荆芥挥发油化学成分分析论文

【摘要】目的采用水蒸气蒸馏法从荆芥中提取挥发油。方法用 GCMSMSMS 对其化学成分 进行鉴定。结果共鉴定了 58 个成分，占挥发油的 86.23%以上。结论通过对荆芥挥发油 的分析，为其进一步开发作为药食两用植物提供科学依据。 【关键词】荆芥；挥发油；气相色谱质谱MS质谱质谱 Abstract： ObjectiveTheessentialoilsfromNepetacatariaL.wereextractedbysteamdistillatio n.MethodsThechemicalconstituentswereanalyzedbyGCMSMSMS.Thenthepercentage contentofcompositionofessentialoilwasdeterminedbyGCMSnormalizationmethod. ResultsTheconstituentswereidentifiedbyGCMSMSMS.58componentswereseparated,i dentifiedandaccountedforover86.23%.CMSonclusionByanalyzingtheessentialoilof NepetacatariaL.,thescientificfoundationswereprovidedforfurtherdevelopmentof theplantnotonlyasakindoffoodbutalsoakindofmedicine. Keywords：NepetacatariaL.；Essentialoil；GCMSMSMS 荆芥 NepetacatariaL.为唇形科荆芥属多年生草本植物，产于河南、山西、陕西、甘 肃、新疆、山东、湖北、四川、贵州、云南等省区，阿富汗、印度、日本、美洲南部也有 分布［1］。荆芥在河南主要以鲜嫩的茎叶供作蔬菜食用，也可作佐料，具有特殊的香味， 富含营养价值和药用价值，是重要的药食两用蔬菜。荆芥在整个生长期间几乎不会受病虫 危害，是一种经济效益高、很有发展前途的无公害、保健型辛香蔬菜，多为人工栽培，在 伏牛山区和太行山区也有野生。在我国东北地区多以多裂叶荆芥 SchizonepetatenuifoiaBrig 的地上干燥部分作为荆芥入药，广西各地以同科的荠苎属 （Mosla）及香薷属（及香薷属（Elsholtzia）及香薷属（多种植物的干燥地上部分“土荆芥”为名代替荆芥 ［2］。 在对同科裂叶荆芥属植物荆芥（SchizonepetatemuifoliaBrig.）及香薷属（挥发油成分及药理 作用研究发现，化学成分主要是薄荷酮（30.8%）及香薷属（和 2MS甲基MS6MS异丙基MS2MS环己烯MS1MS酮 （38.98%）及香薷属（，另外还有香芹酮、月桂烯和柠檬烯等含量较少成分。药理作用具有镇痛、 抗炎、扩张支气管和抗过敏等功效［3～6］。笔者用 GCMSMSMS 首次分析了河南省开封市产 荆芥挥发油的化学成分，将所得质谱质谱图与标准图谱质谱对照鉴定化合物，并用 GCMS 测定了各化 合物在其挥发油中的相对百分含量。 1 材料与方法 1.1 仪器与材料 GCMS/MSMSQP500MS500 联用仪（日本岛津）及香薷属（。荆芥样品 2005MS12 采集于河 南省开封市，经鉴定为唇形科荆芥属植物荆芥（NepetacatariaL.）及香薷属（。 1.2 挥发油提取将切碎后的荆芥地上部分鲜重 380g 用挥发油提取器提取 2h，取油待 检测。 1.3 挥发油成分分析荆芥挥发油的分析在 GCMS/MSMSQP500MS500 气相色谱质谱/质谱质谱联用仪上进 行。 气相色谱质谱条件：色谱质谱柱为 OV17MS17（30m×0.25mm）及香薷属（；升温程度为 60℃（保留 2min）及香薷属（，以速率 6℃/min 至 260℃（保留 8min）及香薷属（。进样口温度 280℃，界面温度 250℃。进样量为 1.0μll，分流比为 35∶1；载气为高纯 He（φ=99.999%）及香薷属（，载气流量 为 1.0ml/min。质谱质谱条件是：离子源 EI 源；离子温度 250℃；电子能量 70eV17；倍增器 电压 1.35kV17；接口温度 280℃；扫描质量范围 33～440amu。 2 结果与分析 2.1 用水蒸气蒸馏法提取新鲜荆芥挥发油，挥发油占鲜重 0.05%。应用 GCMSMSMS 法对 荆芥挥发油成分进行分析，经 NIST 数据库与标准质谱质谱图库对照，并经过有关文献人工图 谱质谱鉴定，从中鉴定出 58 种成分（表 1）及香薷属（，已鉴定成分的总含量约占全油的 86.23%。 表 1 荆芥挥发油成分及相对百分含量（略）及香薷属（ 从分析结果可以看出，河南产荆芥挥发油成分主要是萜类、萜醇类、醛类、酯类及烷 烃类化合物等，其中含量较高的成分为反-柠檬醛（17.80%）及香薷属（、顺-柠檬醛（15.39%）及香薷属（和 对烯丙基茴香醚（14.76%）及香薷属（，这与文献报道同科不同属植物药用荆芥主要成分为右旋薄 荷酮和消旋薄荷酮有很大的差别，与相同功效的薄荷主要的成分为薄荷酮区别也较大。 2.2 萜类是存在于植物界具有多方面生物活性的一类化合物，是某些中药的有效成分， 如在荆芥挥发油中的主要萜类顺-柠檬醛和反-柠檬醛具有杀虫、抗曲霉菌和真菌活性，对 烯丙基茴香醚有抗真菌活性。柠檬醛是一种广谱质谱性的杀虫剂，它可杀灭蚊子、苍蝇、蟑螂 和臭虫等传染疾病的害虫，以及危害粮食、蔬菜的常见害虫，包括幼虫、蛹等在内，而对 人、动物和植物均无毒性，且杀虫效果好。因此荆芥挥发油可望开发为环保型杀虫剂，对 人、动物和植物均无毒副作用，从而有助于生产真正无污染的绿色果品。 2.3 含柠檬醛的挥发油别具调味风味，制成粉剂后使用方便，易溶于水。在汤粉、粉 末饮料中添加这种油性调味粉，则柠檬清香四溢。在脱水奶、香料、香料和着色剂中添加 这种油性调味粉能显著增加香味，提高质量。通过对荆芥挥发油化学成分的分析及含量的 测定，对开发和综合利用荆芥食用药用资源提供了科学依据。 【摘要】目的研究古钩藤水煎液的镇痛抗炎药理作用。方法采用小鼠热板法和扭体法 镇痛实验，观察古钩藤水煎液的镇痛作用，观察对小鼠毛细血管通透性和二甲苯对小鼠耳 廓肿胀的影响，观察其抗炎作用。结果古钩藤水煎液能显著提高小鼠痛阈值，降低毛细血 管通透性，抑制由二甲苯所致的炎症反应，可显著减轻小鼠耳廓肿胀。结论古钩藤水煎剂 有明显的镇痛和抗炎作用。 【关键词】古钩藤；镇痛抗炎；药理作用 Abstract： ObjectiveTostudytheantiMSinflammatoryandanalgesiaactionsoftheCMShinesemedic ineGuGouTengsolution.MethodsTheeffectofGuGouTengsolutiononanalgesiawa sobservedwiththeresponseofwrithesandhot-platetests.Theeffectofantiinflammationwasobservedbymiceinflammationmodelscausedbydimethybenze neandmicemodelswithreinforcepermeabilityofabdominalcavitycapillarycaused byaceticacid.ResultsGuGouTengsolutionhadaprominentanalgesiaeffect.Itcould restrainthecapillarypermeabilityresultedfromimflammationbydimethybenzene. CMSonclusionGuGouTengsolutionhassignificanteffectsofanalgesiaandantiinflammatoryonexperimentalmice. Keywords：GuGouTeng；AntiMSinflammationandanalgesictest； P500harmacology 古钩藤又名海上霸王、白叶藤、牛角藤、大暗消等等,为萝摩科植物古钩藤 CMSryptolepisbuchananiiRoem.etSchult 的地上部分。多生于阳坡，攀援于其他树上， 分布于广东、广西、云南、贵州等地。具有舒筋活络，消肿止痛，解毒等功效，用于治疗 腰痛、腹痛、跌打损伤、骨折、痈疮、癣等疾病［1］。目前，镇痛抗炎作用的药物多为 西药，且副作用多，而中草药古钩藤民间使用也有这方面的作用，应该是值得研究、开发 的镇痛抗炎药，国内外尚无对其这方面药理作用研究的详细报道。本科技研究小组对古钩 藤的镇痛抗炎作用进行了实验研究,旨在对其进一步开发和临床应用提供一定的理论依据。 1 材料 1.1 动物小鼠，雌雄兼用，体重(20±2)gg，均由广西中医学院实验动物中心提供，动 物证号 1104，根据实验性质和性别分笼喂养，自由采食饮水。 1.2 仪器台式离心机；XZBMS2B 型自控温度热板仪，山东省医学科学院设备供应维修 站制造，设备号为：3MS109MS1MS7MS6；722 型光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂，设备 号为：3MS109MS4MS4MS93 1.3 药品与试剂干燥古钩藤，采自广西百色地区田林县郊外；硫酸罗通定注射液，广 东省博罗先锋药业集团有限公司生产，批号 020902；醋酸地塞米松，浙江仙琚制药股份 有限公司生产，批号 040405。 试剂：醋酸,长春市化学试剂厂。伊文思蓝,上海化学试剂公司进口分装,批号 F9800MS9800。二甲苯,齐鲁石化公司研究院试剂公司。生理盐水,济南永宁制药厂。 1.4 制备古钩藤水煎剂古钩藤根和茎各 200g，加 8 倍水浸泡 1h，煎煮 40min,煎煮 2 次，合并药液过滤浓缩至 200ml(1.00g/ml)g，按所需要的剂量配成根溶液和茎溶液大剂 量均为 30g/kg，小剂量均为 15g/kg，以备用。 2 方法和结果 2.1 小鼠热板法镇痛实验［2］取雌性小鼠，放入(55±0.5)g℃热板测痛仪中，以舔后 足作为疼痛反应指标，预测小鼠药前痛阈值。以痛阈值小于 30s 视为合格小鼠，将痛阈值 合格的 60 只小鼠随机分为 6 组，每组 10 只。分别是古钩藤根大剂量组，剂量为 30g/ kg；古钩藤根小剂量组，剂量为 15g/kg；古钩藤茎大剂量组，剂量为 30g/kg；古钩藤茎 小剂量组，剂量为 15g/kg；阳性对照药罗通定组，剂量 0.03g/kg；生理盐水对照组，剂 量为 30ml/kg。灌胃给药两次，时间间隔为 4h。末次给药后 30，60，90，120min 分 别测定痛阈值。在测定中，如 60s 内无痛反应，应立即取出，并以 60s 计算。各给药组与 对照组比较，统计数据以±s 表示，统计方法用 Dunnett 检验法。结果见表 1。 痛阈值提高百分率（%）及香薷属（=（药后痛阈值-药前痛阈值）及香薷属（药前痛阈值×100% 表 1 结果表明，古钩藤根大剂量组在药后 90，120min 能显著提高小鼠痛阈值，而古 钩藤根小剂量组和茎小剂量组在药后 30，60，90，120min 对小鼠痛阈值提高不明显， 古钩藤茎大剂量组在药后 120min 有提高小鼠痛阈值的趋势。从本实验结果中可以提示本 药的镇痛作用不稳定 2.2 小鼠扭体法镇痛实验［2］取体重 18～22g 健康小鼠 60 只，雌雄各半，随机分 为 6 组，分组及给药方法同 2.1 项。末次给药后 30min 腹腔注射 0.7%冰醋酸 0.2ml/只, 同时用秒表计时，记录小鼠出现第 1 次扭体反应的时间(即潜伏期)g及 15min 内出现的扭体 次数。各给药组与对照组比较，统计数据以±s 表示，统计方法用 Dunnett 检验法。结果 见表 2。 表 2 结果表明,除古钩藤茎大剂量组对冰醋酸致痛小鼠疼痛潜伏期无明显延长外，古钩 藤根、茎其他各剂量组均能延长冰醋酸致痛小鼠疼痛潜伏期，并能显著减少小鼠的扭体次 数，具有明显的镇痛作用。从各剂量组的镇痛百分率来看，也都有较为明显的镇痛作用。 2.3 小鼠二甲苯耳廓肿胀实验［2］取健康 18～22g 雄性小鼠 60 只，阳性对照组药 物改地塞米松，剂量为 6.75mg/kg，其他分组与给药均同 2.1 项。第 8 天每只小鼠右耳 廓前后均匀涂擦当日配制的二甲苯 0.1ml/只，致炎 15min 后将小鼠脱颈椎处死，剪下小 鼠左右耳，用打孔器（直径 6mm）及香薷属（分别在左、右耳同一部位打下等大的圆形耳片，分别 在电子天平上称重后，计算耳廓肿胀度。各给药组与对照组比较，统计数据以±s 表示， 统计方法用 Dunnett 检验法。耳廓肿胀度=右耳重量-左耳重量。肿胀抑制率（%）及香薷属（= ［（对照组肿胀度-给药组肿胀度）及香薷属（/对照组肿胀度］×100%。结果见表 3。 表 1 古钩藤对热板法致痛小鼠的镇痛作用（略）及香薷属（ 与生理盐水组比较,*P<0.05P500<0.05，▲P500<0.01；n=8 表 2 古钩藤对冰醋酸致痛小鼠的镇痛作用（略）及香薷属（ 与生理盐水组比较,*P<0.05P500<0.05，▲P500<0.01；n=8 表 3 古钩藤对小鼠耳廓肿胀的影响（略）及香薷属（ 与生理盐水组比较,*P<0.05P500<0.05，▲P500<0.01；n=8 表 3 结果表明,古钩藤根、茎各剂量组均能明显抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀。从 抑制率看，各剂量组也都具备一定抑制耳廓肿胀的趋势，其中以古钩藤根大剂量组的抑制 率为最佳。 2.4 对小鼠毛细血管通透性影响的实验［2］取体重 18～22g 健康小鼠 60 只，雌雄 各半，分组及给药方法同 2.3 项。第 8 天，每只小鼠尾静脉注射 2.5%伊文思蓝 0.1ml/ 10g(体重)g，并同时腹腔注射 0.7%冰醋酸 0.2ml/只,15min 后用 6ml 蒸馏水腹腔注射， 轻柔小鼠腹部，然后断头处死小鼠，剪开腹腔，用吸管吸取腹腔洗出液约 5～ 6ml，3000r/min 离心 5min，取上清液 3ml 在 722 分光光度计 590nm 处测定吸收度 (OD 值)g。各给药组与对照组比较，统计数据以±s 表示，统计方法用 Dunnett 检验法。 结果见表 4。 表 4 古钩藤对小鼠毛细血管通透性的影响（略）及香薷属（ 与生理盐水组比较,*P<0.05P500<0.05，▲P500<0.01;n=8 表 4 结果表明，古钩藤根大、小剂量组均能降低小鼠毛细血管通透性，减少腹腔液体 的渗出，具有明显的抗炎作用。古钩藤茎大剂量组效果不明显，而茎小剂量组也同样具体 有明显的作用。 3 讨论 上述实验结果显示，古钩藤的根、茎水煎液都具备一定的镇痛抗炎作用，或有这种作 用的趋势，但从中也看到其镇痛抗炎作用不稳定，另外其镇痛抗炎作用机制有待进一步研 究。现在用的是水煎液，其他提取物如醇提液是否有效或更有效也还值得进一步研究。 古钩藤是瑶族人民民间长期使用的药材,有舒筋活络，消肿止痛等功效，主要用于治疗 腰腿痛、风湿痛、痛经、软组织扭伤等,疗效显著，本实验结果与民间临床使用基本一致。 本实验为古钩藤的进一步开发及临床应用提供了一定的理论依据。 【摘要】目的通过体外细胞培养技术，探讨开口箭提取物的细胞毒活性，为进行深层 次研究提供依据。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）及香薷属（比色法。结果开口箭甲醇提取物、总 皂苷、30%总皂苷和 70%总皂苷对 HL-60 和 CMSaski 细胞的抑制作用显著，与阴性对照相 比（P500<0.05）及香薷属（,对 HL-60 细胞的抑制率达到 60.12%，72.25%，89.09%，95.17%， 其 ICMS50 为 65.57，45.07，35.40，22.89μlg/ml。对 CMSaski 细胞的抑制率达到 63.94%，71.48%，62.49%，73.43%，其 ICMS50 为 108.42，84.53，41.02，47.19μlg/ml。结论开口箭提取物对 HL-60 和 CMSaski 细胞具有 明显的抑制作用。 【关键词】开口箭；皂苷；MTT 法；细胞毒活性 Abstract： ObjectiveToobservethecytotoxicitiesoftheextractsofTupistrachinensisBak.withi nvitrocellculturetechnology,andprovideevidenceforthefurtherresearch.Method sThecytotoxicitieswereassayedbyMTTmethodsonHL60andCMSaskitumorcells.ResultsTheinhibitioneffectoftheextractsofTupistrachinen sisBak.,totalsaponins,30%totalsaponinsand70%totalsaponinsonHL60andCMSaskicellswereallprominent,comparedwiththenegativemodelgroup(P500<0. 05)g.TheirinhibitionratiosonHL60tumorcellswereasfollows:60.12%,72.25%,89.09%and95.17%，andtheirICMS50 were65.57,45.07,35.40and22.89μlg/ ml.TheirinhibitionratiosonCMSaskicellswere63.94%,71.48%,62.49%and73.43%， andtheirICMS50were108.42,84.53,41.02,47.19μlg/ ml.CMSonclusionTheextractsofTupistrachinensisBak.havesignificantcytotoxicityo nHL-60andCMSaskitumorcells. Keywords：TupistrachinensisBak.；Saponin；MTTmethod；CMSytotoxicity 开口箭（TupistrachinensisBak.）及香薷属（系百合科 Liliaceae 铃兰族开口箭属植物，为著 名的传统中药，主治劳热咳嗽、跌打损伤、风湿痹痛等症，民间用于治疗咽喉炎、扁桃体 炎等。现证明开口箭具有祛痰、抗炎、抑菌及醒酒作用［1，2］。 本实验室通过实验证实湖北省产开口箭含有甾体皂苷和甾体皂苷元,且含量较高 ［3］。皂苷具有增强免疫功能、抗辐射、抑制肿瘤生长、抗炎、降血糖等广泛的生物学 活性,近年越来越受人们的普遍关注。有研究证实开口箭同属植物皂苷成分有细胞毒活性 ［4，5］。本文旨在通过体外抗肿瘤实验,观察开口箭提取物对 HL-60 和 CMSaski 细胞的细 胞毒活性,现报告如下。 1 材料