立克次体及检验
● 考点
◆共同特征
◆生物学特性
◆致病性
◆微生物学检验
◆共同特征
◆生物学特性
◆致病性
◆微生物学检验
一、立克次体
一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。
立克次体的共同特征：
①大多是人畜共患病原体，引起人类发热和出血性疾病；
②以节肢动物为传播媒介或储存宿主；
③大小介于一般细胞与病毒之间，革兰染色阴性，呈多形性主要为球杆状；
④除极少数外均专性活细胞内寄生；
⑤对多种抗生素敏感；
⑥菌体内同时含有DNA和RNA；
⑦以二分裂方式进行繁殖。
一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。
立克次体的共同特征：
①大多是人畜共患病原体，引起人类发热和出血性疾病；
②以节肢动物为传播媒介或储存宿主；
③大小介于一般细胞与病毒之间，革兰染色阴性，呈多形性主要为球杆状；
④除极少数外均专性活细胞内寄生；
⑤对多种抗生素敏感；
⑥菌体内同时含有DNA和RNA；
⑦以二分裂方式进行繁殖。
二、生物学性状
1.形态与结构：
◆形似小杆菌，具有程度不同的多形性。无鞭毛或荚膜。
◆G-，不易着色，常用Giemsa、Macchiavello和Giménez法染色，Giemsa染呈紫红色，常显两端浓染，Maechiavello染呈红色，Giménez法染呈红色，背景为绿色。
Macchiavello和Giménez法染色可以鉴别恙虫病立克次体与其他立克次体。在Macchia- vello染色中，恙虫病立克次体呈蓝色，其他立克次体呈红色。Giménez染色，恙虫病立克次体呈暗红色，背景为绿色。
◆与G-菌非常相似，脂类含量比细菌多，细胞壁弹性较大。
各种立克次体在细胞内存在部位有所不同，以此可作初步鉴别。
立克次体 定位
普氏立克次体 胞质中
恙虫病立克次体 胞质近核处
Q热立克次体 胞质的空泡中
斑点热立克次体 胞质外，核内
埃立克体 宿主细胞膜包被的空泡内
2.抗原组成构造：
①群特异性抗原
②种特异性抗原
外斐反应：
斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原（OX19、0X2、OXK抗原）具有共同的耐热性多糖类属抗原，用后者代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，作为人类或动物血清中有关抗体的检查。用于立克次体病的辅助诊断。
3.培养特性：
◆立克次体（除巴通体外）只能在活的真核细胞内生长。
◆常用方法有鸡胚卵黄囊培养、细胞培养。
◆接种豚鼠等动物可用于立克次体的初代分离。
◆汉赛巴通体接种新鲜巧克力平板，在35℃、5%CO2环境中培养2周左右才长出菌落。
1.形态与结构：
◆形似小杆菌，具有程度不同的多形性。无鞭毛或荚膜。
◆G-，不易着色，常用Giemsa、Macchiavello和Giménez法染色，Giemsa染呈紫红色，常显两端浓染，Maechiavello染呈红色，Giménez法染呈红色，背景为绿色。
Macchiavello和Giménez法染色可以鉴别恙虫病立克次体与其他立克次体。在Macchia- vello染色中，恙虫病立克次体呈蓝色，其他立克次体呈红色。Giménez染色，恙虫病立克次体呈暗红色，背景为绿色。
◆与G-菌非常相似，脂类含量比细菌多，细胞壁弹性较大。
各种立克次体在细胞内存在部位有所不同，以此可作初步鉴别。
立克次体 定位
普氏立克次体 胞质中
恙虫病立克次体 胞质近核处
Q热立克次体 胞质的空泡中
斑点热立克次体 胞质外，核内
埃立克体 宿主细胞膜包被的空泡内
2.抗原组成构造：
①群特异性抗原
②种特异性抗原
外斐反应：
斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原（OX19、0X2、OXK抗原）具有共同的耐热性多糖类属抗原，用后者代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，作为人类或动物血清中有关抗体的检查。用于立克次体病的辅助诊断。
3.培养特性：
◆立克次体（除巴通体外）只能在活的真核细胞内生长。
◆常用方法有鸡胚卵黄囊培养、细胞培养。
◆接种豚鼠等动物可用于立克次体的初代分离。
◆汉赛巴通体接种新鲜巧克力平板，在35℃、5%CO2环境中培养2周左右才长出菌落。
三、致病性
◆立克次体病以发热、头痛、皮疹及中枢神经系统症状为其特征。
◆发热多为稽留热，伴剧烈头痛、肌肉痛；可伴恶心、呕吐；皮疹可为充血性皮疹或出血性皮疹；严重时可累及中枢神经系统，出现神志不清、昏迷等症状。
立克次体 传播媒介 所致疾病
立克次体斑疹伤寒群 普氏立克次体 体虱 流行性斑疹伤寒
莫氏立克次体 鼠蚤或鼠虱 地方性斑疹伤寒
恙虫病立克次体 恙螨幼虫 恙虫病
贝纳柯克斯体
（又称Q热立克次体） 蜱或通过接触、呼吸道、消化道等途径 Q热。以出现肺炎和肝炎为其临床特征
汉赛巴通体 猫抓伤、咬伤 杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫抓病
◆立克次体病以发热、头痛、皮疹及中枢神经系统症状为其特征。
◆发热多为稽留热，伴剧烈头痛、肌肉痛；可伴恶心、呕吐；皮疹可为充血性皮疹或出血性皮疹；严重时可累及中枢神经系统，出现神志不清、昏迷等症状。
立克次体 传播媒介 所致疾病
立克次体斑疹伤寒群 普氏立克次体 体虱 流行性斑疹伤寒
莫氏立克次体 鼠蚤或鼠虱 地方性斑疹伤寒
恙虫病立克次体 恙螨幼虫 恙虫病
贝纳柯克斯体
（又称Q热立克次体） 蜱或通过接触、呼吸道、消化道等途径 Q热。以出现肺炎和肝炎为其临床特征
汉赛巴通体 猫抓伤、咬伤 杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫抓病
四、微生物学检验
注：立克次体的传染性较强，实验室工作者应首先接种疫苗，必要时进行药物预防，以防止实验室感染的发生。
（一）标本的采集和处理
1.病人血液：在发病初期或急性期较易检出病原体。
◆病程第一周内并在使用广谱抗生素前采集5～10ml，立即在患者床边接种于动物。
◆血清学检查标本一般采集3份血液标本，分别取自病程早期、病后10～14天及病后21～28天。如患者已使用抗生素治疗，需采集第4份标本。
2.活检或尸检材料
（二）标本直接检查
1.立克次体的染色法：多用于脏器标本的检查。
标本印片、固定后用荧光抗体染色或常规染色镜检。
2.核酸检测：针对特异性抗原基因的序列设计引物，采用PCR技术和核酸探针检测。
（三）立克次体培养法
1.立克次体分离：
斑疹伤寒、斑点热、恙虫病和Q热病原体分离多用动物接种。
汉赛巴通体用人工培养基。
埃立克体用细胞培养。
2.分离株的大量繁殖及保存用鸡胚卵黄囊培养或细胞培养。
（四）血清学试验
研究立克次体的重要方法，也是立克次体病实验诊断和鉴定病原体的重要手段。
病人双份血清的试验结果，有利于立克次体病现症诊断。
1.间接免疫荧光（IFA）试验、ELISA间接法是目前检测标本中特异性抗体的常用方法。
单份血清滴度≥1：128者有现症诊断意义，一般滴度在1：16或以上即为阳性，4倍增长可作为立克次体病的现症诊断。
2.凝集试验：
（1）特异性凝集试验：
微量血凝试验（MA）：滴度1：8以上者为阳性
间接血凝试验（IHA）、乳胶凝集试验（LA）：滴度在1：50以上有诊断价值。
（2）非特异性凝集试验：
外斐试验常用于立克次体属的三个生物型的诊断，缺乏敏感性和特异性。
血清滴度达1：160即为阳性，病程中双份或多份血清试验，至少效价有4倍增长才有诊断意义。
斑疹伤寒立克次体
（一）生物学特性
1.形态与结构
比细菌小，呈多形性；在感染细胞内大多聚集成团分布在胞浆内。
经Giménez法染色后立克次体呈红色，背景为绿色。
细胞壁不含磷壁酸，与G-的肽聚糖成分相似。
2.培养特性
鸡胚成纤维细胞、L929细胞、Vero细胞
C02条件下，繁殖一代需要6～8小时。
3.抗原构造
群特异性抗原：与黏液层的脂多糖有关。
种特异性抗原：与细胞壁外膜的表面蛋白成分有关。
外斐反应（Wid-Felix reaction）：大部分立克次体与普通变形杆菌某些X菌株的耐热多糖抗原有共同的抗原性，故可用这些X菌株代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应去检测抗体，可作为立克次体病的辅助诊断。
4.基因组
Madrid E株染色体为1111523bp组成的环状DNA，G＋C含量为29.1mol%。
Wilmington株基因组全长为1111496bp，为单链环状DNA，G＋C含量为28.9mol%。
5.抵抗力
对热敏感，耐低温和干燥，在干虱粪中能保持两个月左右。
对四环素和氯霉素类抗菌药物敏感。
磺胺可刺激其增殖。
（二）致病性
地方性斑疹伤寒
主要储存宿主——啮齿类动物，主要传播媒介——鼠蚤或鼠虱
自然感染周期为鼠蚤-啮齿类动物-鼠虱、鼠蚤
高热、头痛、全身皮疹为主要特征；有的伴有神经系统、心血管系统筹症状和实质性器官损伤
（三）微生物检验
注：立克次体的传染性较强，实验室工作者应首先接种疫苗，必要时进行药物预防，以防止实验室感染的发生。
（一）标本的采集和处理
1.病人血液：在发病初期或急性期较易检出病原体。
◆病程第一周内并在使用广谱抗生素前采集5～10ml，立即在患者床边接种于动物。
◆血清学检查标本一般采集3份血液标本，分别取自病程早期、病后10～14天及病后21～28天。如患者已使用抗生素治疗，需采集第4份标本。
2.活检或尸检材料
（二）标本直接检查
1.立克次体的染色法：多用于脏器标本的检查。
标本印片、固定后用荧光抗体染色或常规染色镜检。
2.核酸检测：针对特异性抗原基因的序列设计引物，采用PCR技术和核酸探针检测。
（三）立克次体培养法
1.立克次体分离：
斑疹伤寒、斑点热、恙虫病和Q热病原体分离多用动物接种。
汉赛巴通体用人工培养基。
埃立克体用细胞培养。
2.分离株的大量繁殖及保存用鸡胚卵黄囊培养或细胞培养。
（四）血清学试验
研究立克次体的重要方法，也是立克次体病实验诊断和鉴定病原体的重要手段。
病人双份血清的试验结果，有利于立克次体病现症诊断。
1.间接免疫荧光（IFA）试验、ELISA间接法是目前检测标本中特异性抗体的常用方法。
单份血清滴度≥1：128者有现症诊断意义，一般滴度在1：16或以上即为阳性，4倍增长可作为立克次体病的现症诊断。
2.凝集试验：
（1）特异性凝集试验：
微量血凝试验（MA）：滴度1：8以上者为阳性
间接血凝试验（IHA）、乳胶凝集试验（LA）：滴度在1：50以上有诊断价值。
（2）非特异性凝集试验：
外斐试验常用于立克次体属的三个生物型的诊断，缺乏敏感性和特异性。
血清滴度达1：160即为阳性，病程中双份或多份血清试验，至少效价有4倍增长才有诊断意义。
斑疹伤寒立克次体
（一）生物学特性
1.形态与结构
比细菌小，呈多形性；在感染细胞内大多聚集成团分布在胞浆内。
经Giménez法染色后立克次体呈红色，背景为绿色。
细胞壁不含磷壁酸，与G-的肽聚糖成分相似。
2.培养特性
鸡胚成纤维细胞、L929细胞、Vero细胞
C02条件下，繁殖一代需要6～8小时。
3.抗原构造
群特异性抗原：与黏液层的脂多糖有关。
种特异性抗原：与细胞壁外膜的表面蛋白成分有关。
外斐反应（Wid-Felix reaction）：大部分立克次体与普通变形杆菌某些X菌株的耐热多糖抗原有共同的抗原性，故可用这些X菌株代替立克次体抗原进行非特异性凝集反应去检测抗体，可作为立克次体病的辅助诊断。
4.基因组
Madrid E株染色体为1111523bp组成的环状DNA，G＋C含量为29.1mol%。
Wilmington株基因组全长为1111496bp，为单链环状DNA，G＋C含量为28.9mol%。
5.抵抗力
对热敏感，耐低温和干燥，在干虱粪中能保持两个月左右。
对四环素和氯霉素类抗菌药物敏感。
磺胺可刺激其增殖。
（二）致病性
地方性斑疹伤寒
主要储存宿主——啮齿类动物，主要传播媒介——鼠蚤或鼠虱
自然感染周期为鼠蚤-啮齿类动物-鼠虱、鼠蚤
高热、头痛、全身皮疹为主要特征；有的伴有神经系统、心血管系统筹症状和实质性器官损伤
（三）微生物检验
恙虫病立克次体
（一）生物学特性
1.形态与结构
多形性，但以球杆状或短杆状为常见
革兰染色阴性，吉姆萨染色呈紫红色；Macchiavello染色呈蓝色；Giménez染色呈暗红色；背景为绿色
分布在细胞质内，密集于细胞核旁
2.培养特性
专性细胞内寄生
动物接种、鸡胚接种、细胞培养
3.抗原成分
耐热性多糖抗原、特异性抗原
与变形杆菌OXk株具有共同抗原成分
4.基因组
Boryong株：2007年，线性DNA，全基因组长2127051bp，基因组G＋C含量为30.5mol%。
Ikeda株：2008年，环状DNA，全基因组长2008987bp，基因组G＋C含量为30%。
（二）致病性
恙虫病
疫区主要分布在东亚、南亚、东南亚太平洋岛屿、日本和我国的东南与西南地区。
致病因素：菌体死后所释放的毒素样物质。
患者可表现为高热（38～41℃），寒战、头痛、肌肉痛；皮疹（一般在发病后3～8天出现）；严重者常出现并发症，包括肺炎、肝炎、心脏的病变、肾功能损害、脑膜炎和脑炎等。
（三）微生物学检验
患者采集血液标本、活检或尸检材料作为检测标本。
1.直接检测
1）抗原检测：ELISA间接法是检测标本的特异性抗原或抗体的最常用方法。
2）PCR：可以检测出20ng恙虫病立克次体DNA水平。
2.分离培养：接种小鼠分离病原。
3.抗体检测：外斐反应、间接免疫荧光试验、ELISA、补体结合试验等进行抗体检测。
（一）生物学特性
1.形态与结构
多形性，但以球杆状或短杆状为常见
革兰染色阴性，吉姆萨染色呈紫红色；Macchiavello染色呈蓝色；Giménez染色呈暗红色；背景为绿色
分布在细胞质内，密集于细胞核旁
2.培养特性
专性细胞内寄生
动物接种、鸡胚接种、细胞培养
3.抗原成分
耐热性多糖抗原、特异性抗原
与变形杆菌OXk株具有共同抗原成分
4.基因组
Boryong株：2007年，线性DNA，全基因组长2127051bp，基因组G＋C含量为30.5mol%。
Ikeda株：2008年，环状DNA，全基因组长2008987bp，基因组G＋C含量为30%。
（二）致病性
恙虫病
疫区主要分布在东亚、南亚、东南亚太平洋岛屿、日本和我国的东南与西南地区。
致病因素：菌体死后所释放的毒素样物质。
患者可表现为高热（38～41℃），寒战、头痛、肌肉痛；皮疹（一般在发病后3～8天出现）；严重者常出现并发症，包括肺炎、肝炎、心脏的病变、肾功能损害、脑膜炎和脑炎等。
（三）微生物学检验
患者采集血液标本、活检或尸检材料作为检测标本。
1.直接检测
1）抗原检测：ELISA间接法是检测标本的特异性抗原或抗体的最常用方法。
2）PCR：可以检测出20ng恙虫病立克次体DNA水平。
2.分离培养：接种小鼠分离病原。
3.抗体检测：外斐反应、间接免疫荧光试验、ELISA、补体结合试验等进行抗体检测。
贝纳柯克斯体
（一）生物学特性
1.形态与结构
个体较小，多为短杆状或球杆状，常排列成对，在细胞空泡中繁殖
G-，但着色不显；Giménez法染色呈红色；Giemsa染色呈紫红色
有荚膜，呈绒毛状；有芽胞
2.培养特点
鸡胚是培养大量立克次体极好宿主，一般培养10～12天
3.抗原成分
颗粒性抗原，表现为两相
4.基因组
5株贝纳柯克斯体被全基因组测序，均为环状DNA
5.抵抗力
抵抗力强，70～90℃加热30～60min尚难杀死，一般消毒剂杀灭该病原体较为困难
对乙醇、乙醚、三氯甲烷、氯霉素、四环素类敏感
（二）致病性
传染源：受感染的牛、羊等
对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物，通过接触，气溶胶经呼吸道、消化道等途径感染人及动物
致病物质：脂多糖
发热、头痛及肌肉痛外，以出现肺炎和肝炎为其主要的临床特征
（三）微生物学检验
（一）生物学特性
1.形态与结构
个体较小，多为短杆状或球杆状，常排列成对，在细胞空泡中繁殖
G-，但着色不显；Giménez法染色呈红色；Giemsa染色呈紫红色
有荚膜，呈绒毛状；有芽胞
2.培养特点
鸡胚是培养大量立克次体极好宿主，一般培养10～12天
3.抗原成分
颗粒性抗原，表现为两相
4.基因组
5株贝纳柯克斯体被全基因组测序，均为环状DNA
5.抵抗力
抵抗力强，70～90℃加热30～60min尚难杀死，一般消毒剂杀灭该病原体较为困难
对乙醇、乙醚、三氯甲烷、氯霉素、四环素类敏感
（二）致病性
传染源：受感染的牛、羊等
对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物，通过接触，气溶胶经呼吸道、消化道等途径感染人及动物
致病物质：脂多糖
发热、头痛及肌肉痛外，以出现肺炎和肝炎为其主要的临床特征
（三）微生物学检验
埃立克体
（一）生物学特性
1.形态与结构
G-，小球菌、呈多形性
Romanowsky染色呈蓝色和紫色
电镜下受侵细胞胞质内可见包涵体
2.基因组
目前有5株埃立克体属菌株被全基因组测序。
3.抗原成分
7种主要蛋白抗原，其中22kD为热敏性，其他均为热稳定性。
（二）致病性
埃立克体属
腺热埃立克体——人腺热埃立克体病
查菲埃立克体——人单核细胞埃立克体病
人粒细胞埃立克体——人粒细胞埃立克体病
（三）微生物学检查
（一）生物学特性
1.形态与结构
G-，小球菌、呈多形性
Romanowsky染色呈蓝色和紫色
电镜下受侵细胞胞质内可见包涵体
2.基因组
目前有5株埃立克体属菌株被全基因组测序。
3.抗原成分
7种主要蛋白抗原，其中22kD为热敏性，其他均为热稳定性。
（二）致病性
埃立克体属
腺热埃立克体——人腺热埃立克体病
查菲埃立克体——人单核细胞埃立克体病
人粒细胞埃立克体——人粒细胞埃立克体病
（三）微生物学检查
汉赛巴通体
（一）生物学特性
1.形态与结构
弯曲的杆状小体，常呈多形性
G-，Giemsa染色呈紫蓝色，镀银染色呈黄色
初分离的汉赛巴通体有菌毛，初代后可消失
2.培养特性
营养要求苛刻的需氧杆菌
血或巧克力琼脂、活性炭-酵母浸液琼脂、心脑浸液等
35～37℃ 5% C02环境下培养
（二）致病性
巴通体属内对人致病的一个重要病原微生物
引起人类杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫爪病
（三）微生物学检查
【例题】流行性斑疹伤寒的病原体是
A.立氏立克次体
B.莫氏立克次体
C.康氏立克次体
D.普氏立克次体
E.斑疹伤寒立克次体
[答疑编号502389230101]
【正确答案】D
（一）生物学特性
1.形态与结构
弯曲的杆状小体，常呈多形性
G-，Giemsa染色呈紫蓝色，镀银染色呈黄色
初分离的汉赛巴通体有菌毛，初代后可消失
2.培养特性
营养要求苛刻的需氧杆菌
血或巧克力琼脂、活性炭-酵母浸液琼脂、心脑浸液等
35～37℃ 5% C02环境下培养
（二）致病性
巴通体属内对人致病的一个重要病原微生物
引起人类杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫爪病
（三）微生物学检查
【例题】流行性斑疹伤寒的病原体是
A.立氏立克次体
B.莫氏立克次体
C.康氏立克次体
D.普氏立克次体
E.斑疹伤寒立克次体
[答疑编号502389230101]
【正确答案】D
【例题】易使外-斐试验呈现假阳性的疾病是
A.伤寒
B.变形杆菌感染
C.立克次体病
D.痢疾
E.沙眼
[答疑编号502389230102]
【正确答案】B
A.伤寒
B.变形杆菌感染
C.立克次体病
D.痢疾
E.沙眼
[答疑编号502389230102]
【正确答案】B
本章小结：
一、共同特征
二、生物学特性
三、致病性
四、微生物学检验
一、共同特征
二、生物学特性
三、致病性
四、微生物学检验
编辑推荐：
下载Word文档
温馨提示：因考试政策、内容不断变化与调整，长理培训网站提供的以上信息仅供参考，如有异议，请考生以权威部门公布的内容为准！ (责任编辑：长理培训)
点击加载更多评论>>