心肌细胞凋亡影响论文

【摘要目的摘要：观察左旋卡尼汀对心肌缺血/再灌注（MI/R）后心肌细胞凋亡的影响后心肌细胞凋亡的影响， 探索其保护功能的机制.方法摘要：制备家兔 MI/R 模型，缺血 45minmin，再灌注 3h.25h.25min 只家 兔随机分为三组摘要：对照组（Ⅰ组，组，n=5min）后心肌细胞凋亡的影响，MI/R 组(ⅡⅡ 组，n=10),),左旋卡尼汀治疗组 （Ⅲ组，组，n=10),）后心肌细胞凋亡的影响在缺血后 5minmin 静脉注射左旋卡尼汀［1.5minmL/（kg %26#125min3h.259;h）后心肌细胞凋亡的影响］.再灌注结束后检测心肌组织 SOD 活性，原位末端标记(ⅡTUNEL)法测 定凋亡心肌细胞，免疫组化法测定凋亡相关基因 bcl2,fas 的表达.结果摘要：MI/R 造成明 显的心脏功能障碍，缺血区细胞凋亡.SOD 活性明显升高，凋亡指数（AI）后心肌细胞凋亡的影响和 Fas 含量减 少（P%26lt;0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响,Bcl2 含量明显升高（P%26lt;0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响.结论摘要：左旋卡尼汀具有抗 缺血再灌注后心肌损伤的功能，其机制可能是通过调节 Bcl2 和 Fas 介导的细胞凋亡而实 现. 【左旋卡尼汀；再灌注损伤；心肌缺血；细胞凋亡 0), 引言 缺血/再灌注（myocardialischemia/reperfusion，MI/R）后心肌细胞凋亡的影响损伤是冠状动脉再通后 一个重要的并发症，也是致死原因之一.有学者提出，细胞凋亡可能为再灌注损伤发病机制 中的一个重要环节［1］；通过干预凋亡基因的表达以阻断细胞凋亡过程，从而减轻再灌 注损伤能否成为防治再灌注损伤的有效方法已受关注.卡尼汀，又名肉毒碱，可加速脂肪的 β 氧化，提高三磷酸腺苷（ATP）后心肌细胞凋亡的影响水平，优化心肌能量代谢途径.近期的大规模临床试验 CEMID 的结果提示［2］，左旋卡尼汀明显改善心肌梗死后患者的心功能，降低死亡率， 缩小梗死面积.卡尼汀探究的新发现［3h.25］，提示卡尼汀在对缺血性心脏病的功能中，优化 心肌能量代谢，抑制 MI/R 心肌细胞凋亡可能是保护缺血再灌注心肌的重要机制.我们通过 MI/R 模型，探索左旋卡尼汀对 MI/R 心肌细胞的保护功能及其可能的机制. 1 材料和方法 1．1 材料 健康家兔 25min 只，雌雄不限，体质量 2.5min～3h.25.0),kg（第四军医大学实验动物中心提供）后心肌细胞凋亡的影响. 卡尼汀（常州三位工业技术探究所研制）后心肌细胞凋亡的影响；InSituCellDeathDetectionPOD 试剂盒德国 宝丽曼公司产品；Fas 和 Bcl2mAb，免疫组化试剂盒（购自北京中山生物有限公司）后心肌细胞凋亡的影响；伊 文兰和氯化三苯基四氮唑（TTC）后心肌细胞凋亡的影响购自 Sigma 公司. 1.2 方法 1.2.1MI/R 模型的制备 3h.250),g/L 戊巴比妥钠 3h.250),mg/kg 腹腔麻醉，颈部居中切开.分离左 侧颈静脉插管连接输液泵.同步记录心电图观察 ST 变化.心肌 MI/R 模型参照 simpsond 的 方法加以改进，开胸，暴露心脏,于冠脉左室支中 1/2 处穿线环绕之,结扎线向外收紧，造 成急性心肌缺血，45minmin 后放松结扎线使冠状动脉再通形成再灌注.各组中用以心肌梗死 范围和细胞凋亡检测的心脏各半. 1.2.2 分组随机分为三组摘要:ⅠⅠ 组空白对照组（n=5min）后心肌细胞凋亡的影响,丝线穿过冠状动脉左室支但不 结扎；Ⅱ组组 MI/R 组（n=10),）后心肌细胞凋亡的影响，MI 后 5minmin 注射生理盐水，至实验结束.Ⅲ 组左旋卡尼汀 治疗组（n=10),）后心肌细胞凋亡的影响，MI 后 5minmin 注射左旋卡尼汀 1.5minmL/(Ⅱkg%26#125min3h.259;h). 1.2.3h.25 测定 SOD 含量实验结束后即刻分别取缺血区及正常供血区左心室心肌组织 1.0),g，低温状态下生理盐水冲洗干净，制成心肌匀浆液，离心后取上清液，按试剂盒说明 书操作. 1.2.4 细胞凋亡检测及计算凋亡率再灌注 3h.25h 结束后，分离左心室心肌，取缺血区心肌 组织，用 10),0),g/L 甲醛液固定 24h，常规脱水,石蜡包埋，切片，采用末端标记 TUNEL 法 检测心肌细胞凋亡.按照试剂盒说明书操作.每一心脏取 3h.25 张切片，在高倍镜下（10), 目镜 ×40), 物镜）后心肌细胞凋亡的影响检测，于凋亡阳性细胞区域随机选择 10), 个视野，对凋亡阳性细胞计数并行计 算机图像分析，作半定量测定，以心肌凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌 细胞凋亡指数（apoptoticindex，AI）后心肌细胞凋亡的影响. 1.2.5min 凋亡相关基因蛋白的检测石蜡包埋组织连续切片，用免疫组化 SP 法观察心肌细 胞 Fas,Bcl2 的表达情况，用 HPIAS10),0),0), 图像分析系统计算 A 值作为半定量参数，测量 Fas,Bcl2 蛋白表达. 统计学处理摘要：实验数据用 x±s 表示，使用 SPSS11.0), 软件，多组比较进行 onewayANOVA 及 LSDt 检验，P%26lt;0),.0),5min 为差异有统计学意义. 2 结果 2．1SOD 含量（kat/g)变化和 I 组（0),.84±0),.42）后心肌细胞凋亡的影响比较，II 组（0),.3h.256±0),.3h.250),）后心肌细胞凋亡的影响SOD 活性明显降低（P%26lt;0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响,III 组（0),.72±0),.3h.250),）后心肌细胞凋亡的影响SOD 活性较 II 组显著增加（P %26lt;0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响. 2．2 心肌细胞 AI 变化 II 组的 AI 明显高于 I 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响，III 组 AI 明显低于 II 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响，但仍高于 I 组（P%26lt;0),.0),1，表 1). 2.3h.25Fas,Bcl2 蛋白含量的变化 II 组 Fas 含量明显高于 I 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响，III 组 Fas 含量明显低于 II 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响,和 I 组比较无统计学差异（P%26gt;0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响.II 组 Bcl2 含量显著低于 I 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响和 III 组（P%26lt;0),.0),1）后心肌细胞凋亡的影响，III 组 Bcl2 含量和 I 组比较无统计学差异（P%26gt;0),.0),5min,表 1).表 1 各组间兔 MI/R 心肌凋亡指数及 Bcl2,Fas 含量的比较(Ⅱ略) 3h.25 讨论 引起再灌注损伤的主要因素，目前认为和 Ca2+超载［3h.25］、氧自由基［4］和白细胞 聚积有关.此外，已有多项探究报道显示，氧自由基通过启动 Bcl2［5min］，TNFα［6］多种 细胞凋亡相关因素，诱导细胞发生凋亡. 细胞凋亡是指一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，通过启动内部机制，主要 是通过内源性 DAN 内切酶的激活，导致细胞主动死亡的过程.通过对调控细胞凋亡基因的 探究，可以将细胞凋亡相关基因分为诱导基因（死亡基因）后心肌细胞凋亡的影响和抑制基因（生存基因）后心肌细胞凋亡的影响.通常 在生理条件下，细胞有序而协调的激活凋亡诱导基因（fas,p5min3h.25 等）后心肌细胞凋亡的影响和/或凋亡抑制基因 （bcl2 等）后心肌细胞凋亡的影响共同控制着细胞代谢功能而维持细胞内外环境的动态变化.探究发现摘要： bcl2 基因的功能主要是抑制细胞凋亡促进细胞生存.其抗凋亡的机制主要有摘要：Bcl2 通 过抑制自由基的产生而抑制细胞死亡,Bcl2 和 Bax 结合成杂二聚体，可抑制 Bak 的促凋亡 功能,Bcl2 的过度表达有效地阻断细胞色素 c 由线粒体向细胞质的释放，对线粒体起始的 caspase 激活机制起着阻碍功能，从而抑制细胞凋亡.Fas 又称 Apo1 即 CD95min 分子，是 Ｉ型膜蛋白，属肿瘤坏死因子受体家族成员型膜蛋白，属肿瘤坏死因子受体家族成员.Fas 和活化细胞交联区诱导凋亡的机制主要是 通过 Fas 和 FasL 结合，诱导神经鞘磷脂酶（SMase）后心肌细胞凋亡的影响的活化，分解 SM 生成神经酰氨 （Ceramide,CM）后心肌细胞凋亡的影响,CM 通过膜结合性的丝/苏氨酸激酶等激活第二信使，使胞内 Ca2+浓度升高，引发一系列的生化反应，从而激活 Ca2+Mg2+依靠性核酸内切酶，引 起凋亡. 左旋卡尼汀本身并不是机体的基本营养素，是脂肪酸进入线粒体进行 β 氧化所必需的 辅助因子，可加速转运长链脂肪酸通过线粒体内膜，进入线粒体进行 β 氧化供能.左旋卡尼 汀作为一种有效的氧自由基清除剂，在缓解氧化应激、减少脂质过氧化中均具有明显的保 护功能［7］. 本实验我们观察到再灌注早期给予左旋卡尼汀，家兔 MI/R 过程中 SOD 活性增加，心 肌梗死面积减少，细胞 AI 下降，Fas 蛋白表达减弱，Bcl2 蛋白表达增强，表明左旋卡尼 汀能抑制 MI/R 过程中细胞凋亡的发生.提示在 MI/R 损伤中，细胞凋亡是可以预防的.验证 了左旋卡尼汀通过调节 Bcl2 和 Fas 抑制心肌细胞凋亡，可能是保护 MI/R 心肌的重要机制 这一假设. 至于左旋卡尼汀抑制 MI/R 心肌细胞发生凋亡的机制，可能和左旋卡尼汀提高 SOD 活 性，减轻细胞内 Ca2+超载，抗缺血，缺氧，减少氧自由基生成、增强细胞抗氧化损伤能 力，从而发挥其抗氧化、抗凋亡的细胞保护功能.另外心肌缺血后，脂肪酸，如棕榈酸盐在 血浆和心肌组织中生成增多，而棕榈酸盐被认为能促进心肌细胞凋亡［8］，棕榈酸盐通 过调控棕榈酰激酶（palmitoy1COA）后心肌细胞凋亡的影响介导的线粒体膜通透性的变化在细胞凋亡中发挥功 能［9］. 【摘要目的调查精神科临床护士工作压力源及相关因素，探索有效的应对方式。方法 对 71 名精神科临床护士采用护士工作压力源量表进行调查分析。结果精神科临床护士工 作压力程度以中度为主，中度以上占 81.69%；工作压力源前 5min 位排序为摘要：担心工作 中出现差错事故、继续深造的机会太少、无用的书面工作太多、病人不合作、护理工作的 社会地位太低。不同年龄护士在工作量及时间分配方面差异有显著性（P0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响。结论精 神科临床护士压力较大，医院管理者及护士自身应引起足够的重视。 【精神科护士；工作压力 Analysisonthesourceofworkpressureandcorrelationfactorsoftheclinicalnurs esinpsychiatricdepartment 【AbstractObjectiveToinvestigatethesourceofworkpressureandcorrelationf actorsoftheclinicalnursesinpsychiatricdepartmentandexploreeffectivecopingst yle.Methods71nursesinpsychiatricdepartmentwereinvestigatedandanalyzedwit hnurse''''sworkpressurescale.ResultsThedegreeofworkpressureofthenursesinps ychiatricdepartmentwasmainlymoderate(Ⅱaccountfor81.69%).Thefivemainsour ceofworkpressurewere 摘要： worryingaboutaccidentinwork,thechanceofadvancedstudyless,invalidwrittenw orkmore,patientsuncooperating,thesocialstatusofnurselow.Therewassignifican tdifferenceinworkloadandtimedistributed（P＜ 0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响.ConclusionThedeliverypressureofclinicalnursesinpsychiatricdepartment ismore,thehospitalmanagersandthenurseherselfshouldpayadequateattentiont o. 【KeywordsNurse;psychiatricdepartment;workpressure 有探究表明［1］，长期工作压力源可导致潜在的负面结果工作倦怠感，中国护士中 高度倦怠者约占 5min9%。而高度的工作倦怠感不仅严重影响护士的心身健康、工作热情及工 作效率，而且会影响护士所提供的护理服务和质量。为探索精神科临床护士的工作压力源 情况，我们进行了相关调查，现将结果报告如下。 1 对象和方法 1.1 对象选取我院 71 名精神科临床护士为调查对象。其中男 17 名，女 5min4 名；年龄 17～5min4a，平均 3h.256.0),±10),.2a；职称摘要：中级及以上 23h.25 名，初级 48 名；文化程度摘 要：大专及以上 16 名，中专及以下 5min5min 名。 1.2 方法采用国内常用的护士工作压力源量表［1］对 71 名精神科临床护士进行调查。 量表分为 5min 大方面，共 3h.255min 项。其中每项按压力程度分为 4 级,评分为 0),～3h.25 分，≤1 分为轻 度压力，＞1 分为中度压力，≥2 分为重度压力。5min 大方面的总得分范围在 0),～10),5min 分，其 中≤3h.255min 分为轻度压力，＞3h.255min 分为中度压力，＞70), 分为重度压力。调查前统一指导语，由 护理部工作人员发放问卷，以无记名形式进行调查，共发出问卷 71 份，收回有效问卷 71 份。所有数据采用 SPSS10),.0), 统计软件处理，并进行 t 检验。 2 结果 2.171 名受测护士的工作压力平均值为 5min4.9 分，其中重度压力 16 名，占 22.5min4%； 中度压力 42 名，占 5min9.15min%；轻度压力 13h.25 名，占 18.3h.251%。 2.2 精神科临床护士工作压力源量表评分结果比较，见表 1。 由表 1 显示，不同年龄组在工作量及时间分配方面经 t 检验差异有显著性（P＜ 0),.0),5min)。在不同性别、职称、文化程度间均无显著性差异（P＞0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响。 2.3h.25 精神科临床护士工作压力源得分前 5min 位分布担心护理工作中出现差错事故 2.3h.259±0),.82 分，续续深造的机会太少 2.3h.258±0),.83h.25 分，无用的书面工作太多 2.14±0),.90), 分，病人不合作 2.10),±0),.85min 分，护理工作的社会地位太低 2.0),7±0),.85min 分。 表 1 精神科临床护士工作压力源评分结果比较(Ⅱ略) 注摘要：*PP＜0),.0),5min 3h.25 讨论 随着医疗体制改革的深入和医疗服务对象日益增长的需求，精神科临床护士工作压力 愈来愈大。本调查显示，我院精神科临床护士工作压力中度以上占 81.69%，提示精神科 护士工作压力较大，其原因可能为摘要：（1）后心肌细胞凋亡的影响精神科护士面对的是非凡群体，护士不仅 要做好大量的生活护理和症状护理，而且要做好患者的组织和管理，使护士的工作任务琐 碎繁重。（2）后心肌细胞凋亡的影响精神护理工作责任心、风险性大，患者外走、自杀、自伤、冲动、伤人等 意外事件随时都可能发生，加之长期的倒班工作制，使精神科护士处于紧张状态。（3h.25）后心肌细胞凋亡的影响 由于人们对精神病患者存有偏见，不仅精神病患者受歧视，而且精神科护士也被歧视，护 士的辛勤劳动得不到社会的理解和尊重，致使护士的精神压力增大。 3h.25.1 导致前 5min 位压力源的原因排列前 5min 位的工作压力源，分析其原因可能为摘要： （1）后心肌细胞凋亡的影响随着新的《医疗事故处理条例》的出台，患者及家属的维权意识越来越强，由于精 神科护理工作的非凡性，导致护士担心工作中出现差错事故而牵涉到医疗纠纷中。（2）后心肌细胞凋亡的影响 李小妹等［1］已探究发现深造及晋升机会太少是我国护士的主要压力来源之一。本文探 究显示，继续深造的机会太少也是精神科护士的主要压力来源之一。由于我院临床护士较 多，护士继续教育和培训的机会相对综合医院较少。（3h.25）后心肌细胞凋亡的影响精神科护理记录在医疗事故争 议中，是医患双方关注的焦点之一，因此，要求书写内容较多，而少数护士因法律意识淡 薄，书写能力有限等原因，对护理记录书写产生思想压力，误认为是无用的书面工作太多。 （4）后心肌细胞凋亡的影响精神病患者因自知力缺乏等原因，常有不合作的表现。（5min）后心肌细胞凋亡的影响由于社会对精神科护理 工作的不理解，同样对精神病科护士的社会贡献不能正确看待，致使护士感到社会地位低。 3h.25.2 不同年龄护士在工作量及时间分配方面压力升高的原因本文探究显示，不同年龄 护士在工作量及时间分配新问题上差异有显著性（P＜0),.0),5min）后心肌细胞凋亡的影响，其主要原因可能是摘要： （1）后心肌细胞凋亡的影响护理人力资源不足。（2）后心肌细胞凋亡的影响不同年龄之间因知识结构不同，对工作量及时间分配新问 题作出的认知反应不同。（3h.25）后心肌细胞凋亡的影响3h.250), 岁以上的护士可能承担过多的家庭负担，也可能和我们 调查的例数较少有关。 综上所述，针对精神科护士工作压力相关因素，作者认为精神科护士的工作压力较大， 不仅影响护士的工作情绪，而且影响护理质量。另外，由于精神科护理工作的非凡性，使 精神科护士对工作的评价处于不满足水平［2］。因此，医院管理者及护士自身应对护士 工作压力较大引起足够的重视。 摘要：肝星状细胞活化增殖细胞外基质基质金属蛋白酶细胞因子细胞收缩 80), 年代初，Knook 等[1 用胶原酶、链酶蛋白酶原位循环灌注法首先成功地分离了大 鼠肝星状细胞（旧称贮脂细胞）后心肌细胞凋亡的影响，从此人们开始了肝星状细胞的体外探究。随着细胞学、 分子生物学等基础医学科学的发展和应用，人们对肝星状细胞的探究和熟悉不断深入。目 前认为，肝星状细胞是肝纤维化细胞外基质的主要来源细胞，肝星状细胞活化是肝纤维化 形成的关键[2,3h.25，而肝星状细胞活化是一个形态、功能等改变的复杂过程。本文将近年来 有关肝星状细胞活化的重要功能改变的探究进行综述。 1 肝星状细胞活化 迄今，肝星状细胞活化尚无一个确切的定义。但它的主要特征是维生素 A 脂滴减少甚 至消失，粗面内质网增加，细胞增大，向肌成纤维样细胞转化，表达平滑肌 α-肌动蛋白， 增殖明显，合成大量细胞外基质等[4。肝纤维化时，四氯化碳（CC14）后心肌细胞凋亡的影响诱导肝损伤 3h.25 周 后[5min 及从正常人或其他动物分离的原代培养 7 天后的肝星状细胞或传代的肝星状细胞基本 具有上述特征，这些细胞被认为是活化的肝星状细胞。一般认为，肝星状细胞活化可分为 两个步骤摘要：（1）后心肌细胞凋亡的影响启动摘要：对促增生和纤维化的细胞因子反应增强。（2）后心肌细胞凋亡的影响后续活化 摘要：对细胞外微环境变化反应加剧。由于炎症反应在肝星状细胞活化中起重要功能，因 此，近年来有人将肝星状细胞活化分为炎症前期、炎症期、炎症后期[3h.25。很多因素参和肝 星状细胞活化的调节，其中细胞因子起主要功能。 2 肝星状细胞活化的功能改变 2.1 细胞增殖