弧菌科及检验
● 考点
弧菌属
气单胞菌属
邻单胞菌属
【内容讲解】
共同特点：
G-，直或微弯的杆菌
氧化酶阳性
具有极端鞭毛、动力阳性
发酵葡萄糖
弧菌科细菌及其初步鉴定
弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光杆菌属
极端鞭毛 + - - -
甘露醇 + + - -
脂酶 + + - +/-
NaCl + - - +
O129敏感 + - + +
弧菌属
气单胞菌属
邻单胞菌属
【内容讲解】
共同特点：
G-，直或微弯的杆菌
氧化酶阳性
具有极端鞭毛、动力阳性
发酵葡萄糖
弧菌科细菌及其初步鉴定
弧菌属 气单胞菌属 邻单胞菌属 发光杆菌属
极端鞭毛 + - - -
甘露醇 + + - -
脂酶 + + - +/-
NaCl + - - +
O129敏感 + - + +
一、弧菌属
WTO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：
①O1群霍乱弧菌；
②不典型O1群霍乱弧菌；
③非O1群霍乱弧菌；
④其他弧菌（副溶血性弧菌）。
（一）霍乱弧菌
霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。
1.生物学特性
（1）形态染色
弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
（2）培养特性
需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水：形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：菌落中心呈灰褐色。
（3）生化反应
分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。
迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。
（4）抗原结构与分型
耐热的特异性O抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。
不耐热的非特异性H抗原：H抗原为弧菌属所共有。
分类-血清学：
分类-生物学：
性状 古典生物型 El Tor生物型
溶血（羊红细胞） - D
血凝（鸡红细胞） - +
V-P试验 - +
多粘菌素B敏感 + -
噬菌体Ⅳ组裂解 + -
噬菌体Ⅴ组裂解 - +
（5）变异性
形态变异
菌落变异
溶血性变异
毒力变异
（6）抵抗力
对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。
2.微生物学检验
（1）标本采集
标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。一般米泔水样便采取1～3ml，成形便采取蚕豆大小。
注：采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。
（2）检验方法及鉴定
3.临床意义
致病物质：
霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。
所致疾病：
霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克和死亡。
免疫性：
病后获得牢固免疫力，再感染者少见。小肠内有sIgA形成。
（二）O139型霍乱弧菌
属非O1群霍乱弧菌，可与O139抗血清凝集。
治疗原则：
输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。
（三）副溶血性弧菌
一种嗜盐性弧菌。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。
1.生物学特性
（1）形态染色：
G-，杆菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态；两极浓染。
单端单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。
（2）培养特性：
需氧，营养要求不高；NaCl最适浓度为35g/L，在无盐培养基中不生长。所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7。
不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。
液体培养基：形成菌膜。
35g/LNaCl琼脂平板上：蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明。
副溶血性弧菌专用选择培养基：形成1～2.5mm，稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落。
SS平板：不生长或长出1～2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈黏丝状。
羊血琼脂平板：形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血。
TCBS琼脂：不发酵蔗糖，菌落绿色。
（3）生化反应：
在70g/L NaCl中生长，在无盐或100g/L NaCl中不生长。
能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖，但分解阿拉伯糖。
靛基质、甲基红试验阳性，V-P、H2S、尿素酶试验阴性。
神奈川试验：致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。
2.微生物检验
（1）标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。
（2）检验方法及鉴定
1）增菌培养
2）分离培养：菌落湿润、混浊无黏性，呈绿色；
3）初步鉴定：
形态、染色、多形性、活泼动力等特点。
选择培养基上的菌落特征。
氧化酶试验阳性，在KIA上斜面不产酸，底层产酸不产气，不产生H2S。在MIU上有动力，靛基质阳性，尿素酶阴性。
嗜盐试验和血清学分型。
4）最后鉴定：作进一步生化试验及毒力试验。
3.临床意义
致病因子：黏附因子（主要为菌毛）、毒素（如耐热性溶血素、TDH类毒素）。
所致疾病：食物中毒及急性胃肠炎。
4.治疗原则
选用合适的抗生素及其他抗菌药物，严重病例需输液及补充电解质。
二、气单胞菌属
广泛分布于自然界，可从水源、土壤以及人的粪便中分离。
本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。
1.生物学特性
（1）形态染色：
G-，短杆菌，菌体两端钝圆。
单极鞭毛，运动极为活泼（除杀鲑气单胞菌外）。无芽胞，有窄的荚膜。
（2）培养特性：
需氧或兼性厌氧，最适生长温度30℃，但在0～45℃皆可生长；
营养要求不高；
普通培养基：1～3mm大小，微白色半透明的菌落；
血琼脂：灰白、光滑、湿润、凸起直径约2mm的菌落，多数菌株有β溶血环，3～5天后菌落呈暗绿色；
肠道选择培养基：大多数菌株形成乳糖不发酵菌落；
TCBS琼脂：生长不良；
液体培养基：呈均匀混浊。
（3）生化反应：
发酵葡萄糖产酸或产酸产气；
氧化酶和触酶试验阳性；
在65g/L NaCl中不生长。
2.微生物检验
（1）标本采集：
不同疾病采集粪便或肛拭子、血液、脓汁、脑脊液、尿液等标本。
（2）检验方法及鉴定
1）直接涂片：革兰阴性短杆菌；悬滴标本运动活泼。
2）分离培养：观察菌落。
3）鉴定：
①初步鉴定：
KIA：K/A.产气＋/－、H2S－；
MIU：＋＋－；氧化酶阳性；
②最后鉴定：
氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别。
发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别。
3.临床意义
引起腹泻，并可引起伤口感染及菌血症；
偶尔引起心内膜炎、脑膜炎、肺炎、脊髓炎、腹膜炎、关节炎、血栓性静脉炎和胆囊炎。
三、邻单胞菌属
只有一个种即类志贺邻单胞菌。
能引起人类水样腹泻和食物中毒，在机体免疫力降低时，可引起蜂窝织炎、骨髓炎、脑膜炎和败血症。
【例题】关于霍乱弧菌，下列哪些说法是正确的
A.O1群有古典生物型和ElTor生物型之分
B.多粘菌素B敏感试验可用于古典生物型和ElTor生物型的鉴别
C.部分菌对庆大霉素敏感
D.营养要求高，在普通营养琼脂上生长不好
E.感染途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入
[答疑编号502389150101]
【正确答案】ABE
WTO腹泻病控制中心将弧菌分为四类：
①O1群霍乱弧菌；
②不典型O1群霍乱弧菌；
③非O1群霍乱弧菌；
④其他弧菌（副溶血性弧菌）。
（一）霍乱弧菌
霍乱的病原菌，该病为一种急性烈性肠道传染病，发病急，传染性强，死亡率高。
1.生物学特性
（1）形态染色
弧形或逗点状；无芽胞、有菌毛、有些菌株有荚膜；一端有一根粗而长的鞭毛，运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察，可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检，可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
（2）培养特性
需氧或兼性厌氧菌；营养要求低；耐碱不耐酸，可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水：形成菌膜。
碱性琼脂平板：较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS）：较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板：菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂：菌落中心呈灰褐色。
（3）生化反应
分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。
迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质，霍乱红反应（即亚硝基靛基质试验）阳性。
（4）抗原结构与分型
耐热的特异性O抗原：特异性高，具有群特异性和型特异性，是分群和分型的基础。
不耐热的非特异性H抗原：H抗原为弧菌属所共有。
分类-血清学：
分类-生物学：
性状 古典生物型 El Tor生物型
溶血（羊红细胞） - D
血凝（鸡红细胞） - +
V-P试验 - +
多粘菌素B敏感 + -
噬菌体Ⅳ组裂解 + -
噬菌体Ⅴ组裂解 - +
（5）变异性
形态变异
菌落变异
溶血性变异
毒力变异
（6）抵抗力
对热、干燥、日光、酸、消毒剂很敏感。但耐碱力较强。
2.微生物学检验
（1）标本采集
标本以粪便为主，尽可能在患者用药之前采取。一般米泔水样便采取1～3ml，成形便采取蚕豆大小。
注：采集的标本应及时接种适宜培养基。不能及时接种者，要接种于保存或运送培养基内尽快送检。
（2）检验方法及鉴定
3.临床意义
致病物质：
霍乱肠毒素，鞭毛，菌毛等。
所致疾病：
霍乱。表现为剧烈的腹泻和呕吐，导致严重脱水、代谢性酸中毒、休克和死亡。
免疫性：
病后获得牢固免疫力，再感染者少见。小肠内有sIgA形成。
（二）O139型霍乱弧菌
属非O1群霍乱弧菌，可与O139抗血清凝集。
治疗原则：
输液，纠正电解质紊乱，选用合适的抗菌药物。
（三）副溶血性弧菌
一种嗜盐性弧菌。它是我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌。
1.生物学特性
（1）形态染色：
G-，杆菌，随培养基不同菌体形态差异较大，有卵圆形、棒状、球杆状、梨状、弧形等多种形态；两极浓染。
单端单鞭毛，运动活泼。无芽胞、无荚膜。
（2）培养特性：
需氧，营养要求不高；NaCl最适浓度为35g/L，在无盐培养基中不生长。所需pH为7.0～9.5，最适pH为7.7。
不耐热，不耐冷，不耐酸，对常用消毒剂抵抗力弱。
液体培养基：形成菌膜。
35g/LNaCl琼脂平板上：蔓延生长，菌落边缘不整齐，凸起、光滑湿润，不透明。
副溶血性弧菌专用选择培养基：形成1～2.5mm，稍隆起、混浊、无粘性、绿色菌落。
SS平板：不生长或长出1～2mm扁平无色半透明的菌落，不易挑起，挑起时呈黏丝状。
羊血琼脂平板：形成2～3mm、圆形、隆起、湿润、灰白色菌落，某些菌株可形成β溶血或α溶血。
TCBS琼脂：不发酵蔗糖，菌落绿色。
（3）生化反应：
在70g/L NaCl中生长，在无盐或100g/L NaCl中不生长。
能分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、淀粉产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖，但分解阿拉伯糖。
靛基质、甲基红试验阳性，V-P、H2S、尿素酶试验阴性。
神奈川试验：致病菌株能使人或兔红细胞发生溶血，对马红细胞不溶血，称神奈川试验阳性。
2.微生物检验
（1）标本采集：主要是患者的粪便、可疑食物、炊事用具的洗涤液等。
（2）检验方法及鉴定
1）增菌培养
2）分离培养：菌落湿润、混浊无黏性，呈绿色；
3）初步鉴定：
形态、染色、多形性、活泼动力等特点。
选择培养基上的菌落特征。
氧化酶试验阳性，在KIA上斜面不产酸，底层产酸不产气，不产生H2S。在MIU上有动力，靛基质阳性，尿素酶阴性。
嗜盐试验和血清学分型。
4）最后鉴定：作进一步生化试验及毒力试验。
3.临床意义
致病因子：黏附因子（主要为菌毛）、毒素（如耐热性溶血素、TDH类毒素）。
所致疾病：食物中毒及急性胃肠炎。
4.治疗原则
选用合适的抗生素及其他抗菌药物，严重病例需输液及补充电解质。
二、气单胞菌属
广泛分布于自然界，可从水源、土壤以及人的粪便中分离。
本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。
1.生物学特性
（1）形态染色：
G-，短杆菌，菌体两端钝圆。
单极鞭毛，运动极为活泼（除杀鲑气单胞菌外）。无芽胞，有窄的荚膜。
（2）培养特性：
需氧或兼性厌氧，最适生长温度30℃，但在0～45℃皆可生长；
营养要求不高；
普通培养基：1～3mm大小，微白色半透明的菌落；
血琼脂：灰白、光滑、湿润、凸起直径约2mm的菌落，多数菌株有β溶血环，3～5天后菌落呈暗绿色；
肠道选择培养基：大多数菌株形成乳糖不发酵菌落；
TCBS琼脂：生长不良；
液体培养基：呈均匀混浊。
（3）生化反应：
发酵葡萄糖产酸或产酸产气；
氧化酶和触酶试验阳性；
在65g/L NaCl中不生长。
2.微生物检验
（1）标本采集：
不同疾病采集粪便或肛拭子、血液、脓汁、脑脊液、尿液等标本。
（2）检验方法及鉴定
1）直接涂片：革兰阴性短杆菌；悬滴标本运动活泼。
2）分离培养：观察菌落。
3）鉴定：
①初步鉴定：
KIA：K/A.产气＋/－、H2S－；
MIU：＋＋－；氧化酶阳性；
②最后鉴定：
氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别。
发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别。
3.临床意义
引起腹泻，并可引起伤口感染及菌血症；
偶尔引起心内膜炎、脑膜炎、肺炎、脊髓炎、腹膜炎、关节炎、血栓性静脉炎和胆囊炎。
三、邻单胞菌属
只有一个种即类志贺邻单胞菌。
能引起人类水样腹泻和食物中毒，在机体免疫力降低时，可引起蜂窝织炎、骨髓炎、脑膜炎和败血症。
【例题】关于霍乱弧菌，下列哪些说法是正确的
A.O1群有古典生物型和ElTor生物型之分
B.多粘菌素B敏感试验可用于古典生物型和ElTor生物型的鉴别
C.部分菌对庆大霉素敏感
D.营养要求高，在普通营养琼脂上生长不好
E.感染途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入
[答疑编号502389150101]
【正确答案】ABE
【例题】食未煮熟的海产品后发生暴发性食物中毒最可能由哪种细菌引起
A.鼠伤寒沙门菌
B.痢疾志贺菌
C.副溶血弧菌
D.霍乱弧菌
E.胎儿弯曲菌
[答疑编号502389150102]
【正确答案】C
A.鼠伤寒沙门菌
B.痢疾志贺菌
C.副溶血弧菌
D.霍乱弧菌
E.胎儿弯曲菌
[答疑编号502389150102]
【正确答案】C
【例题】关于霍乱，下列哪项是错误的
A.为烈性传染病
B.经口传播
C.病后可获得短暂的免疫力
D.起病急、传播快、死亡率高
E.人类对霍乱的免疫力主要靠sIgA
[答疑编号502389150103]
【正确答案】C
A.为烈性传染病
B.经口传播
C.病后可获得短暂的免疫力
D.起病急、传播快、死亡率高
E.人类对霍乱的免疫力主要靠sIgA
[答疑编号502389150103]
【正确答案】C
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