医学检验专业:血红蛋白的测定方法及原理、参考值、临床意义
(一)测定方法及原理
1.氰化高铁血红蛋白(HiCN)比色法:血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化为Hi,再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物氰化高铁血红蛋白。HiCN最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。HiCN在540nm处的吸光度与溶液中的浓度成正比,根据测得吸光度可求得待测标本的血红蛋白浓度。此法具有操作简单、显色快、结果稳定可靠等优点,为国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的国际标准参考方法。但氰化钾有剧毒,需要严格管理。
2.十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)测定法:血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种血红蛋白均可与低浓度SDS作用,生成SDS-Hb棕红色化合物,其吸收峰为538nm,波谷为500nm。本法具有操作简单、显色稳定、试剂无毒、结果准确、重复性好的优点。
3.碱羟血红蛋白(AHD575)测定法:检出波长为575nm,试剂不含毒性,呈色稳定,准确性与精确性较高。但不便于自动检测,HbF不能转化。血液分析仪和血红蛋白分析仪多采用540nm左右范围的滤光板,该法仪器使用受限。
4.叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法:最大吸收峰为542nm,显色快而稳定、准确度、精密度较高。但试剂有毒,HbCO转化慢。
5.溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白测定法:溶血性强且不破坏白细胞,适于血液分析仪检测,但精密度和准确度略低。
(二)参考值
成年男性:120~160 g/L;成年女性:110~150 g/L;新生儿:170~200 g/L。
(三)临床意义
一般情况下血红蛋白测定的临床意义与红细胞计数相似,但判断贫血程度优于红细胞计数。某些病理情况下红细胞和血红蛋白减少程度可不一致。如缺铁性贫血的血红蛋白下降比红细胞计数减少更明显;而巨幼细胞性贫血的红细胞计数减少比血红蛋白下降更明显。
【例题】氰化高铁血红蛋白(HiCN)比色法测定时最大吸收峰是:
A.540nm B.560nm
C.500nm D.520nm
【答案】A。
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