实验室常用抗凝剂的选择有以下几种,也是事业单位考试中最常出现的几个抗凝剂。
(一)枸橼酸盐
主要为枸橼酸三钠,能与血液中钙离子结合形成螯合物,从而阻止血液凝固。枸橼酸钠与血液的抗凝比例是1∶9或者1∶4,一般用于凝血和红细胞沉降率的检查。因其毒性小,也是输血保养液的成分之一。
(二)肝素
肝素是一种生理性抗凝剂,广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖,是分散物质,平均分子量为15000,带有较多负电荷。其抗凝机制较为复杂,主要是加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并且有阻止血小板聚集等多种抗凝作用。每毫升血液抗凝需要肝素(15±2.5)IU,多为肝素的钠盐或钾盐 。它不影响血细胞体积,极少产生溶血,常用于血细胞比容、血pH、血气分析及其他生化测定,是红细胞渗透脆性试验理想的抗凝剂。每管加含肝素1g/L的溶液1mL,在60℃以下烘干备用,可使5~10 mL血液不凝。肝素抗凝血不适于血涂片检查。因其在瑞氏染色时会出现背景偏蓝,不适全血液学一般检查,也不适合凝血因子的检查。
(三)乙二胺四乙酸盐(EDTA)
常用的有钠盐和钾盐,能与血液中的钙离子结合形成螯合物,使钙离子失去凝血作用,从而达到抗凝目的。对血细胞形态和血小板计数影响很小,适用于多项血液学检查,尤其是血小板计数,但钠盐溶解度低于钾盐,EDTA-K2最适用于全血细胞分析及血细胞比容测定,室温下6h,红细胞体积不改变。国际血液学标准化委员会(ICSH)建议血细胞计数使用EDTA-K2作为抗凝剂,用量为EDTA-K2-2H2O 1.5~2.2mg/ml血液。EDTA可抑制血小板聚集,不适用于凝血检查及血小板功能试验。
(四)草酸盐
常用的有草酸钠、草酸钾和草酸铵,草酸根与血液的钙离子形成草酸钙沉淀使钙离子失去凝血作用而阻止凝血。此种抗凝剂溶解度大,抗凝作用强。2mg可使1mL血不凝。因草酸盐与血液中钙离子结合生成草酸钙沉淀,可使血细胞形态发生变化,故不宜制作血涂片检查。同时草酸盐也影响血液中某些成分的生物活性,故血液学中很少应用。
双草酸盐抗凝剂是以草酸钾和草酸铵按一定比例(通常4∶6)混合而成,适于血细胞比容测定。
【例题】国际血液学标准化委员会(ICSH)建议血细胞计数使用的抗凝剂是:
A.肝素 B.EDTA-2K
C.草酸盐 D.枸橼酸钠
【答案】B。
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