舒筋定痛片质量标准分析论文

【摘要】目的制定舒筋定痛片的质量标准。方法采用薄层鉴别法鉴别大黄、骨碎补； 高效液相色谱法测定大黄素和大黄酚的含量。结果在薄层色谱中均能检出大黄、骨碎补； 大黄素在 0.0105～0.0840μgg，大黄酚在大黄酚在 0.0408～0.3264μgg 范围内呈良好的线性关系 （r=0.9995,0.9999）,回收率 99.77%，大黄酚在RSD 为 0.43%。结论该方法准确、灵敏、重 现性好，大黄酚在能有效地控制舒筋定痛片的质量。 【关键词】舒筋定痛片大黄骨碎补大黄素大黄酚 StudyonQualityStandardforShujindingtongTablet Abstract： ObjectiveToestablishthequalitystandardforShujindingtongTablet.MethodsRhizo maetrhizomerhei，大黄酚在RhizomadrynariaewereidentifiedbyTLC,andthecontentsofch rysophanolandrheinweredeterminedbyHPLC.ResultsRhizomaetrhizomarhei，大黄酚在R hizomadrynariaecouldbeidentifiedbyTLC.Chrysophanolandrheinshowedagoodli nearrelationshipinarangeof0.0105～0.0840μgg,0.0408～ 0.3264μgg,r=0.9995,0.9999.Theaveragerecoverywas99.77%,RSD=0.43%.Conc lusionThemethodissimplewithgoodreproducibilityandcanbeusedasthequalityco ntrolofShujindingtongTablet. Keywords：ShujindingtongTablet；Rhizomaetrhizomerhei； Rhizomadrynariae;Chrysophanol；Rhein 舒筋定痛片收载于部颁标准中药成方制剂第 15 册［1］，大黄酚在由土鳖虫、乳香（醋制）、 没药（醋制）、自然铜（醋煅）、红花、骨碎补、大黄、硼砂（煅）、当归组成。功能活 血散淤，大黄酚在消肿止痛。用于跌打损伤，大黄酚在慢性腰腿痛，大黄酚在风湿痹痛。为了更好地控制其质量，大黄酚在故 增加了大黄、骨碎补的薄层鉴别，大黄酚在并采用高效液相法对其制剂中的大黄素、大黄酚进行含 量测定，大黄酚在为该制剂的生产提供了质量控制依据。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪：EC2000 色谱工作站，大黄酚在P200II 高压恒流泵，大黄酚在UV200II 紫外可变波长 检测器（大连依利特科学仪器有限公司生产）。 大黄素对照品：批号 075798049804（供含量测定用）,中国生物制品检定所提供。 大黄酚对照品：批号 07969804200005（供含量测定用）,中国生物制品检定所提供。 甲醇为色谱纯，大黄酚在水为重蒸水，大黄酚在其它试剂都采用分析纯。 舒筋定痛片：批号为 051203，大黄酚在郑州福瑞堂制药有限公司生产。 2 方法与结果 2.1 大黄薄层鉴别［2］ 取本品 5 片，大黄酚在研细，大黄酚在加甲醇 20ml，大黄酚在超声处理 15min，大黄酚在滤过，大黄酚在滤液蒸干，大黄酚在残渣加水 10ml 使溶解，大黄酚在加盐酸 1ml，大黄酚在超声处理 30min，大黄酚在放冷，大黄酚在用乙醚振摇提取 2 次，大黄酚在20ml/次，大黄酚在 合并乙醚液，大黄酚在蒸干，大黄酚在残渣加三氯甲烷 2ml 使溶解，大黄酚在作为供试品溶液。另取大黄对照药材 0.1g，大黄酚在同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，大黄酚在加甲醇制成每毫升含 1mg 的溶液，大黄酚在 作为对照品溶液。再按标准规定同法制备缺大黄的阴性对照样品，大黄酚在照供试品溶液制备方法 制得阴性对照样品溶液。照薄层色谱法实验，大黄酚在吸取上述溶液各 4μgl，大黄酚在分别点于同一以羧甲 基纤维素钠为黏合剂的硅胶 H 薄层板上，大黄酚在以石油醚(30～60℃)9804甲酸乙酯甲酸9804甲酸(15∶5∶1)的 上层溶液为展开剂，大黄酚在展开，大黄酚在取出，大黄酚在晾干，大黄酚在置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，大黄酚在在 与对照药材和对照品色谱相应的位置上，大黄酚在显相同颜色的荧光斑点，大黄酚在阴性样品无干扰。结果 见图 1。 2.2 骨碎补薄层鉴别［2］ 取本品 10 片，大黄酚在研细，大黄酚在加甲醇 30ml，大黄酚在超声提取 1h，大黄酚在放冷，大黄酚在滤过，大黄酚在滤液蒸干，大黄酚在残渣加 甲醇 1ml 使溶解，大黄酚在作为供试品溶液。另取对照药材 0.5g，大黄酚在加甲醇 15ml，大黄酚在同法制成对照药 材溶液。再按标准规定同法制备缺骨碎补的阴性对照样品，大黄酚在照供试品溶液制备方法制得阴 性对照品溶液。照薄层色谱法［2］实验，大黄酚在吸取上述溶液各 4μgl，大黄酚在分别点于同一硅胶 G 薄 层板上，大黄酚在以苯醋酸乙酯甲酸水9804醋酸乙酯甲酸9804甲酸9804水(1∶12∶2.5∶3)的上层溶液为展开剂，大黄酚在展开，大黄酚在取出，大黄酚在晾干，大黄酚在 喷以三氯化铝试液，大黄酚在放置过夜，大黄酚在置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，大黄酚在在与对照药 材色谱相应的位置上，大黄酚在显相同颜色的荧光斑点,阴性样品无干扰。结果见图 2。 2.3 含量测定 2.3.1 色谱条件与系统适用性实验 以十八烷基硅烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇98040.1%磷酸溶液（85∶15）为流动相； 检测波长为 254nm。理论板数按大黄素峰计算应不低于 2000。 2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取大黄素和大黄酚对照品适量，大黄酚在加甲醇制成每毫升含大黄素 4μgg，大黄酚在大黄酚 16μgg 的混合溶液，大黄酚在即得。 2.3.3 供试品溶液的制备 取本品 10 片，大黄酚在研细，大黄酚在取约 1g，大黄酚在精密称定，大黄酚在置 50ml 具塞锥形瓶中，大黄酚在精密加甲醇 25ml，大黄酚在密塞，大黄酚在称定重量，大黄酚在超声处理 30min，大黄酚在放冷，大黄酚在用甲醇补足减失重量，大黄酚在滤过，大黄酚在精密量 取续滤液 5ml，大黄酚在置 50ml 圆底烧瓶中，大黄酚在挥去甲醇，大黄酚在加 2.5mol/L 硫酸溶液 10ml，大黄酚在超声处理 5min，大黄酚在再加三氯甲烷 10ml，大黄酚在加热回流 1h，大黄酚在放冷，大黄酚在置分液漏斗中，大黄酚在用少量三氯甲烷洗涤 容器，大黄酚在并入分液漏斗中，大黄酚在分取三氯甲烷层，大黄酚在酸液用三氯甲烷提取 2 次，大黄酚在10ml/次,合并三氯 甲烷液，大黄酚在以无水硫酸钠脱水，大黄酚在三氯甲烷液移至 100ml 锥形瓶中，大黄酚在挥去三氯甲烷，大黄酚在残渣精 密加甲醇 10ml，大黄酚在称定重量，大黄酚在置水浴中微热溶解残渣，大黄酚在放冷，大黄酚在用甲醇补足减失重量，大黄酚在摇匀，大黄酚在 滤过，大黄酚在取续滤液，大黄酚在即得。 测定法：分别取上述两种溶液各 10μgl，大黄酚在注入高效液相色谱仪，大黄酚在测定，大黄酚在即得。 2.3.4 缺大黄的阴性样品溶液的测定 依据处方的比例和制法制备缺大黄的阴性样品，大黄酚在再按供试品溶液的制备方法制备缺大 黄的阴性对照溶液，大黄酚在按含量测定项下方法实验。结果表明：阴性样品溶液的 HPLC 图谱中 在与对照品大黄素、大黄酚 HPLC 图谱中相同保留时间处无吸收峰，大黄酚在阴性无干扰。结果见 图 3～5。 2.3.5 线性关系的考察 精密取大黄素对照品溶液，大黄酚在分别制成浓度为 1.05，大黄酚在2.1，大黄酚在4.2，大黄酚在6.3，大黄酚在8.4μgg·ml-1，大黄酚在 同法取大黄酚对照品溶液，大黄酚在分别制成浓度为 4.08，大黄酚在8.16，大黄酚在16.32，大黄酚在24.48，大黄酚在32.64μgg·ml1，大黄酚在进样 10μgl，大黄酚在测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标，大黄酚在大黄素和大黄酚的进样量为横坐 标绘制标准曲线，大黄酚在计算回归方程，大黄酚在大黄素：Y=(2.5800e+003)X+3.9090，大黄酚在r=0.9995; 大黄酚：Y=(2.7260e+003)X+（1.0687e+001），大黄酚在r=0.9999；表明大黄素在 0.0105～0.0840μgg；大黄酚在 0.0408～0.3264μgg 之间呈良好的线性关系。 2.3.6 精密度实验 取大黄素对照品溶液和大黄酚对照品溶液，大黄酚在进样量 10μgl，大黄酚在分别连续进样 5 次，大黄酚在测定大 黄素和大黄酚的峰面积，大黄酚在RSD 分别为 1.21%和 0.81%。结果表明该方法精密度良好。 2.3.7 重复性实验 按照正文含量测定方法，大黄酚在取同一批号样品，大黄酚在照“供试品溶液的制备”项下方法，大黄酚在分别制 备供试品溶液，大黄酚在测定峰面积并计算含量，大黄酚在RSD 为 0.19%。结果表明该方法重复性良好。 2.3.8 稳定性实验 取同一供试品溶液，大黄酚在分别在 0，大黄酚在2，大黄酚在4，大黄酚在6，大黄酚在8h 测定大黄素与大黄酚峰面积，大黄酚在并计算大 黄素与大黄酚含量，大黄酚在RSD 分别为 1.68%和 0.46%。结果表明制备的供试品溶液在 8h 内 稳定。 2.3.9 加样回收率实验 取同一批号供试品（批号 051203，大黄酚在大黄素与大黄酚总含量 271.35μgg/片，大黄酚在平均片重 0.2524g），大黄酚在取样量为 0.5g，大黄酚在精密称定，大黄酚在取 5 份，大黄酚在分别加入大黄素 100.8μgg，大黄酚在大黄酚 489.6μgg，大黄酚在按照供试品溶液制备方法，大黄酚在制备供试品溶液，大黄酚在进样量 10μgl，大黄酚在测定含量,计算回 收率。结果见表 1。表 1 加样回收率实验（略） 结果表明，大黄酚在加样回收率符合要求。 2.3.10 样品测定 按照供试品溶液制备方法对 10 批产品样品进行测定。结果见表 2。表 2 舒筋定痛片中 大黄素和大黄酚的含量测定结果（略） 根据测定结果，大黄酚在拟定本品每片含大黄以大黄素（C15H10O5）和大黄酚 （C15H10O4）总量计不低于 220μgg。 3 讨论 通过实验，大黄酚在确定了舒筋定痛片中大黄、骨碎补的薄层色谱鉴别方法，大黄酚在阴性对照表明其 它成分对本法无干扰，大黄酚在说明该方法专属性较强，大黄酚在结果准确可靠；对方中当归的薄层色谱鉴 别进行了研究，大黄酚在阴性对照色谱在与对照品和对照药材相应的位置上显相同颜色的斑点,表明 该鉴别方法阴性有干扰，大黄酚在故未收入标准正文。 舒筋定痛片具有活血散淤，大黄酚在消肿止痛的作用，大黄酚在用于跌打损伤，大黄酚在慢性腰腿痛，大黄酚在风湿痹痛。 因原质量标准中无含量测定项，大黄酚在我们增加了含量测定项。大黄有泄热通肠，大黄酚在凉血解毒，大黄酚在逐 淤通经之功，大黄酚在用于“痈肿疔疮，大黄酚在淤血经闭，大黄酚在跌扑损伤”，大黄酚在与本方功能主治一致。故我们用高 效液相色谱法测定其所含大黄素和大黄酚的含量，大黄酚在经试验把大黄素和大黄酚总量作为指标，大黄酚在 控制药品质量，大黄酚在方法灵敏、准确，大黄酚在符合定量要求。