2019执业药师考试西药学备考考点资料:酶的纯化
酶是蛋白质,因此凡用于蛋白质的纯化手段均适用于酶的纯化,如盐析法、聚乙二醇沉淀法、有机浴剂分级沉淀法、等电点法、选择性沉淀法、各种柱层析法(吸附层析、离子交换层析、凝胶过滤)、各种电泳法及亲和层析等。不同之处是酶的纯化过程尚需选用迅速简便的活力测定方法,以追踪酶的去向。
在选用酶的活力测定方法时,分析方法的迅速要比其精确度更为重要。如宁可要一个需时5min,准确度为5%的方法;也不要一个需时30min,准确度为0.5%的方法。在建立活力测定法之后,再根据各单元纯化步骤及活力分布情况用列表形式表达,表的内容包括:操作步骤、总体积、酶浓度(每毫升酶活力)、总活力、蛋白质浓度mg/ml)、比活力(即纯度、酶活力单位/毫克蛋白)、产率%(每步总活力除以第一步的总活力)和纯化倍数(每步比活力除以第一步比活力)。
在选用酶的活力测定方法时,分析方法的迅速要比其精确度更为重要。如宁可要一个需时5min,准确度为5%的方法;也不要一个需时30min,准确度为0.5%的方法。在建立活力测定法之后,再根据各单元纯化步骤及活力分布情况用列表形式表达,表的内容包括:操作步骤、总体积、酶浓度(每毫升酶活力)、总活力、蛋白质浓度mg/ml)、比活力(即纯度、酶活力单位/毫克蛋白)、产率%(每步总活力除以第一步的总活力)和纯化倍数(每步比活力除以第一步比活力)。
编辑推荐:
下载Word文档
温馨提示:因考试政策、内容不断变化与调整,长理培训网站提供的以上信息仅供参考,如有异议,请考生以权威部门公布的内容为准! (责任编辑:长理培训)
点击加载更多评论>>