2019口腔执业医师考试备考考点资料:血清学诊断
(一)酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)及免疫荧光试验(IF)
ELISA、RIA及IF均为用于检测感染者血清中特异性抗体或抗原的方法,均为应用标记的抗原检测血清中抗异性抗体,或应用标记的抗体检测血清中特异性抗原。例如,以ELISA或RIA法检测A族链球菌、淋病奈瑟氏菌及肺炎链球菌抗原,以IF法检测志贺氏菌、霍乱弧菌感染等,均已应用于临床诊断。
(二)蛋白印迹试验(Western blot, WB)
蛋白印迹试验(WB)是在ELISA应用原理基础上发展的一项新技术,用于检测微生物的特异性蛋白抗原或患者相对应的蛋白抗体的实验室诊断方法。其原理和操作步骤是依据微生物蛋白抗原分子量的不同,可由SDS-PAGE电泳分开多个蛋白条带,经转移电泳装置转移到硝酸纤维素膜上,加入抗体(特异的抗血清)使之特异性地与其抗原决定簇结合,再加入酶标记或同位素标记的第二抗体,经与抗原抗体结合物作用后,后加入酶底物或经胶片曝光,显示特异显色蛋白条带或曝光条带并判断结果。若用此试验检测患者血清特异性抗体,可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特异性抗体,再结合酶标记抗人抗体并观察结果。蛋白印迹分析可作为ELISA检测结果的确证试验,在AIDS临床检测中为常用。
ELISA、RIA及IF均为用于检测感染者血清中特异性抗体或抗原的方法,均为应用标记的抗原检测血清中抗异性抗体,或应用标记的抗体检测血清中特异性抗原。例如,以ELISA或RIA法检测A族链球菌、淋病奈瑟氏菌及肺炎链球菌抗原,以IF法检测志贺氏菌、霍乱弧菌感染等,均已应用于临床诊断。
(二)蛋白印迹试验(Western blot, WB)
蛋白印迹试验(WB)是在ELISA应用原理基础上发展的一项新技术,用于检测微生物的特异性蛋白抗原或患者相对应的蛋白抗体的实验室诊断方法。其原理和操作步骤是依据微生物蛋白抗原分子量的不同,可由SDS-PAGE电泳分开多个蛋白条带,经转移电泳装置转移到硝酸纤维素膜上,加入抗体(特异的抗血清)使之特异性地与其抗原决定簇结合,再加入酶标记或同位素标记的第二抗体,经与抗原抗体结合物作用后,后加入酶底物或经胶片曝光,显示特异显色蛋白条带或曝光条带并判断结果。若用此试验检测患者血清特异性抗体,可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特异性抗体,再结合酶标记抗人抗体并观察结果。蛋白印迹分析可作为ELISA检测结果的确证试验,在AIDS临床检测中为常用。
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