2019湖南医疗-检验学重点考点——血清蛋白电泳分析原理
血清蛋白电泳分析原理
血清中各种蛋白质的等电点不同,在同一pH电场中所带电荷量也不同,加之蛋白质的分子量亦不相同,所以在同一电场中电泳迁移率就有差异。用醋酸纤维素薄膜做载体,用pH8.6的缓冲溶液电泳,血浆蛋白带负电荷,按其泳动速度可将血清(浆)蛋白质分成分为五条区带,从正极到负极依次为白蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白,白蛋白跑得最快,含量高,染色颜色最深,γ-球蛋白跑得最慢,α1区带染色最浅。
染色和光密度扫描可计算出各区带蛋白质占总蛋白的百分含量,是了解血清(浆)蛋白质全貌的有价值的方法。
利用血清电泳测定各组分的含量,通常采用各区带百分浓度与血清总蛋白浓度相乘,以g/L表示。
清蛋白:35-52g/L(57-68%)
α1-球蛋白:1.0-4.0g/L(1.0-5.7%)
α2-球蛋白:4.0-8.0g/L(4.9-11.2%)
β-球蛋白:5.0-10.0g/L(7-13%)
γ-球蛋白:6.0-13.0g/L(9.8-18.2%)
在琼脂糖凝胶电泳中常可分出13个区带,采用特殊染色方法可区别出脂蛋白。聚丙烯酰胺凝胶电泳在适当条件下可以分出30分多个区带。
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