鼠激素水平紊乱情况明显好转，大鼠 ER 含量明显增高，这说明 电针能调节免疫细胞的雌激素受体表达，增强机体免疫功能，从而实现从整体上协调神经 内分泌-免疫网络。 3 脏器指数 肖炜等［4］的实验发现补肾复方可以提高去势后的大鼠降低的子宫、肾上腺指数， 对胸腺指数的影响无显著差异。王斌等［6］认为胸腺是免疫系统的中枢性器官，其萎缩 必然会直接影响细胞免疫功能，对体液免疫也有间接影响。从实验结果可以看出，围绝经 期大鼠的胸腺萎缩明显，以皮质最为严重，中药可改善胸腺的衰老及萎缩程度，并在一定 程度上提高卵巢重量指数，缓解萎缩。赖远征等［12］的实验说明，围绝经期 SD 大鼠子 宫重量指数与补肾活血方的剂量呈依赖性增加，高剂量组与生理盐水组比较有显著性差异。 梁文珍等［2］的实验提示去势大鼠各组子宫壁明显变薄，益肾填精、双补阴阳的中药可 使去势大鼠子宫壁明显增厚，子宫重量系数明显增加。张涛等［3］用药食两用中药复方 水煎浓缩液灌服去卵巢大鼠，观察对去卵巢大鼠肾上腺、子宫、脾脏、胸腺等器官重量的 影响，发现中药复方能增加去卵巢大鼠肾上腺、脾脏、胸腺的重量，与空白对照组比较， 差异显著；而其增加子宫重量的作用较弱，无统计学意义。张莉［13］观察复方紫归胶囊 对去势大鼠体重和脏器系数的影响，结果手术前各组动物体重无明显差别，实验结束时去 势组大鼠体重较对照组明显增加（P＜0.05），治疗组大鼠体重未见明显增加；实验结束 时，大鼠肝、肾、胰的脏器系数间比较差异无显著性，但去势组大鼠子宫较对照组显著降 低，高剂量组、已烯雌酚组的大鼠子宫系数均较去势组明显提高（P＜0.05）。 4 自由基 围绝经期综合征与自由基的关系越来越引起人们的重视。在实验研究中发现，更年鼠 ［5］LPO 水平较青年组显著上升，SOD，GSHPx 活性显著降低，说明围绝经期因内分 泌改变有关器官出现逐渐衰老，脂质过氧化作用增加，自由基清除酶类活性下降。中药可 使 LPO 降低，SOD，GSHPx 活性显著升高（P＜0.05），故对自由基损伤有一定的保护 作用。方玉荣等［14］认为围绝经期妇女体内抗氧化的能力降低。袁新初［15］应用当归 注射液对围绝经期大鼠进行静脉注射，结果表明该药能有效地清除超氧自由基，减少脂质 过氧化反应，减少内源程序性 SOD 的消耗，增加 SOD 的活性从而减低 MDA 的水平。赵 岫峰［16］等采用免疫细胞化学方法研究了去卵巢雌性大鼠下丘脑视前内侧区（MPA）和 视前外侧区（LPA）内 NOS 阳性神经元形态学和突触素的表达，结果不论是对照组还是去 卵巢组大鼠，均可见大量 NOS 阳性神经元分布于 LPA 和 MPA，NOS 神经元胞体呈梭形或 椭圆形。不同的是对照组的 NOS 阳性神经元突起明显，分枝多或相互交织成网状；去卵 巢组的 NOS 阳性神经元突起很短，几乎见不到分支；去卵巢组的动物 MPA 和 LPA 的 NOS 阳性神经元突起长度比对照组明显变短，差异有显著性（P＜0.01）。肖炜［17］等 研究了去势大鼠血清性激素，NO，NOS，SOD，MDA 水平变化，结果大鼠去势后随着血 清 E2 浓度下降，NO，NOS，SOD 水平也下降，MDA 水平升高，E2 与其它指标有相关 性；用具有补肾益精、活血化淤的中药治疗后血清性激素得到调节，明显改善上述指标。 方玉荣等［18］研究了围绝经期妇女血清自由基，测定结果显示 SOD 含量减少，MDA 含 量增加，同时作者认为强烈地脂质过氧化反应还会造成广泛的心血管损害。 5 血脂 方玉荣等［14］的研究发现，围绝经期血脂谱发生明显变化，其中血清总胆固醇 （TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、载脂蛋白（ApoB）含量升 高，而载脂蛋白（ApoAl30methylene21αδacetoxytetradecanyl)29methylperh）水平降低，均具有统计学意义。 6 骨代谢