解放军文职招聘考试蛋白质的性质与鉴定

 实验四    蛋白质的性质与鉴定

【实验步骤】

1．盐析作用^[1]

在试管中加入4mL蛋白质溶液，在轻轻振摇下，向其中加入硫酸铵粉末，直至硫酸铵不再溶解为止。静置观察，当下层产生絮状沉淀（清蛋白）后，小心吸出上层清液，再向试管中加入等体积的蒸馏水，振摇后观察，沉淀是否溶解？为什么？

2．显色反应

    (1)茚三酮反应^[2]  在试管中加入ImL蛋白质溶液和2滴茚三酮试剂，振摇后放入沸水浴中加热l0min，取出观察，发生了什么现象？

    (2)缩二脲反应^[3]  在试管中加入2mL蛋白质溶液和2mL氢氧化钠溶液，再加入2滴1%硫酸铜溶液^[4]，振摇后观察，有什么现象发生？

(3)黄蛋白反应^[5] 在试管中加入2mL蛋白质溶液和0.5mL浓硝酸，振摇后加热煮沸，注意观察生成沉淀的颜色，再滴加氢氧化钠溶液，发生了什么变化？

(4)与硝酸汞试剂作用在试管中加入2mL蛋白质溶液和2滴硝酸汞试剂，小心加热并观察，有什么现象发生？记录上述实验现象。

3．与重金属盐作用^[6]

在3支试管中，各加入2mL蛋白质溶液，再分别缓慢滴加饱和硫酸铜溶液、醋酸铅溶液、硝酸银溶液，边滴加边振摇，观察并记录实验现象。

【注释】

[1]盐析作用还可用来分离蛋白质。因为用同一种盐进行盐析时，不同的蛋白质需要不同浓度的盐溶液。例如，向鸡蛋清溶液中加硫酸铵至半饱和时，其中的球蛋白沉淀析出。过滤除去球蛋白后，再加硫酸铵至饱和，清蛋白即沉淀析出。

[2]除蛋白质外，氨基酸、氨和许多伯胺也能发生此反应。

[3]尿素也发生缩二脲反应，但在碱性介质中显红色，而蛋白质的缩二脲反应显紫色。

[4]硫酸铜溶液不可加过量，否则，将生成蓝绿色氢氧化铜沉淀，而掩蔽产生的紫色。

[5]蛋白质中的苯丙氨酸和色氨酸等与硝酸发生硝化反应，生成黄色的硝基化合物，称做黄蛋白反应。皮肤沾上硝酸显黄色就是发生了这样的反应。加碱后变为橙黄色，是因为形成了醌类化合物所致。

[6]重金属盐与蛋白质形成不溶于水的化合物，这种沉淀作用是不可逆的，而且盐的浓度很小时就可产生沉淀。但沉淀可溶解于过量的沉淀剂溶液中，所以加入的硫酸铜和醋酸铅等溶液不能过量。

【实验指南与安全提示】

浓硝酸是强氧化剂，具有腐蚀性并能与皮肤发生化学反应，应避免直接触及。

【思考题】

1．蛋白质的主要成分是什么？水解后生成什么物质？

2．可用哪些简便方法来鉴别蛋白质？

3．将剪下的指甲放入浓硝酸中，几分钟后，指甲变成黄色，为什么？

4．发生汞中毒后，可用鸡蛋清或生豆浆作解毒剂，为什么？

5．尿素和蛋白质都能发生缩二脲反应，可用什么方法区别它们？

6．伯胺和蛋白质都能发生茚三酮反应，试设计一合适的实验方案，对它们进行鉴别。