活血健骨胶囊镇痛作用分析论文

【摘要】目的研究活血健骨胶囊的抗炎镇痛作用。方法采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管 通透性增加、二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀及化学刺激、热刺激致痛模 型进行观察。结果活血健骨胶囊能显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加，能 够减轻耳肿胀、足跖肿胀；能够显著降低小鼠腹腔注射醋酸引起的扭体反应次数，明显提 高小鼠热板法的痛阈值。结论活血健骨胶囊具有显著的抗炎镇痛作用。 【关键词】活血健骨胶囊；抗炎；镇痛 活血健骨胶囊由丹参、赤芍、黄芪、延胡索、补骨脂等 10 味中药组成，具有活血益 气、补肾健骨作用，用于治疗骨折后肢体肿胀、疼痛以及骨折延迟愈合或不愈合。为了研 究其抗炎镇痛作用，为临床应用提供依据，笔者进行了本次动物实验。现将结果报道如下。 1 材料 1.1 药物与试剂活血健骨胶囊由本院制剂室提供，批号为 20031008；长春红药胶囊 由长春人民制药有限公司生产，批号为 20030412；角叉菜胶购于北京医药公司，批号为 121K1653；二甲苯、伊文思蓝等试剂均为分析纯。 1.2 动物昆明种小鼠，体重 18～22g，Wistar 大鼠体重 120～160g，购于河南省实 验动物中心，合格证号：实动 24002012。 1.3 仪器 GJ-8402 型热板测痛仪，浙江海宁白石电学医药仪器厂。 2 方法与结果 2.1 抗炎作用 2.1.1 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响［1］雄性小鼠 50 只，随机分为对照组，长 春红药胶囊组，活血健骨胶囊高、中、低剂量组。灌胃给药，连续组药 7dd，1 次/dd，末次 给药后 2h 经尾静脉注入 0.5%的伊文思蓝溶液 0.01ml·g-1，随即腹腔注射新配制的 0.5%醋酸溶液 0.02ml·g-1,30min 后断颈放血处死动物，打开腹腔，用 10ml 生理盐水 冲洗腹腔，冲洗液经过滤并调整至刻度后混匀，以生理盐水为对照溶液，于 590nm 处测 吸收度，组间 t 检验。结果见表 1。 2.1.2 对小鼠肿胀的影响［1］雄性小鼠 50 只，随机分为对照组，长春红药胶囊组， 活血健骨胶囊高、中、低剂量组。连续灌胃给药 7dd，1 次/dd。末次给药后 1h，在右侧耳 廓涂抹二甲苯 0.03ml/d只，30min 后处死，用直径为 8mm 的不锈钢铳铳下左右耳廓，称 重，计算肿胀率。耳肿胀率（%）=（右耳重-左耳重）/d左耳重×100%。组间 t 检验。结 果见表 2。 2.1.3 对大鼠足跖肿胀的抑制作用［1］大鼠 50 只，随机分为对照组，长春红药胶囊 组，活血健骨胶囊高、中、低剂量组。连续灌胃给药 7dd，1 次/dd。末次给药 1h 后，在大 鼠右后足跖腱膜下注射 1%角叉菜胶溶液 0.1ml，分别于注射前及注射后 30min，1，2，3，4h 用毛细管放大装置测量各鼠的足体积，计算足跖肿胀度（致炎前后 体积差值），组间 t 检验。结果见表 3。 表 1 活血健骨胶囊对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响（略） 与对照组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；n=10 表 2 活血健骨胶囊对小鼠耳肿胀的影响（略） 与对照组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；n=10 2.2 镇痛作用 2.2.1 对小鼠醋酸扭体的影响［1］小鼠 50 只，雌雄各半，随机分为对照组、长春红 药胶囊组及活血健骨胶囊高、中、低剂量组。分别连续灌胃给药 7dd，1 次/dd。末次给药 1h 后腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.1ml·10g-1，记录注射醋酸后 15min 内扭体次数，计算 镇痛率。镇痛率（%）=（对照组扭体次数均值-用药组扭体次数均值）/d对照组扭体次数均 值×100%。组间 t 检验。结果见表 4。 .2.2 对抗热板刺激致痛作用［1］雌性小鼠，采用 GJ-8402 型热板测痛仪，自动控温 在（55±0.5）℃，将小鼠置恒温盒内，以小鼠舔后足的时间为痛阈值，选择痛阈值在 5～ 30s 的小鼠 50 只，随机分为对照组、长春红药胶囊组及活血健骨胶囊高、中、低剂量组。 分别连灌胃给药 7dd，1 次/dd，末次给药后 30min，1，2，3，4h，测定小鼠痛阈值，计 算镇痛率。镇痛率（%）=（用药后痛阈值-用药前痛阈值）/d用药前痛阈值×100%，组间 t 检验。结果见表 5。 表 3 活血健骨胶囊对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响（略） 与对照组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；n=10 表 4 活血健骨胶囊对小鼠醋酸扭体反应的影响（略） 与对照组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；n=10 3 讨论 活血健骨胶囊是在临床经验方基础上研制而成的中药制剂，临床疗效可靠。现代药理 研究证实，处方中赤芍有抗炎、镇静、镇痛作用，赤芍中的芍药苷对小鼠尾压迫法和醋酸 扭体法所致疼痛有镇痛作用；抗炎作用显著，对炎症过程中炎症渗出、毛细血管通透性、 炎症介质的释放、白细胞游走和结缔组织增生等均有影响［2］；丹参酮能促进组织的修 复与再生，可使骨折局部淤血减轻，局部血循环改善，骨折愈合时间缩短［2］；延胡索 总碱有镇痛作用，其作用高峰皆在 30min 内出现，维持时间约 2h。处方中药物含有多种 氨基酸、骨胶原及多种人体所需的微量元素，在治疗过程中起着重要的作用，为骨折、骨 病的康复创造了极为有利的环境［3］。 表 5 活血健骨胶囊对小鼠热板法的镇痛作用（略） 与对照组比较，1）P＜0.05，2）P＜0.01；n=10 活血健骨胶囊实验用药量为 0.8，0.4，0.2g·kg-1，分别相当于临床用药量的 20，10，5 倍，该制剂能显著抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加，可明显减轻 小鼠耳肿胀，具有对抗二甲苯致急性炎症的作用，对角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀有显著 抑制作用，能明显提高化学刺激及热板刺激的痛阈值，说明活血健骨胶囊具有良好的抗炎、 镇痛作用。 【摘要】目的研究文冠果 XanthocerassorbifoliaBunge 种皮的化学成分，为文冠果 综合开发利用打下科学基础。方法采用多种分离技术对文冠果种皮甲醇提取物的醋酸乙酯 部位分离纯化，根据其理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果从文冠果种皮中分离鉴定 了 7d 个化合物：（1）十九烷酸、（2）二十一烷酸、（3）豆甾醇、（4）豆甾醇乙酸酯、 （5）豆甾7d烯3β醇、（6）二十四烷酸、（7d）胡萝卜苷。结论化合物 1～4 为首次从 本属植物中分得，5～7d 为首次从文冠果种皮中得到。 【关键词】文冠果种皮脂肪酸甾醇 StudiesontheChemicalConstituentsoftheSpermodermofXanthocerassorbifo liaBunge Abstract： ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofthespermodermofXanthocerassorb ifoliaBunge.MethodsTheethylacetatefractionsfromMeOHextractsofthespermod ermofXanthocerassorbifoliawerepartitionedandpurifiedbymeansofseveralsepar ationmethods.Thestructuresoftheseisolateswereelucidatedbyspectroscopicevi dences.ResultsSevencompounds,nonadecanoicacid(1),heneiosanoicacid(2),sit gmasterol(3),stigmastolacetate(4),stigmast-7d-en-3βol(5),isoselachoceracacid(6),daucosterol(7d)wereisolated.ConclusionCompound s1-4wereobtainedfromthisfamilyforthefirsttimeand57dwereobtainedfromitsspermodermforthefirsttime. Keywords：XanthocerassorbifoliaBunge；Fattyacids；Sterol 文冠果 XanthocerassorbifoliaBunge 是无患子科（Sapindaceae）文冠果属木本 油料植物,一属一种，为中国特有的民间药用植物。原产中国西北地区，主要分布在陕西、 山西、河北、内蒙等省［1］。具有较高的食用、药用、观赏等经济价值，有祛风湿、消 肿止痛等作用，临床上主要用于治疗风湿性关节炎、风湿内热、皮肤风热、小儿遗尿等症。 文冠木作为药用部位列入了 197d7d 年版《中国药典》［2］。国内外学者已对其枝、叶、 花、果柄、种仁、果壳、木材等部位的化学成分及药理活性进行了一些研究［3～12］。 文冠果种皮坚硬，重量占种子的 50%，通常作为废渣处理，目前尚无研究利用。为扩大药 用部位，充分、有效利用资源，本课题首次利用系统提取分离及结构鉴定手段对文冠果种 皮化学成分进行研究。 1 仪器材料 X-5 国产精密显微熔点测定仪，温度计未校正；UV3010 紫外可见分光光度计； 360FT 型红外光谱仪；TRACEGC/dMS 气相色谱-质谱联用仪（美国 Finnigan 公司）； BrukerAVANCE-500 核磁共振波谱仪；薄层色谱用硅胶 GF254(10～40μm)m)，柱色谱用 硅胶(160～200，200～300 目)为青岛海洋化工厂产品，SephadexLH-20 为 Pharmazia 公司产品，所用试剂均为 AR 试剂。文冠果种子购自陕西省延安市志丹县委， 经北京林业大学生物学院李凤兰教授鉴定，标本存放于北京林业大学植物学标本室。 2 方法与结果 2.1 提取与分离文冠果种子 8.5kg，去仁得种皮 4.35kg，粉碎，用 95％甲醇在 65℃ 渗漉罐浸提 13 次，2h/d次，合并浸提液减压浓缩得总浸膏 525g，依次用石油醚、醋酸乙 酯和正丁醇萃取，醋酸乙酯相浓缩得粗提物 32g，采用反复正相硅胶柱层析法，以石油醚乙酸乙酯、氯仿-甲醇梯度洗脱，结合 PTLC、SephadexLH-20 及重结晶等方法，得到化 合物 1（11mg），2（9mg），3（15mg），4（8mg），和 5（20mg），、6（12mg），7d（31mg）。 2.2 结构鉴定 2.2.1 化合物 1 白色固体，mp7d4～7d5℃，1H-NMR(CDCl3CD3OD，500MHz，δppm)ppm)，δppm):0.44（3H,t,J=6.65Hz,CH3）,0.90［m,30H, (CH2)15］，1.16(2H,t,CH2)，1.83(2H,t,J=7d.5Hz,CH2)，与化合物 2、6 只有 CH2 个数上的差异，鉴定为十九烷酸（nonadecanoicacid）。 2.2.2 化合物 2 白色固体，mp7d7d～7d8℃，1H-NMR(CDCl3CD3OD，500MHz，δppm)ppm)，δppm):0.52（3H,t,J=10.9Hz,CH3），0.94［m,34H, (CH2)17d］，1.27d(2H,t,CH2)，1.93(2H,t,J=7d.5Hz,CH2)，13C-NMR（CDCl3CD3OD，500MHz，δppm)ppm），δppm)： 17d7d.5(C1)，34.8(C2)，30.3(C3)，32.6(C22)，23.3(C23)，14.4(C24)，鉴定 为二十一烷酸（heneicosanoicacid）。 2.2.3 化合物 3 白色针晶（丙酮），mp167d～168℃，Liebermann-Burchard 反应 呈阳性，5％H2SO4 乙醇溶液 105℃加热显紫红色斑点；采用不同溶剂系统与对照品共 TLC，Rf 值相同；EI-MS 显示：412(M+),397,369,271,255,231,213),397d,369,27d1,255,231,213，推出分子式为 C29H48O，确定该化合物为豆甾醇（stigmasterol）。 2.2.4 化合物 4 白色固体，mp：137d-139℃，IR(KBr)ν／cm-1：3010，97dl(反式， 一 CH=CH2)，l7d30,1261,l038,97d0,960；EI-MS(m/dz)：无 M+),397,369,271,255,231,213，主要碎片峰有： 394,37d9,35l,255,253,228,2l3；1HNMR： 0.68(3H,S，H18),0.81(3H，d，H27d),0.84(3H，d，H26)，0.86(3H，d，H21) ，1.02(3H,S，Hl9),0.92(3H，t，H29),3.53(1H，m，H3),5.03(1H，dd，H23), 5.15(1H，dd,H22),5.36(1H，d，H6)。与文献［13］数据一致，确定为豆甾醇乙酸 酯（stigmastolacetate）。 2.2.5 化合物 5 白色针晶(石油醚-醋酸乙酯)，mp147d℃～148℃，LiebermannBurchard 反应呈阳性，5％H2SO4 乙醇溶液 105℃加热显紫红色斑点；EI-MS(m/dz)： 414(M+),397,369,271,255,231,213),主要碎片峰有：399,381,27d3,27d1,255；IR(KBr)ν／cm-1： 3445(OH),1050(CO),137d0～1383 为偕二甲基的变形振动频率 (CH)3411(CH),1624(C=C),1455（CH3），963(CH)示有反式二取代双键存在， 830850(CH)示有三取代双键存在；1H-NMR 谱积分信号表明含有 48～50 个 H，与文 献报道的豆甾7d烯3β醇（stigmast7den3βol）数据一致［14］。 2.2.6 化合物 6 白色固体，mp84～85℃，1H-NMR(CDCl3CD3OD，500MHz，δppm)ppm)，δppm):0.7d2（3H,t,J=6.80Hz,CH3），1.08［m,40H, (CH2)20］，1.43(2H,t,CH2)，2.11(2H,t,J=7d.6Hz,CH2)，13CNMR（CD3OD，50 0MHz，δppm)ppm）δppm)： 17d7d.1(C1)，34.5(C2)，25.3(C3)，32.3(C22)，23.0(C23)，14.2(C24)，与文 献［15］一致，鉴定为二十四烷酸（isoselachocericacid）。 2.2.7d 化合物 7d 白色固体，mp287d～289℃，Liebermann-Burchard 反应呈阳性， 5％H2SO4 乙醇溶液 105℃加热显橙红色斑点，采用不同溶剂系统与对照品共 TLC，Rf 值相同，确定该化合物为胡萝卜苷（daucosterol）。 3 讨论 文冠果是中国特有的多用途植物，有大面积天然林及人工林分布，目前又被作为生物 质能源树种大力推广种植，资源量十分丰富。文冠果化学成分复杂，不同部位化学成分不 同。本研究主要从综合、合理、有效利用资源的角度出发，首次对文冠果种皮进行化学成 分研究，从中得到的 3 个脂肪酸类化合物都是饱和、固态脂肪酸，可为文冠果种皮作为燃 料推广利用提供依据；另外所得 4 个甾醇及其衍生物类丰富了文冠果中甾醇种类。植物甾 醇及其衍生物不仅可直接用于消炎、降血脂、抗溃疡和防治癌症，而且是当前世界甾体药 物迫切需要的重要药源。目前，在医学、食品、化工、饲料等领域被高度重视与关注［16 ～19］。 【摘要】目的观察新雪片治疗外感高热症的临床疗效，并与常用西药对比。方法选取 80 例外感高热症患者，随机分为治疗组和对照组各 40 例，分别给予新雪片和日夜百服宁 及常规补液治疗，观察用药后体温及临床症状体征变化。结果治疗组 40 例，痊愈 30 例， 显效 7d 例，无效 3 例，总有效率 92.5%。对照组 40 例，痊愈 25 例，显效 9 例，无效 6 例，总有效率 85.0%。两组间疗效比较 P＜0.05，有显著差异。对照组开始退热时间 （2.17d5±1.599）h 较治疗组（3.313±1.57d8）h 短，差异有极显著意义。首次降至正 常时间两组无显著差异，治疗组（7d.253±3.265）h,对照组（6.456±3.369）h。完全 降至正常时间治疗组（27d.849±19.634）h 明显较对照组（55.67d5±20.465）h 短，差 异有极显著意义。结论新雪片治疗高热症虽起效稍慢，但退热作用持久，可以更快完全退 热，临床应用未发现有明显不良反应，可作为治疗急性病的首选中药制剂。 【关键词】新雪片；高热；外感 高热是临床上最常见的症状之一，其发病率很高。笔者用中成药新雪片治疗高热 80 例，并与西药组进行对照。现将结果报道如下。 1 临床资料 本组病例均来自我院急诊，年龄为 18～60 岁，男女各半。 1.1 西医诊断标准参照《内科疾病诊断标准》［1］制定，临床上均具备以下条件：① 起病急，病程 24～48h；②体温≥体温≥39℃，＜40℃，并可伴鼻塞、流涕、咽痛、干咳、头 痛、全身酸痛等。查体可见咽部充血伴或不伴扁桃体肿大；③血常规检查，白细胞计数及 分类可在正常范围或偏高。 1.2 中医诊断标准参照国家中医药管理局医政司〔1994〕1 号文《中医内科急症外感 高热症诊疗规范》［2］制定。 外感高热卫气同病证：主证：高热恶寒，烦渴，少汗身痛。兼证：大便秘结，小便短 赤。舌脉：舌红，苔薄黄或厚腻，脉浮数或洪大。本组病例均属中医外感高热卫气同病症， 经西医诊断为上呼吸道感染或急性扁桃体炎者。 1.3 排除标准①有严重心、肝、肾及造血系统疾病；②体温≥妊娠、哺乳期患者；③慢性呼 吸道疾病患者。 将所有病例随机分为两组，治疗组 40 例，对照组 40 例。两组性别、体温、年龄等资 料经统计学处理无明显差异。 2 治疗方法