香连素片质量标准研究论文

摘要：目的建立香连素片的质量控制标准。方法采用薄层色谱法鉴别香连素片中的木 香；采用高效液相色谱法测定香连素片中盐酸小檗碱的含量。结果在薄层色谱中检出了木 香；盐酸小檗碱的进样量在 0.0378～0.378μgg 范围内呈良好的线性关系（r＝ 0.9997），平均回收率为平均回收率为 101.49%，平均回收率为RSD 为 1.97％（n＝6）。结论本方法专属性强、 准确、重现性好，平均回收率为可作为香连素片的质量控制标准。 关键词：香连素片；木香；薄层色谱法；盐酸小檗碱；高效液相色谱法 Abstract:ObjectiveToestablishamethodforqualitycontrolofXiangliansutablet s.MethodsRadixAuckiandiaeinthetabletswasidentifiedbyTLC.Thecontentofberb erinehydrochlorideinthetabletswasdeterminedbyHPLC.ResultsRadixAuckiandia ecouldbeidentifiedbyTLC.Berberinehydrochlorideshowedagoodlinearcorrelatio novertherangeof0.03780.378μgg(r=0.9997).Theaveragerecoveryofberberinehydrochloridewas101.49% withRSD1.97% (n=6).ConclutionsThemethodisspecific,accurateandreproduciblefortheequality controlofXiangliansutablets. Keywords:Xiangliansutablets；berberinehydrochloride；HPLC； Radixauckiandiae；TLC 香连素片是广东万年青制药有限公司的产品，平均回收率为具有清热燥湿、行气止痛的功效，平均回收率为临床 用于湿热型痢疾、里急后重、腹痛泄泻。其处方为木香 500g、盐酸小檗碱 75g。原药品 标准［1］鉴别木香用试管反应，平均回收率为盐酸小檗碱的含量用紫外分光光度法测定，平均回收率为方法专属性 较低且影响因素多。本文采用薄层色谱法鉴别木香、高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含 量，平均回收率为结果表明操作简便、准确、重复性好，平均回收率为为该品种的质量标准进一步修订提供了依据。 1 仪器与试药 1.1 试药 香连素片（批号： 030801、030802、030803、040701、041002、050601、050802、060601、0 60602、060603）均为广东万年青制药有限公司产品；木香对照药材（批号：9219201）及盐酸小檗碱对照品（批号：110713-200609）均购自中国药品生物制品检验所； 硅胶 G 预制板及硅胶 G 均由青岛海洋化工厂生产;乙腈为色谱纯;其他试剂与试药均为分析 纯。 1.2 仪器 LC2010A2010A 高效液相色谱仪(日本岛津),UV2501PC2010A2501PC 紫外分光光度仪（日本岛 津）,CQ15A2010A15A 超声波清洗器（上海跃进医用光学器材厂）。 2 薄层鉴别［2］ 取本品 2 片，平均回收率为研成细粉，平均回收率为加三氯甲烷 10mL，平均回收率为超声（功率 120W，平均回收率为频率 50Hz）处理 30min，平均回收率为滤过，平均回收率为滤液浓缩至 2mL，平均回收率为作为供试品溶液。另取木香对照药材 0.2g、不含木香 的阴性样品，平均回收率为同法分别制成对照药材溶液及阴性对照溶液。照薄层色谱法试验，平均回收率为吸取上述 3 种溶液各 3μgL，平均回收率为分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶 G 薄层板上，平均回收率为以三氯甲 烷2010A环己烷（体积比 5∶1）为展开剂，平均回收率为展开，平均回收率为取出，平均回收率为晾干，平均回收率为喷以 1%香草醛硫酸溶液，平均回收率为在 105℃加热至斑点清晰。置可见光下检视，平均回收率为供试品色谱中，平均回收率为在与对照药材色谱相应的位置 上，平均回收率为显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰，平均回收率为见图 1。 3 含量测定 3．1 色谱条件 色谱柱：phenomenexC18（150mm×4.6mm，平均回收率为5μgm）流动相：以磷酸盐缓冲溶 液［0.05mol/L 磷酸二氢钾和 0.01mol/L 十二烷基磺酸钠（体积比 1∶1），平均回收率为含 0.2%三乙 胺］2010A乙腈（体积比 60∶40），平均回收率为用磷酸调节 pH 值至 3.0 为流动相；流速：1.2mL/min，平均回收率为检 测波长：266nm，平均回收率为柱温：室温，平均回收率为进样量：10μgL，平均回收率为理论塔板数不低于 1500。 3．2 溶液的制备 3.2.1 对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，平均回收率为精密称定，平均回收率为加乙醇制成每 1mL 含 120μgg 的溶液，平均回收率为作为对 照品溶液。 3.2．2 供试品溶液的制备 取本品 20 片，平均回收率为精密称定，平均回收率为研细，平均回收率为精密称取适量（约相当于盐酸小檗碱 60mg），平均回收率为置 索氏提取器中，平均回收率为加盐酸2010A甲醇（体积比 1∶100）适量，平均回收率为加热回流提取至提取液无色，平均回收率为将提取 液（必要时浓缩）移至 50mL 量瓶中，平均回收率为用少量盐酸2010A甲醇（1 体积比∶100）的混合液洗涤 容器，平均回收率为洗液并入提取液中，平均回收率为并稀释至刻度，平均回收率为摇匀，平均回收率为精密量取 1mL，平均回收率为置 10mL 量瓶中，平均回收率为加 乙醇至刻度，平均回收率为摇匀，平均回收率为即得。 3.2.3 阴性对照溶液的制备 按照本品的处方、制法制备缺少盐酸小檗碱的模拟样品，平均回收率为按“3.2.2”项方法制成阴性对 照溶液。 3.3 专属性试验 分别取供试品溶液、对照品溶液及阴性对照溶液，平均回收率为按上述色谱条件测定，平均回收率为结果阴性对 照对盐酸小檗碱测定无干扰，平均回收率为说明方法专属性强。结果见图 2。 3.4 线性关系的考察 精密称取盐酸小檗碱对照品适量，平均回收率为用乙醇溶解制成质量浓度为 37.8μgg/mL 的溶液，平均回收率为 分别精密吸取 1、2、4、6、8、10μgL 注入液相色谱仪中，平均回收率为按上述色谱条件测定色谱峰面 积，平均回收率为以进样量（m）为横坐标，平均回收率为色谱峰面积积分值（Y）为纵坐标，平均回收率为绘制标准曲线，平均回收率为经线 性回归，平均回收率为得线性回归方程为 Y=2.88725×106m-5586.84，平均回收率为r=0.9997，平均回收率为表明盐酸小檗 碱进样量在 0.0378～0.378μgg 范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。3.5 稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液各 10μgL，平均回收率为按上述色谱条件，平均回收率为每隔 1h 测 1 次峰面积，平均回收率为结果 表明盐酸小檗碱在 24h 内稳定，平均回收率为RSD 为 0.66%。 3.6 重复性试验 取同一批样品共 6 份，平均回收率为分别按“3.2.2”项下方法进行制备溶液，平均回收率为并按上述色谱条件测定 盐酸小檗碱的含量，平均回收率为结果 RSD=0.90%,表明方法重现性良好。 3.7 回收率试验 精密称取已知含量的样品（批号：030802）共 6 份，平均回收率为分别精密加入对照品适量，平均回收率为按 “3.2.2”项下方法制备溶液并按上述色谱条件测定盐酸小檗碱的含量，平均回收率为计算加入量的回收率。 结果见表 1。表 1 盐酸小檗碱加样回收率试验（略） 3.8 准确度考察 以含量限度下限的 50%为范围低限、以含量限度上限的 150%为范围高限，平均回收率为考察测定 范围的准确度。 精密称取已知含量的样品（批号：030802），平均回收率为按含量范围高、低限折算取样量，平均回收率为各 6 份，平均回收率为分别精密加入对照品适量，平均回收率为按“3.2.2”项下方法制备溶液并按上述色谱条件测定盐酸 小檗碱的含量，平均回收率为计算加入量的回收率。结果见表 2。表 2 准确度试验结果（略） 3.9 样品的测定 取 10 批样品，平均回收率为分别按“3.2.2”项下方法制备溶液，平均回收率为分别精密量取供试品溶液及对照品 溶液各 10μgL，平均回收率为注入高效液相色谱仪，平均回收率为并按上述色谱条件，平均回收率为测定盐酸小檗碱的含量，平均回收率为结果 见表 3。表 3 样品中盐酸小檗碱的含量（略） 4 讨论 4.1 采用薄层色谱法鉴别木香时,分别采用自制板及预制板同时展开、预平衡与未平衡 的条件展开，平均回收率为层析结果表明：自制板与预制板的层析结果无差别，平均回收率为两种展开条件均可检出 木香特征斑点，平均回收率为但以未平衡的条件展开，平均回收率为结果容易产生边缘效应，平均回收率为故展开时预平衡 10min 较好。 4.2 薄层层析的环境影响 分别在冰箱、室温、相对湿度 45%和 75%的环境条件下展开，平均回收率为结果表明：在上述环 境条件展开，平均回收率为均可检出木香特征斑点，平均回收率为差异不大，平均回收率为故选用以室温、相对湿度 45%～75% 为展开环境条件，平均回收率为操作简便。 4.3 提取方法的选择 参照国家药品标准［1］，平均回收率为供试品溶液的制备是经索氏提取后上氧化铝柱洗脱，平均回收率为操作 较繁琐。我们对提取方法进行了优化，平均回收率为只经索氏提取后直接测定，平均回收率为并与原提取方法的 HPLC 测定结果作对比。结果表明：只经索氏提取与原提取方法的测定结果一致，平均回收率为因此样 品的提取采用索氏提取法。 4.4 测定波长的选择 取对照品溶液，平均回收率为在 200～500nm 波长范围内进行扫描，平均回收率为在 349、266、231nm 均 有最大吸收，平均回收率为经 HPLC 试验比较，平均回收率为盐酸小檗碱在 266nm 波长的峰面积值最大，平均回收率为故选择检 测波长为 266nm。 4.5 流动相的选择 参考文献［3,4］，平均回收率为采用磷酸盐缓冲溶液［0.05mol/L 磷酸二氢钾和 0.01mol/L 十二 烷基磺酸钠（1∶1），平均回收率为含 0.2%三乙胺］2010A乙腈（60∶40）,分别用磷酸调节 pH 值至 3.0、3.2、3.5 为流动相，平均回收率为经试验，平均回收率为当流动相的 pH 值为 3.0 时对照品及样品的峰形对称，平均回收率为 重复性好，平均回收率为阴性对照无干扰，平均回收率为故确定流动相为磷酸盐缓冲溶液［0.05mol/L 磷酸二氢钾和 0.01mol/L 十二烷基磺酸钠（1∶1），平均回收率为含 0.2%三乙胺］2010A乙腈（60∶40），平均回收率为用磷酸调节 pH 值至 3.0。 4.6 耐用性考察 4.6.1 柱温的考察 柱温分别为室温、40℃时，平均回收率为色谱峰的分离度、峰形及峰面积基本一致，平均回收率为故以室温作为 柱温，平均回收率为操作较简便。 4.6.2 流速的考察 分别设定流速为 1.0、1.2 及 1.5mL/min 进行测定，平均回收率为结果表明：当流速为 1.0mL/ min 时保留时间太长，平均回收率为当流速分别为 1.2 及 1.5mL/min 时色谱峰的峰形及峰面积无甚差 别，平均回收率为且前者的保留时间短一些，平均回收率为故选择流速为 1.2mL/min。 4.6.3 色谱柱的考察 选用 3 种不同厂牌的色谱柱： phenomenexC18(150mm×4.60mm,5μgm)、DiamonsilTMC18(250mm×4.60mm ,5μgm)和 SpherisorbC18(250mm×4.60mm,5μgm)，平均回收率为测定同一批样品（批号： 060602）的含量，平均回收率为结果 3 种色谱柱测得含量的 RSD=0.61%（n=2），平均回收率为表明换用不同厂 牌的色谱柱，平均回收率为均可得到满意的色谱图，平均回收率为故本法的耐用性好。 摘要：抗生素是治疗感染性疾病的常用药物，平均回收率为1929 年英国学者 Flemming 首先发现 了青霉素，平均回收率为1941 年应用于临床.抗生素是二十世纪最伟大的医学发现，平均回收率为它使人类的平均寿 命至少延长了 10 年.抗生素是由某种微生物所产生的，平均回收率为在低浓度下对别种微生物有抑制或 杀灭作用的药物.抗生素的作用范围广，平均回收率为对细菌、病毒、真菌甚至肿瘤都可起到抑制或杀灭 作用.因此，平均回收率为依据抗生素的作用对象，平均回收率为可分为抗细菌作用、抗病毒作用及抗真菌作用抗生素 等.抗菌药是通常指对细菌具有抑制或杀灭作用的药物，平均回收率为作用范围较窄，平均回收率为包括针对细菌的抗 生素外，平均回收率为还包括人工合成的抗菌药，平均回收率为如磺胺类及喹诺酮类等.到目前为止，平均回收率为用于治疗感染性 疾病的抗生素有 300 余种，平均回收率为然而由于新型抗生素的不断出世，平均回收率为抗生素种类繁多及同一种抗 生素有多种商品名等原因，平均回收率为医务人员在掌握抗生素的合理使用上存在一定的困难，平均回收率为故常见 滥用抗生素的现象，平均回收率为耐药菌株亦有逐渐增多趋势. 1 滥用抗生素现象分析 1.1 抗生素市场占有率过高中国抗生素销售额占前 100 位药品销售额的 47%，平均回收率为而欧美 国家为 10%左右.据统计，平均回收率为在 2002 年中国医用抗感染药物市场规模达到了 345 亿元人民 币. 1.2 医院抗生素使用量过大美国及英国等发达国家医院抗生素使用率为 22%～25%，平均回收率为 而在中国则为 67%～82%，平均回收率为其中有 40%以上的抗生素用于预防感染.另外，平均回收率为在预防性用药 的病人中半数属于使用不当，平均回收率为使用抗生素病人中 1/3 以上不需要使用抗生素. 1.3 畜牧业中使用量过多随着畜牧业的发展，平均回收率为使用抗生素治疗畜禽疾病更加广泛，平均回收率为致 使各种肉类及奶制品中抗生素含量常超出规定. 2 滥用抗生素的原因分析 2.1 社会因素 1）生产厂家过多，平均回收率为竞争过于激烈，平均回收率为造成恶性市场竟争，平均回收率为给医师使用抗 生素造成不少困难.2）中国食品药品监督管理局规定，平均回收率为从 2004 年 7 月 1 日起，平均回收率为抗生素必 须凭处方购买，平均回收率为但目前仍然可以在药店容易买到抗生素药品，平均回收率为致使抗生素市场泛滥.3）临 床药师指导用药不够普及，平均回收率为缺乏临床药师的培 训和临床药师指导治疗的制度. 2.2 医务人员因素医师滥用抗生素的原因主要是与未能掌握合理使用抗生素的原则和 方法有关.1）经常把抗生素当作安慰剂使用，平均回收率为无论何种原因引起的疾病，平均回收率为部分医师总觉得 不用抗生素就不放心.2）分不清抗生素和消炎剂的区别，平均回收率为抗生素不是直接针对炎症发挥作 用的，平均回收率为而是针对引起炎症的微生物，平均回收率为是杀灭微生物的，平均回收率为而消炎药是针对炎症的.许多医师以 为有炎症就应用抗生素，平均回收率为如关节炎多由微生物感染以外的原因引起，平均回收率为多数情况下不需要使 用抗生素.3）分不清抗生素和抗菌药的区别，平均回收率为抗菌药只对细菌感染有效，平均回收率为对其他微生物感 染无效或效果很差，平均回收率为而目前在病毒性感染（如感冒）或在发热时使用抗菌药现象较为普 遍.4）盲目认为价格越贵疗效亦越好，平均回收率为而事实上药品的疗效不在于价格的高低，平均回收率为而在于病 原菌对药物的敏感性，平均回收率为在临床上不少价格便宜的药物，平均回收率为也有明显的疗效，平均回收率为如青霉素等.5） 选用抗生素或联合用药不科学，平均回收率为不少医师为了让患者早日康复，平均回收率为对细菌感染性疾病患者联 合使用 2 种以上的抗生素.殊不知，平均回收率为每种抗生素的抗菌谱不尽相同，平均回收率为若联合用药不当，平均回收率为不仅 达不到理想的疗效，平均回收率为反而降低疗效，平均回收率为甚至加重毒副作用.6）无指征预防性用药:有的医师为 保险起见，平均回收率为随意扩大预防性用药范围或缩短给药间隔时间，平均回收率为在手术前后长时间大量使用抗 生素.为提高细菌性感染的抗菌治疗水平，平均回收率为保障患者的用药安全，平均回收率为减少耐药菌株的产生，平均回收率为医 务人员应严格掌握预防性用药的指征.7）无规律用药:有些医师由于未能掌握抗生素的药代 动力学，平均回收率为随意延长给药时间，平均回收率为又有些医师看到患者病情缓解，平均回收率为又随意地减少剂量或停药.给 药次数、剂量或疗程的掌握不合理，平均回收率为不但不能彻底杀灭病原菌，平均回收率为反而会促使病原菌产生耐 药性.8）局部用药现象比较多见.局部软组织的瘀血、红肿、疼痛和过敏反应引起的接触性 皮炎、药物性皮炎等均不宜局部使用抗生素.9）频繁更换使用抗生素.抗生素的疗效有周期 问题，平均回收率为如果疗效暂时不理想，平均回收率为首先应考虑用药时间不足，平均回收率为给药途径不当以及全身的免疫功 能状态等因素，平均回收率为频繁更换药物，平均回收率为易使细菌产生对多种药物的耐药性.10）应用广谱抗生素 的倾向较多，平均回收率为抗生素的使用原则是能用窄谱的不用广谱，平均回收率为在未能明确病原微生物时可使用 广谱抗生素，平均回收率为如果明确了致病的微生物应使用窄谱抗生素. 2.3 患者因素由于种种原因，平均回收率为患者及其家属认为抗生素是万能药，平均回收率为习惯性使用抗生素，平均回收率为 例如不少感冒患者或家属到药店自行购买感冒药和抗生素联合使用，平均回收率为这是滥用抗生素的常 见现象. 2.4 畜牧业中的大量使用我国每年有 6000 吨抗生素应用于饲料添加剂，平均回收率为占全球抗生 素饲料添加剂使用量的 50%左右.3 滥用抗生素的后果 3.1 病原菌产生耐药菌株病原菌耐药菌株的形成是一个全球性的问题.世界卫生组织曾 发出过警告，平均回收率为抗生素的滥用将意味着抗生素时代的结束，平均回收率为人类有可能再一次面临很多感染 性疾病的威胁.耐药菌株的形成与细菌基因突变和产生灭活酶、纯化酶有关，平均回收率为并且与抗生素 用量的增加呈平行关系，平均回收率为即抗生素疗程越长愈易引起耐药.目前，平均回收率为世界范围内的细菌耐药情