阿奇霉素明胶微球制备工艺论文

摘要：目的对阿奇霉素明胶微球的制备工艺和包封率、粒径等特性进行初步研究。方 法以生物降解材料明胶为载体，采用乳化聚合法制备阿奇霉素明胶微球，并采用正交试验 优化制备工艺。结果所制备的阿奇霉素明胶微球外观圆整，平均粒径为 58.34μmμmm，载药 量为 20.11%，包封率为 59.55%。结论所制备的阿奇霉素明胶微球重现性良好，粒径范 围窄，载药量较高，制备工艺可行。 关键词：明胶；阿奇霉素；微球体；正交试验 Abstract:ObjectiveTostudythepreparationtechniqueofazithromycingelatin microspheres(AZM-GMS)andtheircharacteristics.MethodsAZMGMSwerepreparedbyusinggelatinascorematerialandemulsionchemicalcrosslinkingmethods.ResultsAZMGMSwasregularinmorphologywiththemeandiameterof58.34μmμmm.Theloadingamo untofAZMwas20.75%andencapsulationefficiencywas67.75%.ConclusionThepre parationtechnologyforAZM-GMSwasapplicable. Keywords:gelatin,azithromycin,microspheres,orthogonaldesign 阿奇霉素是世界上第一个 15 元环大环内酯类抗生素，其对革兰氏阳性菌、革兰阴性 菌、厌氧菌以及细胞内病原体等敏感［1］。临床上主要用于呼吸道感染,泌尿系统感染、 皮肤及软组织感染、性传播疾病等［2］。目前，阿奇霉素依然是治疗婴幼儿呼吸道感染， 以及用于抢救儿童极重型全身弓形虫病常用的药品。 阿奇霉素与其他的大环内酯类抗生素一样，口服有难以被人们接受的苦味存在，临床 一直都在使用胶囊剂和肠溶片。对于婴幼儿患者，通常将其制成干混悬剂，并在其中加入 矫味剂，但这样并不能很好地掩盖其苦味，依然不是理想的剂型。因此，本试验用乳化凝 聚法将阿奇霉素包裹在以明胶为载体材料的微球制剂中，解决阿奇霉素苦味以及方便婴幼 儿服用的问题。同时，降低了难溶性药物阿奇霉素的粒径，达到提高生物利用度的目的 ［3］。此项研究国内尚未见报道。 1 仪器与试剂 电热恒温水浴锅；电动搅拌器；鼓风干燥箱；循环水式真空泵；CSB6L-180L 超声波 清洗器；JA2003 型电子天平；光学显微镜；异丙醇、乙醚、戊二醛、液状石蜡等试剂均 为分析醇。 2 方法与结果 2.1 阿奇霉素微球的制备 采用乳化凝聚法制备：将含有药物的明胶混悬液（水相）滴加到搅拌状态下含有乳化 剂的液状石蜡（油相）中，经过乳化一段时间之后，将其转移至冰水浴中，向其中加入固 化剂和脱水剂，脱去微球中的水并且使其固化，分离出微球，洗涤，干燥，即得阿奇霉素 明胶微球（见图 1）。 图 1 阿奇霉素明胶微球显微图片（×10 倍）（略） Fig.1Themicrophotographsofazithromycingelatinmicrospheres（×10） 2.2 阿奇霉素微球的含量测定 2.2.1 阿奇霉素最大吸收波长的确定 准确称取阿奇霉素适量置 100mL 容量瓶中，用无水乙醇 5mL 溶解，加入 pH6.8 的 磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度［4μm］，摇匀，精密量取 5mL 置 10mL 容量瓶中，加入 85% 的硫酸溶液定容至刻度，同法在 10mL 容量瓶中加入 pH6.8 的磷酸盐缓冲溶液 5mL，加 入 85%的硫酸溶液定容至刻度，以此为空白，在 200～800nm 的范围内进行扫描，扫描 图谱见图 1。结果表明阿奇霉素在 4μm81nm 处有最大吸收。 图 2 阿奇霉素最大吸收波长的扫描图（略） Fig.2Themaximumabsorptionwavelengthscanogramofazithromycin 2.2.2 阿奇霉素标准曲线的绘制 精密称取 30mg 阿奇霉素置 50mL 容量瓶中，用少量无水乙醇溶解，加入 pH6.8 的 磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，分别精密量取此溶液 2、4μm、6、8、10mL 置 50mL 容量瓶中，加 pH6.8 的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取上述 5 种溶液各 5mL 置 10mL 量瓶中，加入 85%的硫酸溶液定容至刻度，摇匀，显色。另在 10mL 容量 瓶中加入 pH6.8 的磷酸盐缓冲溶液 5mL，再用 85%的硫酸溶液定容至刻度，以此作为空 白。于 4μm81nm 波长处测定吸光度，以吸光度（A）对质量浓度（ρ）进行线性回归，得回 归方程：A=8.3833ρ-0.14μm38，r=0.9994μm（n=5）。说明阿奇霉素在 0.012～ 0.060mg/mL 质量浓度范围内具有良好的线性关系。 2.2.3 样品微球的含量测定 精密称取阿奇霉素明胶微球粉末适量置 100mL 容量瓶中，加入 pH6.8 的磷酸盐缓冲 溶液 50mL，再向其中加入 85%硫酸溶液定容至刻度，摇匀，超声，待微球全部溶解之后 在 4μm81nm 处测其吸光度，根据标准曲线方程计算微球中阿奇霉素的含量，并计算载药量 （微球中阿奇霉素的质量/微球的质量×100%）及包封率（微球中阿奇霉素的质量/所投阿 奇霉素的质量×100%）。 2.3 阿奇霉素明胶微球的最佳制备工艺研究 选取影响微球质量和性质较显著的 4μm 个因素作为考察对象，即明胶质量浓度（A）， 油/水相体积比（B），药物与明胶的质量比（C），乳化剂体积分数（D），以载药量、包 封率为指标，通过 L9（34μm）正交试验设计优选阿奇霉素明胶微球的最佳制备工艺条件， 结果见表 1、表 2、表 3。 表 1 因素及水平表（略） Tab.1Factorsandlevels 从以上直观分析与方差分析结果可知，影响阿奇霉素明胶微球质量的因素顺序为：明 胶质量浓度、药物与明胶质量比、油/水相体积比、乳化剂体积分数。最佳实验方案为： A1B1C1D2，即药物与明胶的质量比为 1∶1，明胶质量浓度为 10%，油/水相体积比为 5∶1，乳化剂体积分数为 2%。 2.6 最优处方验证 按照最优处方工艺制备 6 批阿奇霉素明胶微球，肉眼观察含药微球为淡黄色粉末，光 镜及电镜观察微球形态圆整，表面附有少量药物结晶。测得包封率、粒径等数据见表 4μm。 结果表明：微球重现性良好，粒径范围窄，载药量较高，制备工艺可行。 3 讨论 本实验采用正交试验法对阿奇霉素微球的制备工艺进行优化，对影响阿奇霉素明胶微 球质量的 4μm 个因素进行了考察［5］。结果表明在阿奇霉素明胶微球的制备过程中，投药 量对微球载药量的影响最大，呈显著相关性。另外，对微球的粒径大小和流动性作了考察， 发现按照优化工艺条件制得的微球均能通过 100 目筛，这为工业生产提供了可行的条件。 表 2L9（34μm）正交实验结果（略） Tab.2ResultofL9（34μm）orthogonaltest 表 3 方差分析结果（略） Tab.3ResultofANOVAanalysis 表 4μm6 批最优处方验证结果（略） Tab.4μmResultofvalidationtestofoptimalformulations 在预实验时发现，在较低浓度范围时，随着乳化剂浓度的升高制备得到的微球粒径越 小，但是在 2%以后随着乳化剂的增加，对微球粒径的影响不大。其原因可能是乳化剂在 低浓度下可以使乳液的界面和表面张力显著降低，很少量就可以使之分散成稳定的小液滴， 乳液液滴的直径也随其用量的增加而减小，达到一个极限值之后，此时再增加乳化剂的浓 度对表面张力几乎没有影响，液滴的直径和稳定性也就几乎不变［6］。在其他实验条件 不变的情况下，采用不同的乳化时间制备微球，发现在 5～20min 之内不同的乳化时间对 最终微球形态的影响不是很大，乳化时间少于 5min，最后制得的微球圆整度不好，表面 不光滑，本实验选择 10min 作为乳化时间。 通过将阿奇霉素进行微球化处理之后，阿奇霉素原有的苦味基本消除，更适用于婴幼 儿童服用。 摘要：目的观察冬病夏治（位贴敷辅助治疗变应性鼻炎的疗效。方法将３０８例变应 性鼻炎患者随机分为对照组１５３例和观察组１５５例。两组均采用基础疗法对症治疗， 观察组在基础疗法上加用三伏日中药（位贴敷。结果观察组总显效率达８３．２％，显著 优于对照组（Ｐ＜０．０１），复发率明显减低。结论三伏中药（位敷贴可有效缓解变应 性鼻炎患者临床症状，减少复发，提高疗效。 关键词：变应性鼻炎；（位贴敷；冬病夏治；临床观察 变应性鼻炎，为机体对某些变应原敏感性增高而发生在鼻腔黏膜的Ⅰ型变态反应。祖型变态反应。祖 国医学谓之“鼻鼽”。变应性鼻炎为耳鼻喉科门诊的常见病、多发病，病程长、易复发、疗 效不稳定为其特点，是临床治疗的一道难题。２００４～２００６年以来，我科对连续在 夏季三伏天采用中药（位贴敷配合常规变应性鼻炎对症治疗方法的３０８例患者进行追踪 观察，获得了较好的疗效，现报道如下。 １资料与方法 １．１一般资料 所观察病例均来自本院门诊。采用随机分组法分为观察组和对照组。其中对照组１５ ３例，男性８１例，女性７２例，年龄６～６７岁，平均年龄（３２±１４）岁，病程０． ５～２０年。观察组１５５例，男性７８例，女性７７例，年龄７～７０岁，平均年龄 （３４±１３．５）岁，病程０．５～２５年。两组性别、年龄、病程差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５），具有可比性。 １．２诊断标准［１］ 符合常年性变应性鼻炎病史：①反复发作史，具有鼻痒、喷嚏、鼻分泌物多和鼻塞４ 项症状中至少３项；②鼻腔黏膜苍白、水肿，下鼻甲肿胀；③实验室检查：ａ．变应原皮 肤试验呈阳性反应，至少有１种为＋＋或＋＋以上；ｂ．变应原鼻黏膜激发试验阳性。 １．３纳入标准 符合以上诊断标准；采集病例均为常年性变应性鼻炎；病程半年以上；年龄６～７０ 岁；无严重器质性疾病，不伴哮喘者；夏季三伏天症状发作期患者。 １．４治疗方法 对照组采用基础疗法，观察组在基础疗法上加用（位贴敷疗法。 １．４．１基础疗法采用１％麻黄素地塞米松液和２％色苷酸钠液交替滴鼻，每日３ 次。口服敏奇片，每次２ｍｇ，每日２次，疗程为２周。 １．４．２（位贴敷疗法①取（：肺俞、膻中、大椎、膈俞、脾俞、肾俞。②药物组 成：白芥子、细辛各占１５％，甘遂、白芷各占１５％，延胡索占１０％，附子、肉桂、 丁香各占１０％，上药共为细末，用老姜汁调成糊状，用专用纱布贴敷以上（位。③治疗 时间：在夏季农历三伏天（初伏、中伏、末伏）预约患者在该日治疗，每次敷贴时间３～ ６ｈ，３次为１个疗程。④注意事项：由于此法在贴敷处易起水泡，叮嘱患者不要搔破， 防止感染，如水泡较大，可穿刺放水，涂上碘酒，再用消毒纱布包敷。有明显热证者禁用。 １．５观察指标 根据疗效评定标准［１］将症状和体征进行分级计分观察。症状分级计分见表１。体 征分级：下鼻甲与鼻底、鼻中隔紧靠，见不到中鼻甲，或中鼻甲黏膜息肉样变，息肉形成， 计３分；下鼻甲与鼻中隔（或鼻底）紧靠，下鼻甲与鼻底（或鼻中隔）之间尚有小缝隙， 计２分；下鼻甲轻度肿胀，鼻中隔、中鼻甲尚可见，计１分。１．６疗效评定标准［１］ 根据治疗前后症状和体征计分，评定常年性变应性鼻炎的改善率计算公式： （治疗前总分－治疗后总分）／治疗前总分×１００％：改善率≥６６％为显效，２ ６％～６５％为有效，≤２５％为无效。 １．７统计学分析 计数资料采用 χ ２检验，计量资料采用ｔ检验。检验。 ２结果 ２．１两组疗效比较 观察组总有效率为８３．２％，对照组为６３．４％，两组比较，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０１）。见表２。 ２．２两组半年后复发情况比较 观察组复发率为４４．５％，对照组为８３％，两组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０１）。见表３。 ３讨论 变应性鼻炎属中医学“鼻鼽”范畴。其多因患者素体虚寒，感受风寒或异气而发病，尤 其是气候突变时明显。该病以寒和虚为特点，祖国医学用取类比象的方法抽象概括其特点， 喻为四季的冬季，故谓之“冬病”［２］。“冬病夏治”疗法是我国传统中医药疗法中的特色疗 法，它是根据《素问·四气调神论》中“春夏养阳”的原则［３］，将运气学说与天灸疗法融 合在一起，在人体的（位上进行药物敷贴，通过经络而刺激全身，以祛除肺中内伏寒邪， 补益人体阳气，从而驱逐宿邪，疏通经络，鼓舞正气，增加机体抗病能力，而达到防治疾 病的目的。中医认为：夏季农历三伏天天气炎热，为 1 年中阳气最旺的季节，此时人体腠 理疏松，经络开放，血流畅通。若此时在背部俞（敷以辛温逐痰走窜的中药来达到温肺利 气，驱除肺中内伏寒邪以补益人体阳气，从而全面调整脏器功能，提升正气，提高人体免 疫力，可有效减轻冬季多发病的症状，促进疾病向好的方向转变。现代药理研究证明，贴 敷的药物可以经皮吸收，刺激（位，通过反射弧有效地刺激大脑皮层，使之兴奋与抑制过 程达到协调，降低变应性。另外药物在较长时间内的刺激作用可在大脑皮层形成一个新的 兴奋灶，从而改变丘脑－垂体－肾上腺皮质系统的机能状态［４］；另外药物贴敷后，在 局部形成有效的界点，在该点以某种形式存在聚集着的高能量物质分子从基态飞跃到激发 态，从而影响生物能量的转化、扩散和消耗，进而调节内分泌平衡和促进免疫功能恢复 ［５］。在三伏天取肺俞、膻中、大椎（位以宣通肺气，使邪从表解；取膈俞、脾俞、肾 俞健脾补肾，增强机体抗病能力。方用白芥子、细辛、甘遂、白芷、延胡索等中药温经通 阳开窍，附子、肉桂、丁香散寒利气，取扶正祛邪目的。本法的综合治疗机制是补益脾肺， 调节脏腑，刺激经络，改善体质，减少发病等；同时又融合了中医的运气学说、经络学说 以及现代治疗学和免疫学等诸多学科理论。 对于该病的治疗，尽管目前有许多见效快、疗效好的药物和方法，能很快控制症状， 但易复发且临床难以根治。在采取常规基础疗法的基础上，再进一步进行综合性治疗，能 有效减少该病复发率。本次结果显示，观察组与对照组总有效率以及半年后的复发情况比 较，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。因此，三伏天中药（位敷贴治疗变应性鼻炎， 廉价方便，无不良反应，可达到标本兼治的目的。 摘要：目的对细叶杜香石油醚和三氯甲烷部位的化学成分进行研究。方法利用硅胶柱 层析进行分离纯化,根据理化性质和波谱学数据进行结构鉴定。结果分离并鉴定了 5 个化合 物,分别为 5-羟基-4μm′,7-二甲氧基黄酮,正二十八烷醇,东莨菪内酯,oleuropeicacid 和秦皮素。 结论正二十八烷醇和 oleuropeicacid 均为首次从杜香属植物中分离得到。 关键词：细叶杜香;化学成分;正二十八烷醇;oleuropeicacid Abstract:ObjectiveToinvestigatethechemicalconstituentsofthepetroleuman dthechloroformextractsofLedumpalustreL.Var.AngustumE.Busch.MethodSilica gelcolumnchromatographywasusedtoseparateandpurifythechemicalconstituen ts.Thestructureswereelucidatedonthebasisofphysicochemicalpropertiesandspe