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解放军文职招聘考试原位PCR技术的应用

来源: 2017-10-06 22:00

 原位PCR技术的应用

 

原位PCR技术的突出优势,就是能在组织细胞原位检测出拷贝数较低的特异性基因序列。按照待测基因的性质,可将原位PCR的应用分为检测外源性基因和内源性基因两方面。

1、用于外源性基因的检测

1)病毒基因的检测

感染病毒的细胞常无较好的检测手段,但当原位PCR技术应用后,使这一极为困难的问题有望解决。

HIVHPVHSVHBVHCV等多种病毒的检测,使我们能够成功等观察到这些病毒在艾滋病、生殖系统肿瘤、肝炎及肝癌中的作用,能够及时发现受感染的人群。

2)细菌基因的检测

最突出的应用是在结核杆菌的检测上,当结核病变不够典型时,经过特殊染色的方法(详见第一篇第五章)很难在镜下找到结核杆菌,而应用原位PCR技术可帮助明确诊断,当结核杆菌很少时仍能在镜下被很容易地找出来。

3)导入基因的检测

在转基因动物的研究中,是否导入了基因,在接受基因治疗的患者体内,是否接受了导入的基因,均可用原位PCR技术来证实。因此,原位PCR技术成为重要的检测手段。

2    用于内源性基因的检测

1)异常基因的检测

机体内基因的突变、重排、也可用原位PCR技术进行检测,原癌基因,抑癌基因的突变,恶性淋巴瘤免疫球蛋白重链基因的重排,对肿瘤的研究和诊断无一均提供了广阔的应用前景。

2)固有基因的检测

对于机体细胞内只有单个或几个拷贝的低表达固有基因,原位杂交技术因基因拷贝数太少而无能为力,液相PCR虽可进行扩增检测出来,但不能确定含有该基因的细胞类型,原位PCR技术则弥补了上述两种技术的不足,使得我们能够对人类各种基因进行检测,而完成人类基因图的绘制。

 

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