2020年军队文职招聘医学检验技术资料整理:葡萄球菌属的检查
1.葡萄球菌属的概念
葡萄球菌属:是一群革兰阳性球菌,常排列成不规则的葡萄串状,分布于自然界,人的体表及与外界相通的腔道中,多不致病。主要致病菌为金黄色葡萄球菌,可定植于正常人体皮肤和鼻咽部,其中医务人员带菌率可高达70%以上,是医院内交叉感染的重要来源。菌落颜色呈黄色、白色或柠檬色。菌落直径为2~3mm,呈β溶血(金葡)或无。
2.葡萄球菌生物学特性
1).微观
形态:球形或椭圆形。
大小:0.5~1.5μm(中等)。
排列:葡萄状。
染色:G+。
特殊结构:无鞭毛和芽胞,除少量菌株外一般不形成荚膜。
2).宏观
营养要求:一般,要求不高。多数菌株耐盐性强。
气体环境:需氧或兼性厌氧。
温度环境:35~37℃;pH7.4。
菌落特征:普通琼脂平板24~48小时培养,形成直径2~3mm、圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐不透明、色素、溶血环。不同的菌体可产生金黄色、白色或柠檬色等不同颜色的脂溶性色素。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄或黄色,菌落周围有明显的透明(β)溶血环。在肉汤培养基中呈均匀浑浊生长。
甘露醇高盐琼脂平板Manitol Salt Agar(MSA),主要用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
3.临床意义
本属细菌以金黄色葡萄球菌致病力最强,可产生多种酶类,如血浆凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸酶、脂酶等,还能产生多种毒素,如葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素-1等。
a.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关
b.耐热核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,且能降解DNA和RNA的酶,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌。
c.脂酶:能分解脂肪和油类,利于葡萄球菌入侵皮肤、皮下组织。
d.葡萄球菌溶素:外毒素,分α、β、γ、δ四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死
e.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞
f.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
g.表皮剥脱毒素:引起烫伤样皮肤综合征,又称剥脱样皮炎。
h.毒性休克综合征毒素(tsst-1):能增强机体对内毒素的敏感性,机体出现多器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征。
4.金黄色葡萄球菌属属内主要鉴别方法:
①菌落性状;金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周围有溶血圈。
②凝固酶试验;吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌试液浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置36±1°C培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。同时做阴阳性对照。
③耐热核酸酶试验;将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,36±1°C培养24小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
④磷酸酶试验;⑤吡咯烷酮芳香基酰胺酶试验(PYR);⑥新生霉素敏感试验;⑦多黏菌素B试验。
表皮葡萄球菌:皮肤正常菌群,是导致血培养污染的常见细菌。已成为医院感染的重要条件致病菌。
腐生葡萄球菌:导致尿路感染的常见病原菌之一
【例题】如果触酶试验阳性、凝固酶阴性,新生霉素敏感,可以初步判断该菌为:
A.金黄色葡萄球菌
B.表皮葡萄球菌
C.腐生葡萄球菌
D.人型葡萄球菌
E.溶血葡萄球菌
【答案】B。解析:葡萄球菌属触酶试验阳性,凝固酶阴性说明该茵不是金黄色葡萄球菌,凝固酶阴性葡萄球菌中以表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌最为常见,表皮葡萄球菌新生霉素敏感,腐生葡萄球菌则耐药,两者可以此相鉴别,故选B。
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