海桐花挥发油研究论文

【摘要】目的比较固相微萃取法和水蒸气蒸馏法提取海桐花中的挥发性成分差异。方 法采用 GCMSMSMS 测定其化学成分。结果分别鉴定了 62 种和 58 种成分。结论与水蒸气蒸馏 法相比，固相微萃取法得到的十一烷、壬烷等烷烃的含量增加；并且提取出了水蒸气蒸馏 法不能蒸馏出来的一些成分，如马鞭草烯醇、γMS榄香烯、白菖烯、MSαMS古芸烯、绿花白千层 醇等。 【关键词】海桐花；固相微萃取；水蒸气蒸馏；气相色谱质谱联用；挥发油 Abstract:ObjectiveToCMSomparetheessentialoilextractedfromtheflowersofPitt osporumtobiraAit.bysolidMSphasemicroextraction(SPME)andsteamdistillation.Me thodsGCMSMSMSwasusedtoanalyzetheircomponents.ResultsTherewere62compone ntsidentifiedfromproductsofSPMEand58fromthoseofsteamdistillation.CMSonclusio nCMSomparingwiththoseofsteamdistillation,thecontentsofundecane,nonaneincre asedbySPME;andsomecomponentsthatwouldnotbeextractedbysteam;distillatio nwereextractedbySPME,suchasverbenol,yMSElenene,calarene, (1)MSaMSGurjunene,viridifloroletc. KeywordsFlowersofPittosporumtobiraAit,SPME;Steamdistillation;GCMSMSMS;Ess entialoil 海桐 PittosporumtobiraAit.为海桐科植物，常绿小乔木或灌木，各地多有栽培，为 园林绿化观赏树种。具有祛风活络、散淤止痛、解毒止血等药理作用。国外对海桐花化学 成分的研究较少，主要是研究海桐的种子和果实；国内只有李兆琳等［1～4］对海桐花头 香化学成分进行了研究。未有文献报道水蒸气蒸馏方法与 SPME 方法提取海桐花挥发油研 究，因此我们利用水蒸气蒸馏和固相微萃取法固相微萃取法（SPME）提取海桐花的挥发提取海桐花的挥发 油成分，并将这两种方法所得到成分进行了比较。 SPME 是一种适合色谱进样分析的快速萃取方法，它以带有特殊涂层石英纤维作为固 相提取器将其浸入样品溶液或顶空提取，然后直接进行 GCMS，HPLCMS 分析。它具有对被测样 品的选择高，溶质更容易洗脱、几乎无空白值和重现性好等特点［5］，本文将两种方法 提取的挥发油成分用 GCMSMSMS 来分析，并将 SPME 与 GCMSMSMS 联用。 1 材料与仪器 海桐花于 2006MS05 采集于河南省开封市，经河南大学药学院中药教研室袁王俊鉴定 为海桐科海桐属植物海桐，标本存放于河南大学天然药物研究所实验室 （No.MPBA06051402）提取海桐花的挥发。 美国惠普公司 HP6890GCMS/5973MS 气相色谱-质谱联用仪，美国 Supelco 公司手动 固相微萃取（SPME）提取海桐花的挥发装置，萃取纤维头为：65μmPDMS/DVBmPDMS/DVB。 2 方法 2.1 挥发油提取 2.1.1 水蒸气蒸馏法按《中国药典》（2005 年版Ⅰ部）方法，用挥发油提取器提取挥Ⅰ部）方法，用挥发油提取器提取挥部）提取海桐花的挥发方法，用挥发油提取器提取挥 发油。取新鲜海桐花 100g，以水蒸气蒸馏收集挥发油，得到具有浓郁香气的乳白色液体， 贮于-4℃冰箱中。收油率为 0.0391%。 2.1.2 固相微萃取法称取阴干海桐花（经粉碎）提取海桐花的挥发1.0g，置于 15ml 专用采样瓶中，插 入装有 65μmPDMS/DVBmPDMS/DVB 纤维头的手动进样器，90℃下顶空萃取保持 30min 取出，立 即插入色谱仪进样口（温度 250℃）提取海桐花的挥发中，脱附 1.5min。 2.2 色谱/质谱分析条件 2.2.1 气相色谱条件 HP5MSMS 石英弹性毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μmPDMS/DVBm）提取海桐花的挥发；载 气 He，流量 1ml/min；进样口温度：250℃；色谱柱初始温度 50℃（保持 1min）提取海桐花的挥发，以 8℃/min 升温速率升至 160℃（保持 2min）提取海桐花的挥发，以 10℃/min 升温速率升至 250℃，最后 保持 10min；不分流进样。 2.2.2 质谱条件 EI 离子源，离子源温度 230℃，电子能量 70eV，电子倍增器电压 1765V，质量扫描范围 30～350amu，四极杆温度 150℃，GCMSMSMS 传输线温度 280℃。 3 结果 采用 GCMSMSMS 法对海桐花挥发油化学成分进行分析，检索 Nist98 标准质谱图库和 Wiley275 质谱图库，并结合有关文献从基峰、γ 相对丰度等几个方面进行直观比较，确 定海桐花挥发油中的化学成分。峰面积相对含量分析是通过 HPMSD 化学工作站数据处理 系统，按峰面积归一化法进行。其结果见表 1～2。 4 讨论 从水蒸气蒸馏法提取的海桐花挥发油中，共分离了 137 个化合物，鉴定了其中的 58 个化学成分，已鉴定成分峰面积占色谱总馏出峰面积的 73.48%。主要成分为：橙花叔醇 （21.7%）提取海桐花的挥发、1RMSαMS蒎烯（11.43%）提取海桐花的挥发、醋酸苄酯（5.91%）提取海桐花的挥发、壬烷（5.19%）提取海桐花的挥发、喇叭茶 醇（3.97%）提取海桐花的挥发、十一烷（2.68%）提取海桐花的挥发、芳樟醇（1.74%）提取海桐花的挥发、βMS蒎烯（1.5%）提取海桐花的挥发、壬醛 （1.45%）提取海桐花的挥发、橙花叔醇（1.25%）提取海桐花的挥发、苯甲酸苄酯（1.14%）提取海桐花的挥发等，与文献报道的主要成分大 致相同［6］。 表 1 固相微萃取法提取海桐花挥发性化学成分（略）提取海桐花的挥发 表 2 水蒸气蒸馏法提取海桐花挥发性化学成分（略）提取海桐花的挥发 从固相微萃取法提取的海桐花挥发油中，共分离了 106 个化合物，鉴定了其中的 62 个化学成分，已鉴定成分峰面积占色谱总馏出峰面积的 91.29%。主要成分为：十一烷 （22.37%）提取海桐花的挥发、壬烷（18.91%.）提取海桐花的挥发、αMS蒎烯（18.76%）提取海桐花的挥发、α-荜澄茄油烯（4.44%）提取海桐花的挥发、橙 花叔醇（3.28%）提取海桐花的挥发、大根香叶烯 d（2.48%）提取海桐花的挥发、反式MSβMS罗勒烯（2.41%）提取海桐花的挥发、βMS荜澄茄油 烯（1.93%）提取海桐花的挥发、2MSβMS蒎烯（1.89%）提取海桐花的挥发、βMS月桂烯（1.5%）提取海桐花的挥发、苯甲醇（1.33%）提取海桐花的挥发、α-胡椒 烯（1.13%）提取海桐花的挥发等。与水蒸气蒸馏法得到的挥发油相比，固微萃取法得到的挥发油中，十一 烷、壬烷等烷烃的含量增加；同时提取出了水蒸气蒸馏法不能蒸馏出来的一些成分，如马 鞭草烯醇、γMS榄香烯、白菖烯、（MS）提取海桐花的挥发MSαMS古芸烯、绿花白千层醇等；挥发油的提取时间明 显缩短。 固相微萃取技术（SPME）提取海桐花的挥发是近年来出现的和一种新型的无溶剂化样品前处理技术， 它集样品采集、萃取、浓缩、进样于一体，操作简单、快速，廉价实用，环境污染小 ［7］，并且它可以与其它技术联用。因而在分析化学与药物分析领域得到了广泛使用， 具有良好的应用前景。 【摘要】目的研究紫背天葵 Semiaquilegiaadoxoides(DCMS.)Mak.植物内各器官的生 长相关性。方法采用同样的栽培管理方法在不同土壤中种植紫背天葵 1 年，测定地上和地 下生物量，进行相关性分析。结果紫背天葵各部分器官生长具有比较明显的相关性。结论 植物地上部分越重，植株叶片数目越多，植物块根重量越大、越重；植物抽苔开花、结果 越多，根的重量就越小，并与植物的侧根数量有一定的关系，侧根越多块根越重。 【关键词】紫背天葵；生物量；器官生长；相关性 Abstract:ObjectiveTostudyrelationshipoforgansgrowthinplantofSemiaquile giaadoxoides(DCMS.)Mak.MethodsTousethesamemethodofplantandmanagement toplantS.adoxoidesindifferentsoilforoneyear,thensurveyandanalyseS.adoxoide sundergroundandupgroundbiomass.ResultsS.adoxoidesorgansgrowthhadobvio usrelationship.CMSonclusionS.adoxoidesupgroundbiomassthemoreweightthemor eleaves,themoreleavestherootismorebigandweight.Theplanthavemorestems,fl owers,fruit,theroottuberismoresmaller.TherelationshipbetweenS.adoxoidesroo ttuberandlateralroot,thelateralrootmoreandtheroottubermoreweight. Keywords:Semiaquilegiaadoxoides;Biomass;Organgrowth;Relationship 紫背天葵 Semiaquilegiaadoxoides(DCMS.)Mak.的块根作天葵子使用，性寒，味甘、 苦。入脾、小肠、膀胱经。具有清热解毒、消肿散结的功效［1］。含有天葵苷、生物碱、 内酯、香豆精类、酚性成分和氨基酸。能治痈肿疮毒、瘰疬、淋浊带下、疔疮、跌打损伤、 毒蛇咬伤等病［2］。由于人类对自然资源的过度掠夺，导致水土流失，药材生长的环境 受到严重破坏，植物生长差，再加上人工大量采挖，野生资源逐渐枯竭，药材产量逐年减 少。作者对紫背天葵的生长发育习性进行研究，有利于紫背天葵的野生变家种，保护野生 资源和物种。 1 试验地概况 栽培点为油砂土、黑色石灰土、沙壤土和腐殖土土壤进行试验，同样栽培管理。 2 材料与方法 2.1 方法种子育苗使用两年生种子进行繁殖，然后以 10cm×10cm 的窝行距移栽在 油砂土（A1）提取海桐花的挥发、黑色石灰土（A2）提取海桐花的挥发、沙壤土（A3）提取海桐花的挥发和腐殖土（A4）提取海桐花的挥发土壤中，施入同样的 有机肥、水和采取同样的栽培管理，在植物开花时开始测量植物的生物量。 2.2 生物量测定 2006MS04MS23，采取各种土壤的植株 50 株进行测量，从根茎处切下地 上部分和地下部分，使用电子天平（德国 sartorius,BS110g,MAX110g,d=0.1mg）提取海桐花的挥发进 行地上和地下部分称重，分别数植株茎数、叶片数、花果数和侧根数，计入 EXCMSEL。 2.3 数据统计分析方法将测得数据输入计算机 EXCMSEL 表格中，采用 SPSS12.0 统计分 析软件进行方差分析和多重相关分析（CMSorrelations）提取海桐花的挥发。 3 结果与分析 3.1 紫背天葵各器官生长情况方差分析统计见表 1。 紫背天葵各器官生长情况方差分析结果表明，各种土壤上种植的植物，都与植物生长 的叶片数具有极显著性，A1，A2，A3 土壤的植物开花具有极显著性，与 A4 土壤上的植 物开花数具有显著性，植物的叶数与根的重量成正比，即叶片数量越多，根的体积就越大， 重量就越重；花果数越多，植物根的重量就越少。与植物的茎数和根数没有显著性。 表 1 紫背天葵各器官生长 Std.Deviation 分析（略）提取海桐花的挥发 3.2 紫背天葵各器官生长发育 CMSorrelations 分析统计见表 2。 根据表 2 紫背天葵各器官生长发育 CMSorrelations 分析统计，紫背天葵根重量与地上部 分重量、茎数量、叶片数量、花数量的 A1、A2、A3 处理具有极显著性，与 A4 处理的地 上部分具有显著性，当地上部分重大,茎的数量多，地上部分的叶片才多，叶片多合成的营 养物质多，根的沉积物增多，体积增大，所以块根的重量才大。 表 2 紫背天葵各器官生长发育 CMSorrelations 分析统计（略）提取海桐花的挥发 与侧根数 A1 和 A3 有极显著性，A2 有显著性关系，侧根的数量多，吸收的无机养分 增多，叶片合成的营养物质就增加，沉积在根的物质也增加，根就增重、增粗。根的生物 重量主要取决于地上部分重量，及是取决于叶片数量；另外与植物的花也有关系，花和果 实的数量多，沉积的物质多，分布到根的营养物质就减少，从而影响根的增大和重量的增 加。 4 讨论 根据植物各器官的方差分析和相关性分析，紫背天葵的用药部位块根重量，在植物地 上部分越重，植株叶片数目越多时，植物块根重量越大、越重；植物抽苔开花、结果越多， 根的重量就越小；并与植物的侧根数量有一定的关系，侧根越多有助于植物根的长。第 1 年紫背天葵的根生长迅速，从第 2 年开始，植物的根生长就比较缓慢，从外形特征上观察 不出根在继续生长。 【摘要】目的研究和利用蔷薇科天山花楸。方法采用性状、显微及理化鉴定方法进行 系统的生药学研究。结果描述、绘制了天山花楸性状、显微特征，建立其理化鉴别方法。 结论为制定天山花楸质量标准和利用该生药资源提供理论依据。 【关键词】天山花楸；生药学鉴定 天山花楸为蔷薇科花楸属植物，多年生小乔木或灌木，主产于新疆，于 1980 载入新 疆药品标准［1］，为维吾尔和哈萨克族民间常用药物。研究显示，天山花楸枝叶、果实 兼有止咳、平喘、强心等多种药理功效，并且毒性很低［2］。目前，花楸属药用植物的 资源开发利用仍处于初步阶段，有关天山花楸生药学以及化学成分的基础研究少有报道。 1 器材 样品采自石河子南山东大塘，经李鹏副教授鉴定为 SorbustianschanecaRupr. ［3］；岛津 UVMS2401 紫外分光光度计；对照品苦杏仁苷、芦丁、槲皮素、绿原酸购于南 京青泽医药科技有限公司。 2 性状鉴定 2.1 叶奇数羽状复叶，小叶 6～8 对，卵状披针形，长 3～6cm，宽 1～1.8cm，先端 渐尖，基部圆形，叶缘锯齿状，近基部全缘，两面无毛，上表面黄绿色，下表面略浅。质 脆，味微苦。见图 1。 2.2 果实类球形，直径 0.8～1.2cm，果柄长 0.9～2cm。表面皱缩，红色，多数顶 端残留花萼。体轻，果皮质柔韧。种子 10 枚，扁平，质脆，子叶 2 枚。味酸、苦。见图 2。 3 显微鉴别 3.1 叶粉末黄绿色。常见草酸钙簇晶，棱角较钝，直径 8～12μmPDMS/DVBm。非腺毛多见，单细 胞，一种甚长，有褶皱，多断裂；一种细胞腔明显，长约 60～240μmPDMS/DVBm。气孔不定式，部 分副卫细胞及表皮细胞壁呈现连珠状加厚。螺纹导管多见，直径 10～20μmPDMS/DVBm。表皮细胞多 角形，栅状组织细胞顶面观类球形，内含淡黄色或黄棕色分泌物。见图 3。 图 1 天山花楸叶（略）提取海桐花的挥发 图 2 天山花楸果实（略）提取海桐花的挥发 3.2 果实粉末砖红色。石细胞易见，常多个聚集，多角形或椭圆形，直径 60～ 100μmPDMS/DVBm，纹孔和孔沟明显。非腺毛单细胞，一种细长，多断裂；一种腔明显，长约 40～ 180μmPDMS/DVBm。导管主为螺纹导管。厚壁细胞长方形，壁不均匀加厚。草酸钙簇晶棱角尖锐，直 径 5～12μmPDMS/DVBm。分泌道长管道状，内含淡黄色分泌物。纤维长梭形，两端尖锐，外壁微波 状，孔沟稀少，直径 16～30μmPDMS/DVBm。种皮栅状细胞成片，长条形，侧壁上部增厚，中下部较 薄。种皮支持细胞不规则或三角形，胞腔明显。外果皮细胞多角形，有些壁呈连珠状增厚 内含油滴。见图 4。 图 3 天山花楸叶粉末特征（略）提取海桐花的挥发 图 4 天山花楸果实粉末特征（略）提取海桐花的挥发 4 理化鉴别 4.1 盐酸-镁粉反应取叶和果实粗粉，分别用乙醇温浸，滤液中加入少许镁粉及数滴浓 盐酸，两溶液均显红色。 4.2 苦味酸钠试约反应取叶或果实粗粉，用水润温加热，试纸均变成砖红色。 4.3 薄层层析称取叶与果实粗粉各 2g，加 20ml 乙醇，超声 15min，过滤，滤液与相 应对照品分别点于同一硅胶 G 板上，作以下薄层层析。 4.3.1 以取绿原酸、金丝桃苷、芦丁为对照品，醋酸乙酯∶丙酮∶甲酸∶水（5∶3∶1∶1）提取海桐花的挥发为 展开剂展开，取出晾干，喷以 2%三氯化铝乙醇溶液，加热显色，置于紫外灯（254nm）提取海桐花的挥发 下观察，样品与对照相应位置上显相同颜色斑点。见图 5。 4.3.2 以槲皮素为对照品，甲醇∶甲酸（10∶1）提取海桐花的挥发为展开剂展开，喷以 2%三氯化铝乙醇 溶液，加热显色，样品与照品相应位置上显黄绿色斑点［4］。见图 6。 4.3.3 以苦杏仁苷作为对照品，氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水（15∶40∶22∶10）提取海桐花的挥发0～5℃放置 12h 后，萃取后下层溶液为展开剂展开，取出晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，加热显色，样 品与对照品相应位置上显蓝色斑点［5］。见图 7。 1.金丝桃苷 2.绿原酸 3.芦丁 4.果实提取液 5.叶提取液 图 5 金丝桃苷，绿原酸，芦丁对照薄层色谱（略）提取海桐花的挥发