解放军文职招聘考试细菌非培养检测方法

 细菌非培养检测方法

细菌非培养检测方法的种类
常用方法的原理、用途
细菌非培养检测方法（难以常规培养的细菌）
免疫学检测
分子生物学检测
细菌毒素检测
动物实验

　　一、免疫学检测
利用免疫学试验的方法和原理，用已知的抗体检测抗原，或用已知的抗原检测抗体，是临床细菌性疾病诊断的重要手段之一。
Ag ＋ Ab → AgAb
（一）抗原检测
1.凝集反应
2.免疫荧光技术
免疫学特异性反应与荧光示踪技术相结合的显微镜检查
3.酶联免疫吸附试验
其他:对流免疫电泳、免疫印迹试验、发光免疫技术
（二）抗体检测
已知细菌或其特异性抗原检测患者血清中有无相应抗体及其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。
主要适用于抗原性较强的致病菌和病程较长的感染性疾病。
抗体效价明显高于正常人水平，或患者恢复期抗体效价比急性期升高≥4倍者才有意义。

　　二、分子生物学检测
（一）核酸杂交
（二）聚合酶链反应（PCR）
（三）生物芯片
（一）核酸杂交
来自两个不同个体的单链DNA相互结合成互补的DNA双链，即为杂交。

（二）聚合酶链式反应（PCR）
体外基因扩增技术
荧光定量PCR

（三）生物芯片
通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建微型生物化学分析系统。
基因芯片、蛋白芯片。

　　三、细菌毒素检测
内毒素
革兰阴性细菌感染。
常采用鲎试验——内毒素激活鲎试剂中凝固酶原转变为凝固酶，凝固蛋白原生成凝固蛋白。
外毒素
革兰阳性菌及部分阴性菌。
常用体内及体外毒力试验检测，也用ELISA法测定。

四、动物实验
用途：分离和鉴定病原微生物；测定细菌的毒力；制备免疫血清；建立致病动物模型；动物的血液是配制细菌培养基的必需材料；用于生物制品或一些药物的安全、毒性、疗效检验。
动物要求：分类；选择合适的实验动物；接种方法。
接种方法：皮下注射、皮内注射、肌内注射、腹腔注射、静脉注射和脑内注射等。