解放军文职招聘考试同色谱分离方法的填料特点与适用范围
.不同色谱分离方法的填料特点与适用范围
填料 特点
分配色谱 纸色谱 正相色谱,以纸为载体,以纸上所含水分或其他物质为固定相。
柱色谱 正相、反相色谱(RP-18、RP-8、RP-2)
吸附色谱 硅胶 中等极性、酸性
适用于中性或酸性成分
氧化铝 极性、碱性
适用于碱性或中性亲脂性成分的分离
活性碳 非极性
适用于亲脂性成分,常用于脱色
填料 特点
吸附色谱 聚酰胺 氢键吸附
不溶于水、甲醇、乙醇、乙醚、三氯甲烷及丙酮等常用有机溶剂
对碱较稳定,对酸尤其是无机酸稳定性较差
大孔树脂 吸附与分子筛两种原理
一般为白色球形颗粒状,通常分为非极性和极性两类,对酸、碱均稳定。
填料 特点
凝胶过滤色谱(排阻色谱) 葡聚糖凝胶(Sephadex) 只适于水中应用
羟基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20) 除具有分子筛特性外,在由极性与非极性溶剂组成的混合溶剂中常常起到反相色谱效果
离子交换色谱 离子交换树脂 基于混合物中各成分解离度差异进行分离的
球形颗粒,不溶于水,但可在水中膨胀
(1)吸附色谱原理与分类
以静态吸附来说,当在某中药提取液中加入吸附剂时,在吸附剂表面即发生溶质分子与溶剂分子,以及溶质分子相互间对吸附剂表面的争夺。物理吸附过程一般无选择性,但吸附强弱及先后顺序都大体遵循“相似者易于吸附”的经验规律。
吸附类型与特点:
吸附类型 吸附特点 举例
物理吸附
(表面吸附,应用最广) 吸附无选择性
为可逆吸附
吸附于解吸附快速进行 以硅胶、氧化铝、活性炭为吸附剂的吸附色谱
化学吸附
(应用最少) 吸附有选择性
吸附牢固,甚至不可逆 碱性氧化铝吸附酸性物质;酸性硅胶吸附碱性物质
半化学吸附
(有一定应用) 介于物理吸附与化学吸附间,吸附较弱 聚酰胺色谱
(2)聚酰胺吸附色谱
对碱较稳定,对酸尤其是无机酸稳定性较差。特别适合于分离酚类、醌类和黄酮类化合物(鞣质例外)
引申知识点(1)——聚酰胺吸附规律
①形成氢键的基团数目越多,吸附能力越强;
②易形成分子内氢键者,其在聚酰胺上的吸附即相应减弱;
③分子中芳香化程度越高者,吸附性越强;
④洗脱溶剂的影响。
(3)大孔吸附树脂
性质:一般为白色球形颗粒状,通常分为非极性和极性两类,对酸、碱均稳定。
吸附原理:
①选择性吸附(由于范德华引力或产生氢键的结果)
②分子筛性能(由其本身的多孔性网状结构决定)
影响因素:
比表面积、表面电性、氢键
引申知识点(2)——大孔树脂洗脱剂选择的一般方法。
洗脱剂 洗脱物质
水 单糖、鞣质、低聚糖、多糖等极性物质
70%乙醇 皂苷、黄酮(少量)、酚性成分等
3%~5%碱溶液 黄酮、有机酸、酚性成分和氨基酸等
10%酸溶液 生物碱、氨基酸等
丙酮 中性亲脂性成分
最佳选择题
大孔吸附树脂吸附的物质用水充分洗脱后,再用丙酮洗脱,被丙酮洗下的物质是
A.单糖
B.鞣质
C.多糖
D.中性亲脂性成分
E.氨基酸
『正确答案』D
(4)凝胶过滤色谱(分子筛过滤、排阻色谱)
分离原理:分子筛作用,根据凝胶的孔径和被分离化合物分子的大小而达到分离的目的。
(5)离子交换色谱
性质:球形颗粒,不溶于水,但可在水中膨胀。
离子交换基团
配伍选择题
A.聚酰胺
B.离子交换树脂
C.硅胶
D.大孔吸附树脂
E.膜
1.具有氢键吸附性能的吸附剂是
『正确答案』A
2.在酸性条件下不稳定的吸附剂是
『正确答案』A
3.对酸、碱均稳定的极性吸附剂是
『正确答案』D
4.同时具有吸附性能和分子筛性能的吸附剂是
『正确答案』D
A.阳离子交换树脂
B.透析膜
C.活性炭
D.硅胶
E.氧化铝
1.在水中可膨胀的是
『正确答案』A
2.常用于吸附水溶液中非极性色素的是
『正确答案』C
3.不适合分离酸性物质的是
『正确答案』E
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