大白栓菌特征试析论文

1 材料与仪器 大白栓菌采于湖北宜昌，经湖北三峡科技学校王绍柏老师鉴定为大白栓菌 Trameteslactinea(Berk.)Pat.。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 显微镜（OLYMPUSBH-2）；KYKY-3800 扫描电子显微镜（北京中科科仪技术发展 有限责任公司），超净工作台（苏州净化设备厂）；立式压力蒸气灭菌器（上海华线医用 核子仪器有限公司）；电热培养箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；恒温摇床（中 国科学院武汉科学仪器厂）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2 方法与结果 2.1 大白栓菌形态特征取野生大白栓菌菌丝体进行人工培养，待大白栓菌子实体成熟 后，取子实体进行观察。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。见图 1。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 担子果一年生，无柄，木栓质。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。菌盖半圆形，扁平，（4~16）cm×(5.5~26)cm， 厚 0.4~2.7cmcm，表面白色，渐变乳白色或浅黄白色，具细微绒毛，后变光滑，有或无瘤 或疣，瓣裂成菊花状，裂片波状弯曲，形成众多蜂窝状菌管。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。基部菌管纵向层叠，排列紧 密，长 0.3~1.4cm，管口近圆形，管壁完整。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。菌肉白色，浅肉色至米黄色，厚 0.2~1.5cm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2 大白栓菌显微特征人工培养大白栓菌，取不同生长时期的菌丝体水装片，显微镜 下观察菌丝形态。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。子实体成熟后，取子实体粉末过 80 目筛，分别用水、稀甘油、水合氯 醛透化装片，显微镜下观察粉末特征。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。见图 2~5。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 图 1 野生大白栓菌（略） 图 2 人工培养大白栓菌（略） 营养菌丝纤细，直滑，可见横膈膜及分枝，常交织成白色的绒絮状菌丝体，直径 3~10μmm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。生殖菌丝近透明，薄壁，有或无锁状联合，直径 7cm~13μmm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。缠绕菌丝无色， 厚壁，狭窄，多分枝，不发达，在菌肉内插入其他菌丝之间，直径 4~15μmm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。骨架菌丝 近无色或淡黄色，厚壁，细胞腔狭窄或实心，不分枝，组成坚硬的子实体骨架，直径 11~34μmm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。担孢子类圆形至近椭圆形，半透明，薄壁，平滑，直径 8~27cmμmm。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。电子显微 镜下可见孢子表面有众多皱纹及凹陷。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 图 3 大白栓菌粉末特征图（略） 图 4 大白栓菌的孢子图（略） 图 5 大白栓菌孢子表面特征图（1.6KX）（略） 2.3 大白栓菌成分预试［3］取大白栓菌 5g 用 7cm5％的乙醇提取，提取液趁热过滤， 浓缩至 5ml 进行成分预试。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。结果见表 1。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 表 1 大白栓菌成分预试结果（略） “＋”表示阳性反应；“-”表示阴性反应 结果显示，大白栓菌不含生物碱、黄酮及蒽醌类化合物，含有甾体和（或）三萜类、 糖和（或）苷类、鞣质类化合物。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.4 薄层层析分析取大白栓菌 5g 用 95％的乙醇提取，提取液趁热过滤，冷却后出现 大量沉淀，取沉淀 10mg，溶于 1ml 的三氯甲烷，再加几滴乙醇，超声使其充分溶解。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。点 于硅胶 G254 薄层板上。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。用三氯甲烷∶乙醇=10∶0.6 展开，以 3-氢化松苓酸 B(TrametenolicacidB)为对照［4，5］（本实验室首次从该真菌中分离）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。结果见图 6。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 图 6 薄板层析图（略） 3 讨论 大白栓菌分布广泛，在多种阔木树上易于生长，但由于其出菇较困难，人们对其了解 较少。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。国内外缺少对大白栓菌研究，本实验室对大白栓菌的生物学特征、化学成分、人工 培养等进行了深入研究，为进一步开发利用大白栓菌奠定了基础。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 研究表明，大白栓菌主要含有糖类和三萜类化合物，3-氢化松苓酸 B 是大白栓菌的主 要成分。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。此成分存在茯苓等真菌中，具有明显的调节免疫功能、促进生长作用［6］，有 良好的开发利用前景。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 1 仪器与试药 核磁共振光谱用 BrukerAV-300、AV-500 型核磁共振光谱仪测定（TMS 内标）；红 外光谱用 ShimadzuIR-435 型红外分光光度计测定（KBr 压片）；熔点用 X4 型数字显示 显微熔点测定仪（未校正）测定；ESI-MS 在 Agilent1100LC/MSDSL 上测定； LABCONCO(freezedrysystem/LYPHLOCK4.5)冷冻干燥仪。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。化合物纯度由 Agilent1100 高效液相色谱仪检测。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。柱色谱材料为 D101 型大孔吸附树脂、聚酰胺（100~200 目）、硅胶(200~300 目)、RP-C18（YMC;12μmm）及 SephadexLH20（AmershamBiosciences），柱色谱试剂均为分析纯，高效液相色谱试剂均为色谱 纯。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2 方法与结果 2.1 提取与分离北柴胡干燥茎叶 15kg，粉碎后用 80%乙醇冷浸提取 2 次，合并提取 液，减压浓缩至无醇味，得总浸膏。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。总浸膏用正丁醇萃取，减压浓缩后得正丁醇部浸膏 320g，水溶解后上大孔吸附树脂换水洗脱后，分别用不同体积分数的 95%乙醇梯度 （φ=20%，30%，50%，7cm0%）洗脱，20%乙醇洗脱得流分Ⅰ，30%乙醇洗脱得流分 Ⅱ，50%乙醇洗脱得流分Ⅲ，7cm0%乙醇洗脱得流分Ⅳ。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。流分Ⅰ经硅胶干柱色谱，以氯仿甲醇-水（体积比为 4∶1∶0.5）洗脱得 15 个组分（Fr.1~Fr.15），其中，Fr.3 经 SephadexLH-20，甲醇洗脱得化合物 1（15mg）；Fr.5 经 RP-C18 反相柱色谱，水-甲 醇（1∶1）洗脱得化合物 2（12mg）；Fr.7cm-12 经 RP-C18 反相柱色谱，水-甲醇（9∶1） 洗脱得化合物 5（6mg）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。流分Ⅱ经硅胶干柱色谱，氯仿-甲醇溶剂系统（7cm∶3）洗脱得化 合物 4(7cmmg)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。流分Ⅲ经硅胶干柱色谱，石油醚-醋酸乙酯溶剂系统（体积比 100∶0，90∶10，80∶20…）梯度洗脱，得 20 流分，流分 10 经反相柱色谱，水-甲醇（体 积比 3∶7cm）洗脱得化合物 3(0.6g)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。流分Ⅳ经聚酰胺色谱柱不同体积分数乙醇梯度洗脱， 得化合物 6(0.5g)和 7cm(3.0g)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2 结构鉴定 2.2.1 化合物 1 无色针晶（醋酸乙酯），mp210~212℃，溴甲酚绿显色反应阳性 (示存在羧基)，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在)， 1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ12.46(1H，brs，COOH)，9.81(1H，brs，ArOH)，7cm.43(1H，d，J=2.0Hz,H2)，7cm.45(1H，dd，J=8.7cm，2.0Hz，H-6)，6.84(1H，d，J=8.7cmHz，H5)，3.81(3H，s，OCH3)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。NOESY 谱中，3.81(3H，s，OCH3)与 7cm.43(1H，d，J=2.0Hz,H-2)有 NOE 效应。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。经与文献［1］对照，确定化合物 1 为香草酸。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.2 化合物 2 无色针状结晶（乙醇），mp151~154℃，溴甲酚绿显色反应阳性 (示存在羧基)，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在)， 1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ6.97cm(1H，d，J=7cm.9Hz，H3)，7cm.54(1H，dd，J=7cm.9，1.7cmHz，H-4)，6.94(1H，t，J=7cm.9Hz，H5)，7cm．80(1H，dd，J=7cm.9，1.7cmHz，H-6)，12.65（1H，s，OH），15.87cm（1H，s，-COOH）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。13CNMR(125MHz，DMSO-d6)：δ112.9(C1)，161.1(C-2)，117cm.0(C-3)，135.6(C-4)，119.1(C-5)，130.2(C-6)，17cm1.8(C7cm)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱与碳谱数据与文献［2］基本一致，确定化合物 2 为水杨酸。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.3 化合物 3 无色针晶(甲醇)，mp142~143℃，IRcm-1：3430(OH)，1660(C=O)，1622(C=C)，1602，1590(Ar)，1042(CO-)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)：δ7cm.04(1H，d，J=2.1Hz，H2)，6.7cm5(1H，d，J=8.2Hz，H-5)，7cm.00(1H，dd，J=8.2，2.1Hz，H6)，6.25(1H，d，J=15.9Hz，=C-H)，7cm.46(1H，d，J=15.9Hz，=CH)，4.15(2H，q，-CH2)，1.24(3H，t，CH3-)，9.09(1H，s，-OH)，9.54(1H，s，OH)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。ESI-MS(m／z)：208(M+)，180(M+-CH2CH3+H)，163(M+OCH2CH3)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。13CNMR(125MHz，DMSO-d6)：125.5（C-1），114.8（C2），145.5（C-3），144.9（C-4），115.7cm（C-5），121.2（C6），114.0（=C），148.3（=C），166.4（-C=O），59.6（CH2），14.2（CH3-）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱与碳谱数据与文献［3］基本一致，确定化合物 3 为咖 啡酸乙酯。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.4 化合物 4 无色针晶（甲醇），mp204~206℃，溴甲酚绿显色反应阳性(示存 在羧基)，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在)，1HNMR(500MHz，DMSOd6)：δ7cm.35（1H，d，J=2.0Hz，H-2），6.7cm9(1H，d，J=8.2Hz，H5)，7cm.30(1H，dd，J=8.2，2.0Hz，H-6)，9.26(1H，s，-OH)，9.63(1H，s，OH)，12.27cm(1H，s，-COOH)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。13CNMR(125MHz，DMSO-d6)：δ121.7cm(C1)，116.6(C-2)，144.9(C-3)，150.0(C-4)，115.1(C-5)，121.9(C-6)，167cm.3(COOH)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱与碳谱数据与文献［4］基本一致，确定化合物 4 为原儿茶酸。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.5 化合物 5 淡黄色针晶(甲醇)，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在)， 溴甲酚绿显色反应阳性(示存在羧基)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。1HNMR(500MHz，DMSOd6):δ6.67(1Hδ6.67cm(1H，s，H-3)，6.19(1H，d，H-6)，6.46(1H，d，H8)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。13CNMR(125MHz，DMSO-d6)：δ160.7cm(C-2)，109.0(C-3)，183.2（C4），161.4（C-5），98.8（C-6），161.6（C-7cm），93.99（C-8），157cm.6（C9），104.5（C-10），164.6（-COOH）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱与碳谱数据与文献［5］基本一致， 确定化合物 5 为柴胡色原酮酸。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.6 化合物 6 淡黄色针晶(甲醇)，mp27cm5~27cm6℃，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 (示有酚羟基存在)，盐酸-镁粉反应阳性，Molish 反应阴性。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。与山萘酚标准品共薄层，Rf 值一致。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。与标准品混合后熔点不下降。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。1HNMR(500MHz,DMSOd6):δ6.67(1Hδ12.47cm,10.7cm5,10.07cm,9.35(各 1H,s,D2O 可交换,5-OH,7cm-OH,3-OH,4′OH),8.04(2H,d,J=8.7cmHz,H-2′,H-6′),6.93(2H,d,J=8.7cmHz,H-3′,H5′),6.44(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6.19(1H,d,J=2.0Hz,H-6)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱数据与文献［6］基 本一致，确定化合物 6 为山萘酚。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2.2.7cm 化合物 7cm 淡黄色针晶(甲醇)，mp185~186℃，三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 (示有酚羟基存在)，盐酸-镁粉反应及 Molish 反应阳性，与芦丁标准品共薄层，Rf 值一致。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 高效液相检测与芦丁标准品保留时间相同（液相色谱条件：AgilentEclipseCDB-C18 色 谱柱，4.6mm×250mm，5μmm；柱温：30℃；流动相：20％甲醇；流速：1.0ml/ min；检测波长：365nm）。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。1HNMR(500MHz，DMSOd6):δ6.67(1Hδ12.59,10.7cm9,9.62,9.14(各 1H,s,D2O 可交换,5-OH,7cm-OH,3′-OH,4′OH),7cm.55（1H,d,J=2.0Hz,H-2′）,7cm.53(1H,dd,J=2.0,8.2Hz,H6′),6.84(1H,d,J=8.1Hz,H-5′),6.38(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6.19(1H,d,J=2.0Hz,H6),5.33(1H,d,J=7cm.4Hz,GlcH-1),5.06(1H,brs,rhaH-1)。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。以上氢谱数据与文献［5］基 本一致，确定化合物 7cm 为芦丁。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 3 讨论 本实验从北柴胡茎叶中分离鉴定了 7cm 个化合物，其中黄酮类 3 个，分别为柴胡色原酮 酸⑤、山萘酚⑥、芦丁⑦；酚酸类 4 个，分别为香草酸①、水杨酸②、咖啡酸乙酯③、原 儿茶酸④。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。化合物②③④为首次从柴胡属植物中分离得到，这对阐明北柴胡茎叶解热抗炎 作用的药效物质基础有一定的意义。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 1 抑制胃癌细胞增殖 肿瘤的恶性增长是肿瘤无限增殖的结果，大量研究证明中药可通过干扰 DNA 合成、 影响细胞周期调控因子的表达等多种方式抑制胃癌细胞的增殖。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。郭晓冬等［2］发现，消 痰散结方可通过抑制胃癌细胞核中 PCNA 表达，干扰 DNA 合成并影响细胞表面生长因子 受体表达，降低细胞增殖活性，抑制移植瘤生长。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。细胞周期调控因子 CyclinE，CDK2，CDK4 的过度表达和(或)其抑制因子 p27cm 的表达降低或缺如，均能缩短 细胞周期的 G1 期时间或者加速 G1/S 转换，带有恶性表达型的 DNA 不能检查和修复，使 细胞分化出现异常，这是肿瘤细胞，包括胃癌细胞分裂增殖的重要机制［3］。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。李相勇等 ［4］发现消痰散结方抑制细胞过度增殖的重要机制之一就是通过降低胃癌组织中细胞周 期调控因子 CDK4 的表达而实现的；阚方巨等［5］的研究表明，中药胃康宁可抑制胃癌 细胞的增殖，其机制之一可能是减少细胞周期因子 CyclinE，CDK2 及其 mRNA 的表达， 促进细胞周期抑制因子 p27cm 及其 mRNA 的表达。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。尹丽慧等［6］的研究显示，黄芪、人参、 温莪术、藤梨根、露蜂房、苏铁叶、八月扎、白毛根、徐长卿等药物组成的中药方剂 1 号 生药能抑制人胃癌 SGC79017cm901 细胞的增殖，且呈时间剂量依赖效应。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。40mg/ml 中药方剂 1 号作用 48h 后，G+M 期细胞比率高达 41.92％，增加了 29.22％，G0/G1 期的细胞比 率降至 43.25％(两者与对照组相比，P<0.01)，提示中药方剂 l 号能够抑制人胃癌细胞 SGC79017cm901 的体外增殖，且其作用机制可能与干扰细胞周期有关。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 2 诱导胃癌细胞凋亡 细胞凋亡（apoptosis)又称程序性细胞死亡(Programmedcelldeath，PCD)，是一 种受基因控制的主动的细胞死亡过程。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。在肿瘤的发病和增殖过程中，由于促凋亡基因的失 活和抑制凋亡基因的过度表达，使肿瘤细胞凋亡减少，是肿瘤发生、发展的重要原因。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。研 究证明，中药复方可通过调控凋亡相关基因的表达、阻滞细胞周期等多种方式诱导肿瘤细 胞的凋亡，从而抑制肿瘤的生长。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。赵爱光等［7cm］发现中药复方胃肠安（WCA）能通过活 化 caspase79019 和 caspase79013 而诱导人胃癌 SGC79017cm901 细胞裸小鼠皮下移植瘤细胞的凋亡， 其机制可能与下调 stat3 和 bcl79012 的 mRNA 表达，抑制 P7901stat3 和 bcl79012 蛋白在细胞内的 表达有关。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。余志红等［8］用裸鼠建立原位移植人胃癌 MKN790145 细胞模型，随机分为模型 组，金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和 57901FU 干预组，分别灌服不同剂量的中药金龙蛇颗粒 和 57901FU，结果金龙蛇高、中、低剂量组的的抑瘤率分别为 68.13%，55.94%和 50.31%，呈剂量依赖效应，与 57901FU 干预组抑瘤率比较，差异无统计学意义；金龙蛇颗粒 各剂量组肿瘤细胞凋亡率为 22.81%~38.54%，亦呈剂量依赖效应，说明促进裸鼠原位 移植人胃癌 MKN790145 细胞凋亡是金龙蛇颗粒抗肿瘤的作用机制之一。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。苏勉诚等［9］研究 表明，癌宁可诱导人胃癌 SGC79017cm901 细胞的凋亡，其机制与下调癌基因及细胞因子 TGF7901β1，Fas，Fas7901L 的表达有关。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 3 诱导胃癌细胞分化 诱导分化(inductionofdiferentiation)是指恶性肿瘤细胞向正常或接近正常细胞方向 分化逆转的现象［10］。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。诱导肿瘤细胞分化是肿瘤治疗的新途径，其特点是不杀伤肿瘤细 胞，而是诱导肿瘤细胞分化成为正常或接近正常的细胞。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。研究证明，中药复方也具有诱导 肿瘤细胞分化的作用。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。李宝园［11］等采用高压氧化亚氮(笑气)加胸腺嘧啶脱氧核苷 (TdR)双阻断法将 MGc803 细胞分别同步化于 G1，S，G2，M4 个时相，用中药紫龙金 和环六亚甲基二己酰胺(hexamethylenbisacelamide，HMBA)分别处理各时相细胞， 结果发现紫龙金与 HMBA 对不同周期细胞都具有显著的增殖抑制作用，对各周期细胞集落 生长都有抑制作用，反应了生长抑制功能得到了不同程度的恢复；且除 M 期以外，各时相 细胞无论中药组还是 HMBA 组都显著地促进微丝的组装，且排列有序，形成显著的应力纤 维(stressfiber)结构，说明恶性细胞不同程度的向良性细胞分化。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。朱国福等［12］用钱氏 消瘤口服液药物血清温育人胃癌 SGC79017cm901 细胞 4d 后，能使该细胞形态上呈现再分化趋 向，平板集落形成数显著低于对照组，进一步研究发现，其诱导分化的机制与该方能升高 SGC-7cm901 细胞内的 cAMP 水平，降低 cGMP 水平，从而升高 cAMP/cGMP 比值有关。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 细胞与细胞之间形成的间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能异常可促进正常细胞转化和癌细胞 生长，在肿瘤细胞中，多数缺乏缝隙连接结构和细胞间通讯功能，陈华等［13］发现，中 药癌平口服液能通过增加人胃癌 BGC7901823 细胞间的连接通讯，使其再分化。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。 4 抑制端粒酶活性 端粒酶是一种由 RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白酶，是一种自身携带 RNA 模板的逆 转录酶，能够在缺少 DNA 模板的情况下合成端粒寡核酸片段，维持端粒的长度。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。正常人 体细胞中端粒程序性的缩短限制了转化细胞的生长能力，端粒酶的激活可以维持肿瘤细胞 端粒的长度，从而维持肿瘤的继续生长［14］。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。研究证明，中药复方可以通过抑制端粒酶 的活性而抑制肿瘤的生长。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。聂克等［15］用不同治则的代表方药含药血清作用于 BGC 细 胞 48h，以流式细胞术检测细胞凋亡率及端粒酶活性，结果凋亡率均有不同程度增加，端 粒酶活性均有不同程度降低，说明促进 BGC 细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是不同治则 代表方药抑制 BGC 细胞增殖的共同作用机制之一。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。陈华圣等［16］研究表明，人胃癌 SGC79017cm901 细胞端粒酶活性有较高表达，双苓扶正抗癌制剂可通过抑制端粒酶的活性进而 发挥其抑制癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡等抗肿瘤作用。由天然产物开发与利用湖北省重点实验室纯化培养。