2019湖南医疗卫生考试-检验学常备考点精析——结核分枝杆菌检验

一、结核分枝杆菌——生物学特性

1、形态与结构

形态：细长或略带弯曲;培养基中可呈球状或丝状;陈旧培养物或干酪化的淋巴结中可见到分枝状排列。显微镜下常堆积成团、成束，排列无序，也有呈链状、索状。

特殊结构：无鞭毛和芽胞，部分有荚膜。

2、培养特性

营养要求：较高。

气体环境：专性需氧。

温度环境：35～40℃，最适35～37℃;pH6.5～6.8。

兼性胞内寄生菌。

少量铁质可使细菌产生分枝杆菌生长素，促进生长。

3、菌落特点

生长缓慢，最快的分裂速度为18h一代。

固体培养基(罗氏培养基)：需2～6周才能长出菌落。菌落呈干燥颗粒状，不透明，乳白色或米黄色，表面呈皱纹状，形似菜花。

液体培养基：生长较快，形成菌膜。有毒力菌株在液体培养基中可呈索状生长。

选择培养基：常用选择剂有结晶紫、孔雀绿、青霉素、萘啶酸、林可霉素、多黏菌素B等。

二、结核分枝杆菌——微生物检验及鉴定

标本采集：结核分枝杆菌作分离培养，必须使用灭菌容器。应停药1～2d后再采集标本。

形态学检查

1)直接涂片：齐-尼抗酸染色，找抗酸菌。

原理：根据结核分枝杆菌细胞壁特点

方法：初染(石炭酸复红)→固定(加热)→脱色(5%盐酸酒精)→复染(碱性美蓝)

结果：革兰氏阳性杆菌。红色——抗酸细菌 蓝色——非抗酸细菌

2)荧光显微镜检查法：金胺“O”染色，在荧光显微镜下分枝杆菌可发出橘黄色荧光。

分离培养：人工、半自动、自动;

生化试验(鉴定)

	糖类 发酵 试验	触酶 试验	耐热触酶试验	聚山梨酯-80水解试验	耐热磷酸酶试验	尿素 水解 试验	中性试验
结核分枝杆菌	-	+	-	-	-	+	+

三、结核分枝杆菌——致病性及临床意义

1、致病物质：荚膜、脂质、蛋白质。不产生内毒素和外毒素。

2、所致疾病：

引起多种组织器官的结核病其中以通过呼吸道引起的肺结核最多见。肺外感染可发生在脑、肾、肠及腹膜等处。

3、结核分枝杆菌药敏试验的药物主要包括：利福平、乙胺丁醇、异烟肼等。