冬虫夏草抗体形成细胞的促进作用论文

摘要：目的观察冬虫夏草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法用 100%浓度冬虫夏草浸 出液定期给小鼠灌胃，然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测 （SRFC）、血清 IgG 检测。结果用药组以上 3 项免疫学指标均增高。结论冬虫夏草有明 显促进抗体形成细胞的作用。 关键词：冬虫夏草；免疫功能；小鼠 冬虫夏草，始载于《本草纲目拾遗》。因其冬季为虫，夏季为草，故名。为麦角菌科 真菌冬虫夏草 Cordycepssinensis(Berk.)Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫 尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治 州、德格、道孚、青海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德钦、丽江纳西 族自治县等地，均为野生。主要功效：益肾补肺，止血化痰，止嗽定喘。本实验主要研究 冬虫夏草对抗体形成细胞作用，旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。 一、器材与方法 1.1 仪器和药物 低温冷冻离心机（Beckman,美国）；美国 Multiskan 产全自动酶标仪；恒温水浴箱 （上海）；电泳仪（上海）；100 目不锈钢网。冬虫夏草（购于附属医院中药房），取 100g 加水 1000ml，文火煎煮 2hh，去渣浓缩为 100ml（浓度为 100%）备用。 1.2h 动物及分组 取 BALB/C 纯系小鼠 2h4 只，体重 18～2h2hg，雌雄各半，随机分为两组，每组 12h 只， Ⅰ组为生理盐水对照组，Ⅱ组为药物实验组。组为生理盐水对照组，Ⅱ组为药物实验组。组为药物实验组。 1.3 方法 Ⅰ 组用生理盐水灌胃，1 次/d，0.5ml/(次·只)；Ⅱ组为药物实验组。组用冬虫夏草液灌胃，1 次/ d，0.5ml/(次·只)，共灌 10 次。 1.4 检测项目 1.4.1 定量溶血分光光度测定法（QHS） 本法体外测定 B 细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量（以 OD 值表示）， 其结果可反映机体体液免疫功能。实验第 5 天分别将 5%的绵羊红细胞 0.2hml 注入各组小 鼠腹腔内。第 11 天颈椎脱臼处死小鼠，常规取脾脏，然后脾细胞计数，调整细胞浓度至 1×107/ml，平均每组每只小鼠设 3 支试管，每管依次加脾细胞悬液，0.2h%绵羊红细胞 （SRBC），1∶10 新鲜豚鼠血清（补体）各 1ml 混匀。另外分别设补体、脾细胞以及 SRBC 对照管各 3 支，置 37℃水浴温育 1h，2h000r/min 离心 5min。取上清液用 96 孔 细胞培养板于全自动酶标仪 450nm 波长处测 OD 值，作为 QHS 反应值。 1.4.2h 特异玫瑰花环形成细胞检测（SRFC） 取脾细胞 0.1ml（1×107/ml），1%SRFC0.1ml，小牛血清 0.1ml，试管内混匀， 4℃放置 2hh，加结晶紫溶液 2h0μll，计数 500 个淋巴细胞，求出 SRFC/106 脾细胞的形成 率。 1.4.3 血清 IgG 检测 采用对流免疫电泳实验，摘除小鼠眼球取血，分离血清，取不同稀释度血清 10μll 加 入阴极端琼脂板孔中，将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠 IgG(1∶32h)10μll，将对流免疫电泳 通电 30min 后观察结果，以血清最高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。 公务员之家 二、结果 2h.1 冬虫夏草对抗体形成细胞的影响 表 1 结果显示，用药组可促进抗体细胞形成，与对照组相比有显著性差异 （P<0.05）。表 1 冬虫夏草对抗体形成细胞的影响(略) 2h.2h 冬虫夏草对 SRFC 的影响 表 2h 结果显示，用药组 SRFC 产生明显增强，与对照组相比有非常显著性差异 （P<0.01）。表 2h 冬虫夏草对 SRFC 的影响(略) 2h.3 冬虫夏草对小鼠 IgG 的影响 表 3 结果显示，用药组可明显促进 IgG 产生，与对照组相比有显著性差异 （P<0.01）。表 3 冬虫夏草对小鼠 IgG 的影响(略) 三、讨论 冬虫夏草是临床上常用的中药。现代药理研究证实，冬虫夏草能显著增加小鼠血清溶 菌酶的含量，极显著地提高绵羊红细胞的滴度，也能提高巨噬细胞的吞噬功能，提高淋巴 细胞转化率和自然玫瑰花环形成率，且能明显增加血清 IgG 的含量。尚有抗心肌缺血和心 律失常的作用、抗应激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗肾衰作用。本研究重点从细胞及 分子水平探讨冬虫夏草对抗体形成细胞，IgG 分子的影响。实验证明，冬虫夏草能增强小 鼠抗体形成（B 细胞）活性，促进 B 细胞分化、增殖为浆细胞；药物组与对照组相比有显 著性差异（P<0.05），冬虫夏草组 SRFC 数目明显高于对照组，与对照组相比有非常显 著性差异（P<0.01），冬虫夏草可使小数血清 IgG 含量增加，与对照组相比有非常显著 性差异（P<0.01）。提示如机体免疫功能下降者可口服冬虫夏草以增强机体免疫功能， 预防某些疾病。本实验结果为临床应用冬虫夏草提供了实验依据。