解放军文职招聘考试吸附剂的活性与含水量的关系

 表  吸附剂的活性与含水量的关系

活性	I	II	III	IV	V
氧化铝加水量/%	0	3	6	10	15
硅胶加水量/%	0	5	15	25	38

4、溶剂

吸附剂的吸附能力与吸附剂和溶剂的性质有关，还应考虑到被分离物各组分的极性和溶解度。溶剂的洗脱能力按下列次序递增：己烷、四氯化碳、甲苯、苯、二氯甲烷、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、丙醇、乙醇、甲醇、水。

（三）薄层色谱（thin layer chromatography，缩写TLC）

薄层色谱又叫薄板层析，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。

1、薄层板的制备

1）仪器与材料：

玻板：一般用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的规格，要求光滑，平整、洗净后的不附水珠，晾干。

固定相或载体：最常用的有硅胶G、硅胶GF、硅胶H、硅胶HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。其颗粒大小，一般要求直径为10-40µm。薄层涂布，一般可分无粘合剂和含粘合剂两种；前者系将固定相直接涂布于玻璃板上，后者系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10—15%煅石膏（CaSO4•2H₂O在140℃烘4小时），混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液（0.5—0.7%）适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上。也有含一定展开液或缓冲液的薄层。

涂布器：能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

点样器：常用具支架的微量注射器或定时毛细管，应使点样位置正确集中。

展开室：应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密盖子，底部应平整光滑，应便于观察。

2）制备：

一般将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2-0.3mm），取下涂好薄层的玻璃板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟。即置有干燥剂的干燥箱中备用。

3）点样：

用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，点样直径为2-4mm，点间距离约为1.5-2.0cm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

4）展开：

将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5-1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，等展开至规定距离（一般为10-15cm），取出薄层板，晾干。

5）显色：

常用显色方法主要有：① 紫外照射法：方便、不破坏样品；

② 碘蒸气法：通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用；

③ 荧光试剂：制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显；

④ 硫酸溶剂：对绝大多数有机物有效，但有破坏性。