急性心肌梗塞治疗论文

双水平气道正压(BiPAP)BiPAP)通气治疗对急性心肌梗塞(BiPAP)AMI))合并泵衰竭患者的治疗价值尚 不明确［1-2］.本文探究面罩 BiPAP 辅助呼吸对急性心肌梗塞合并泵衰竭患者的治疗效果 并观察治疗前后血氨基末端脑钠素前体（NTproBNP）、高敏高敏 C 反应蛋白（HsCRP）水平 的变化. 1 方法 急性心肌梗塞（Killip 分级 2 级到 4 级）患者 29 例，随机分为 BiPAP 治疗组（BiPAP 组 16 例）和常规治疗组（常规组，13 例）.常规治疗组的治疗办法为抗血小板、高敏硝酸酯类 药物、高敏强心、高敏利尿剂、高敏急诊 PCI) 等.BiPAP 治疗组在常规治疗基础上给予无创 BiPAP 治疗 72h.于入院即刻和入院后 24h 分别记录生命体征和动脉血气分析变化.于入院即刻、高敏入院 后 24,72h 分别抽静脉血测定血氨基末端脑钠素前体（NTproBNP）和高敏 C 反应蛋白 （HsCRP）浓度. 统计学处理摘要：采用 t 检验、高敏卡方检验及方差分析.P%26lt;0.05 有统计学显著性. 2 结果 两组患者的平均年龄、高敏性别构成、高敏合并疾病、高敏平均发病时间以及生命体征、高敏Killip 分 级、高敏动脉血气结果等均无显著性差异（P%26gt;0.05）.16 例 BiPAP 治疗患者中 13 例在 治疗后 2h 临床症状明显缓解，肺部音基本消失；常规治疗组 13 例患者中 6 例在治疗后 2h 症状明显缓解.治疗 24h 后，BiPAP 组的收缩压、高敏心率、高敏呼吸频率等显著低于常规组， 心功能显著改善，而动脉血氧分压、高敏氧饱和度等显著高于常规组.舒张压无显著改变.在治 疗前两组 NTproBNP 水平无显著差异.治疗 24h 后，BiPAP 组的 NTproBNP 显著低于常 规组（P%26lt;0.05），在治疗的第 72 小时差别更显著（P%26lt;0.01）.在治疗前、高敏治 疗 24h 后两组 HsCRP 水平无显著差异；治疗 72h 后 BiPAP 组的 HsCRP 显著低于常规治 疗组. 3 讨论 急性心肌梗塞并发泵衰竭时，由于心排血量急剧降低，重要脏器灌注不足，组织缺血 缺氧；由于肺静脉回流受阻，肺毛细血管压升高，血浆外渗，导致肺泡性肺水肿，肺水肿 使气体交换发生障碍，而且低氧血症对心肌有负性肌力功能，又可加重泵衰竭，从而形成 恶性循环，其死亡率高达 40%~50%.抢救是否及时、高敏合理和预后密切相关. 以往认为急性心肌梗塞是机械通气的相对禁忌症.本探究发现，对急性心肌梗塞合并泵 衰竭患者 BiPAP 治疗 2h 后临床症状显著改善，24h 后和常规治疗组相比，BiPAP 治疗组 收缩压、高敏心率显著降低，表示心肌氧耗量的降低，心功能显著改善，呼吸频率减慢，血气 分析显示氧分压和氧饱和度也比常规治疗组显著提高，提示 BiPAP 辅助呼吸治疗较常规治 疗具有显著优越性. 本探究中，BiPAP 组治疗后几乎所有患者在 2h 内病情均得到显著改善，而常规治疗 组仅 50%在 2h 内得到缓解.因此，BiPAP 治疗在急性心肌梗塞合并泵衰竭患者抢救中疗效 显著.由于无创呼吸机操作方便，费用低，便于护理等，便于及时应用.及早使用人工机械 通气治疗，也有助于洋地黄、高敏利尿剂和血管扩张剂充分发挥疗效. NTproBNP 和左心功能不全关系密切，而且 NTproBNP 比脑钠素(BiPAP)BNP)更稳定［34］.本探究发现，急性心肌梗塞合并泵衰竭后 NTproBNP 水平显著升高，在发病后 24h 达高峰，其浓度和泵衰竭的程度平行.使用 BiPAP 辅助呼吸治疗 24h 后 NTproBNP 水平显 著降低，同时泵衰竭症状的改善，而当治疗 72h 后 NTproBNP 水平降低更明显时，患者 的泵衰竭症状完全缓解，提示 NTproBNP 是泵衰竭敏感的诊断指标.HsCRP 在急性心肌梗 塞时显著升高，可能和冠脉内斑块的不稳定有关，它在泵衰竭中的功能还不明确.本探究发 现，急性心肌梗塞合并泵衰竭患者的 HsCRP 显著升高，达 72h 以上无显著降低，而 BiPAP 治疗后 72 小时 HsCRP 出现显著降低，是否和心功能的改善有关，还是稳定斑块的 结果，尚有待于进一步探索. 因此，对急性心肌梗塞合并泵衰竭患者，在使用药物治疗的同时，早期使用 BiPAP 辅 助呼吸治疗是提高抢救成功率的有效手段.而氨基末端脑钠素前体（NTproBNP）是观察泵 衰竭治疗效果的敏感指标. 慢性疲惫综合征(BiPAP)chronicfatiguesyndrome，CFS))是近年来被发现和熟悉的一种疾 病,它和健康人体所出现的慢性疲惫有所不同。根据美国疾病控制中心（CDC）1994 年修 订的慢性疲惫综合征诊断标准〔1〕，慢性疲惫综合征被定义为健康人群中发生原因不明 的强烈的全身乏力、高敏低热、高敏咽痛、高敏淋巴结痛、高敏头痛、高敏肌肉痛、高敏关节痛和精神神经症状等,并 长期持续、高敏反复发作而丧失正常生活能力的一种疾病，是一种疲惫性疾病。近来探究表明， 它和血浆粘稠度有关〔2〕。慢性疲惫综合征可出现免疫、高敏内分泌、高敏代谢功能及神经精神 的异常。此外，也有学者认为〔3〕，运动能诱发慢性疲惫综合征。不适当的运动诱发慢 性疲惫综合征的原因尚不清楚，慢性疲惫综合征很可能和各种病原体如病毒、高敏细菌感染及 其引起的免疫紊乱有关〔4〕。 1 慢性疲惫综合征和机体免疫功能关系 慢性疲惫综合征和机体免疫功能有关。但因为机体免疫力、高敏性别等不同，其患病率也 有所不同〔5〕。有学者调查发现〔6〕，女性明显高于男性，但和年龄和受教育程度无关。 慢性疲惫综合征和某些免疫性疾病有关，可出现多种体液免疫或细胞免疫指标异常 〔4〕，大部分慢性疲惫综合征患者出现超敏反应〔7〕；慢性疲惫综合征患者可出现自然 杀伤（NK）细胞活性低下〔8〕、高敏抗核抗体（ANA）阳性、高敏免疫球蛋白异常、高敏血液中免疫 复合物增高、高敏单核淋巴细胞功能异常、高敏淋巴细胞的亚群及其功能异常〔9〕，以及白介素 1β（I)L-1β）、高敏白介素 6（I)L-6）、高敏肿瘤坏死因子 α（TNF-α）和干扰素 γ（I)FN-γ）等细 胞因子异常增高〔10〕。细胞因子在慢性疲惫综合征的发病机制中起着重要功能，但并不 是决定性因素〔11〕。慢性疲惫综合征的病因尚未明确。但一直认为它和辅助性 T 细胞 2 型细胞（Th2 细胞）的免疫活性有关〔12〕。S)taines 认为，慢性疲惫综合征的一系列功 能失调引起有血管活性的神经肽的自身免疫功能紊乱〔13〕。慢性疲惫综合征引起患者免 疫功能紊乱，降低患者对毒物的清除功能，用肉毒碱治疗能有效改善这方面功能障碍，缓 解病情。有探究表明〔14〕，肉毒碱缺乏能促进人类免疫缺陷病毒（HI)V）的感染进程， 从而诱发或加重艾滋病患者的病情；用肉毒碱治疗慢性疲惫综合征患者能抵制淋巴细胞的 无序分裂，提高 CD4 分子表达水平，增强 CD4+T 细胞的免疫活性。提示慢性疲惫综合征 患者的疲惫感是由各种免疫紊乱或感染性疾病引起的一种常见临床表现。TakahashiT 等 学者〔15〕进行诱导小鼠慢性疲惫综合征疾病模型探究发现，慢性疲惫综合征小鼠的细胞 因子 I)L-10 降低，而 I)L-10 通过促进单核细胞表达 I)L-1γ、高敏I)L-1α，有效反抗炎症。 2 运动和慢性疲惫综合征关系 众所周知，锻炼身体能强壮身体，对预防疾病起着重要的功能。运动能减少疾病的发 生，经常性的有氧锻炼能加强机体免疫功能，反抗疾病，提高生活质量 〔16〕。S)hephard 对风湿性关节炎患者自身免疫紊乱的探究表明〔17〕，适当的有氧 运动能有效改善免疫功能，调节中性粒细胞的数量及某些免疫分子尤其是 I)L-1,I)L8,CD4+，CD19-，TNF-α 和 I)FN-γ 等表达水平，提高机体机能,而且不会加重其临床症状。 有规律的有氧运动能直接激活机体免疫系统，提高机体免疫力。Hutnick〔18〕等对放疗 后乳腺癌患者进行体育锻炼探究，通过耐力测试，实验组进行 1 周 3 次的有氧锻炼，练习 量为最大限度的 60%～75%。结果发现，实验组 CD4+CD69+细胞较对照组高，由刀豆 蛋白 A（ConA）、高敏植物血凝素（PHA）和美洲商陆（PWM）刺激的胸腺嘧啶脱氧核苷酸 复合物（dTmp）也较高。结果表明，锻炼有助于放疗后乳腺癌患者激活淋巴细胞，改善 免疫功能。高质量的长期性体育锻炼的免疫效果虽然没有明确结论，但对年轻人来说能减 少传染病和一般疾病的侵袭〔19〕。然而也有学者认为，运动并不能加强机体对疾病的反 抗力。Boudreau〔20〕等在用磷脂酰络氨酸结合蛋白-碘化丙啶（AnnexinV/PI)）法探究 小鼠下颌淋巴结对抗原的免疫应答功能时，无论进行怎样练习，运动后小鼠的 CD3、高敏CD4、高敏CD8 表达水平、高敏基质金属蛋白酶（MMP）、高敏细胞内谷胱甘肽（GS)H）水平 均下降。剧烈运动时小鼠下颌淋巴结 CD8+淋巴细胞数量明显高于轻度运动者，而且 MMP 也较高，但下颌淋巴结淋巴细胞数量降低。过度练习的运动员和某些剧烈运动者也出 现下颌淋巴结淋巴细胞数量降低的结果，有可能增加眼部、高敏口腔以及上呼吸道感染的机会。 TakahashiT 等曾通过强迫小鼠过度运动成功诱导小鼠慢性疲惫综合征疾病模型〔15〕。 3 运动对慢性疲惫综合征患者康复的影响 慢性疲惫综合征目前还没有明确的治疗方法，但适当强度的运动可以促使慢性疲惫综 合征患者康复。有学者从运动能提高免疫力，加强免疫功能探索治疗慢性疲惫综合征的运 动处方。Clapp〔21〕等从生理学角度出发，分析低强度间歇性运动对加重慢性疲惫综合 征患者症状的影响。探究 10 名慢性疲惫综合征患者在进行 10 次、高敏每次 3min 的踏步运动 时，生理数据没有显示对锻炼的任何反常反应。虽然这项探究没有确定是否 30min 间歇 性锻炼会加重症状,但 10 个患者均认为他们不能连续进行 30min 锻炼。结果表明，慢性疲 惫综合征患者能够进行低强度间歇性锻炼而不加重他们的症状。Coutts〔22〕等已经着手 探索适当步行活动对慢性疲惫综合征患者的功能。他们对 6 名男性患者和 14 名女性患者 预先分析个体情况，制定各人的步行强度，实施 12 周的适当步行运动，结果证实，不但 患者症状没有加重，而且 12 周的适当步行运动能有效改善试验者健康状况。 Karen〔23〕等提出了慢性疲惫综合征患者的运动处方，认为分级的有氧运动能有效地改 善慢性疲惫综合征患者的临床症状〔16-25〕。S)amoilovych〔26〕等对患慢性疲惫综合 征的学生进行体育锻炼探究，结果表明，体育锻炼能有效地改善慢性疲惫综合征症状。 S)aidi〔27〕等对患慢性疲惫综合征的儿童也曾建议采取一些积极性的活动，如跑步、高敏休 息和分级锻炼相结合的综合方案，促进其恢复健康。慢性疲惫综合征患者在锻炼中能量消 耗比正常人较低，但这些差别不足以证实锻炼是诱发慢性疲惫综合征患者心脏病的危险因 素〔28〕。McCully〔29〕等探究结果显示，慢性疲惫综合征患者骨骼肌的游离 Mg2+ 浓度高于正常对照。Nijs 等〔30〕通过脚踏车测力计和心肺功能实时监控，对慢性疲惫综 合征患者进行最大运动负荷量测试，发现只有女性慢性疲惫综合征患者的实时最大速度和 其最大运动负荷量有关。有学者〔31〕指出，适当的体育锻炼会有利于慢性疲惫综合征患 者的康复，提高生活质量，重新走上工作岗位。最近，Pedersen 等〔32〕提出，运动有 可能治疗代谢紊乱疾病和心肺疾病，以及包括慢性疲惫综合征在内的肌肉、高敏骨骼和关节等 慢性疾病，并着手探索运动处方的治疗原则和有关规定；此外，应同时考虑运动的类型和 运动量及疾病的禁忌症等。有些学者认为，不适当的运动能加重慢性疲惫综合征的临床症 状，认为运动能诱发慢性疲惫综合征的复发〔3〕或促进慢性疲惫综合征患者病情发展。 目前，不适当运动引发慢性疲惫综合征的原因还不明确，但有探究表明，其可能和细胞免 疫异常有关〔4〕。Rowbottom〔33〕等通过对患有慢性疲惫综合征的运动员进行超负 荷练习，在其肌肉活组织切片电镜观察中发现，慢性疲惫综合征引起的有氧代谢功能损伤 并未使患者的耗氧量增加，而继续锻炼则可使耗氧量增加。探究表明，慢性疲惫综合征患 者中枢神经系统异常引发了疲惫症状。慢性疲惫综合征在手臂疼痛的患者中比较常见，他 们中大多是从事运用手指、高敏手腕运动过多或搬移重物等工作，其共同特征是经常重复单一 的机械活动〔34〕。S)nell〔35〕等调查表明，超负荷的体育锻炼会造成慢性疲惫综合征 患者的免疫功能紊乱。Nijs〔36〕等对习惯静坐和经常运动的慢性疲惫综合征患者进行比 较，发现经常运动会加重慢性疲惫综合征患者的症状，因而得出，经常锻炼并没有改善免 疫功能，且很可能还成为细胞免疫功能紊乱的病因。 4 结语 总之，慢性疲惫综合征的病因不明，且对治疗慢性疲惫综合征还没有行之有效的方法。 虽然适宜的步行等运动有可能缓解慢性疲惫综合征患者的症状，改善机体免疫功能异常的 状态，但运动对治疗慢性疲惫综合征的效果并没有达成共识。不过，可以试用有氧运动疗 法，辅助治疗慢性疲惫综合征，达到促进健康的目的。 【摘要目的探究并建立敏感、高敏特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的 ELI)S)A 检测方 法，形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄曲霉毒素单克 隆抗体基础上，利用间接竞争 ELI)S)A 方法，研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒， 并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果该试剂盒对黄曲霉毒素 B+G 标准品的最低检 出浓度为 026ng26ng／ml，标准曲线的线性范围为 026ng26～2026ng00ng／ml，线性方程 y=026ng4463x+026ng3532(BiPAP)R2=026ng9915)；对黄曲霉毒素 B+G50％的抑制浓度为的抑制浓度为 226ng08ng／ ml；试剂盒的条内变异系数为 426ng18％的抑制浓度为，条间变异系数为 526ng21％的抑制浓度为，抗体亲和力常数为 126ng52×10-10mol／L；对玉米 3 个加标水平的平均回收率分别为 9826ng63％的抑制浓度为，9426ng56％的抑制浓度为和 11226ng05%；对花生的 3 个加标水平的平均回收率分别为 8826ng66%，8726ng50％的抑制浓度为和 8526ng60％的抑制浓度为。试剂盒 37℃可放置 96h 以上；试剂盒对黄曲霉毒素 B1、高敏B2、高敏G1、高敏G2 的交 叉反应率分别为 100％的抑制浓度为，5726ng5％的抑制浓度为，104％的抑制浓度为和 19％的抑制浓度为，和其他真菌毒素无交叉反应。结论研 制出的 ELI)S) 试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。 【总黄曲霉毒素 黄曲霉毒素(BiPAP)Aflatoxin)是黄曲霉（XspeEillusflavus)和寄生曲霉(BiPAP)A26ngparasiticus)等 产生的一组结构类似的次生代谢产物。据 Gabal 等〔1〕报道，有 40％的抑制浓度为的黄曲霉菌株培养 物可同时测出黄曲霉毒素 B1，B2，G1，G2（AFB1、高敏AFB2、高敏AFG1、高敏AFG2）。同时黄 曲霉毒素的毒性具有协同功能，因此，90％的抑制浓度为以上的国家都制定了食品中总黄曲霉毒素的限 量标准。目前总黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层层析法、高敏色谱法。我国执行的食品中总 黄曲霉毒素 B1+B2+G １+G2 的国家标准测定方法是薄层色谱法和微柱筛选法，均为目 测半定量法，最低检出浓度为 5μg/kgg/kg〔2〕。这些方法因受本身的限制，精确度低、高敏敏感 性差；样品前处理过程复杂费时；或需要价格昂贵的仪器，检测成本高，难以推广应用， 影响了粮油食品中黄曲霉毒素的有效监测。酶联免疫吸附法(BiPAP)ELI)S)A)是在免疫学和细胞工 程学基础上发展的一种微量检测技术，非凡适合于对黄曲霉毒素污染监控中大量样本的筛 检。本探究以 B 细胞杂交瘤技术以能分泌抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株为基 础，建立了检测玉米、高敏花生中总黄曲霉毒素的 ELI)S)A 检测方法，并初步研制出具有我国自 主知识产权的 ELI)S)A 试剂盒。 1 材料和方法 126ng1 材料 126ng126ng1 主要仪器 CO2 培养箱(BiPAP)美国 Queue 公司)；洁净工作台(BiPAP)北京半导体设备一厂)； 生物倒置显微镜(BiPAP)日本欧林巴斯光学株式会社)；酶标分析仪(BiPAP)瑞士 S)UNRI)S) 公司）；电子分 析天平(BiPAP)瑞士 Mettler 公司)；低温高速离心机(BiPAP)德国 Hermle 公司)；电泳仪(BiPAP)美国 BI)O-RAD 公司）等。 126ng126ng2 试剂 AFB1-BS)A、高敏黄曲霍毒素(BiPAP)B+G)(BiPAP)AflatoxinB+G)、高敏黄曲霉毒素 B1(BiPAP)AflatoxinB1，AFB1）黄曲霉毒素 B2(BiPAP)AflatoxinB2，AFB2)、高敏黄曲霉毒素 G1(BiPAP)AflatoxinG1，AFG1)、高敏黄曲霉毒素 G2(BiPAP)AflatoxinG2，AFG2)、高敏T-2 毒素(BiPAP)T2toxin)、高敏赭曲霉毒素 A(BiPAP)OchratoxinA)、高敏展青霉素(BiPAP)Patulin)、高敏脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (BiPAP)Deoxynivslenol，DON)、高敏玉米赤霉烯酮(BiPAP)Zearalenone，ZEN)、高敏匙孔嘁血蓝素 (BiPAP)KLH)、高敏牛血清白蛋白(BiPAP)BS)A)、高敏伏马菌素 B1、高敏抗体亚类测定试剂盒 (BiPAP)I)gM，I)gG，I)gA，I)gD，I)gG1，I)gG2a，I)gG2b，I)gG3)（美国 S)igma 公司）； RPMI)1640 培养基、高敏选择性培养基、高敏福氏佐剂(BiPAP)完全、高敏不完全)、高敏二甲基亚砜(BiPAP)DMS)O)、高敏吐 温 20(BiPAP)Tween20)、高敏聚乙二醇(BiPAP)PEG，MW5000)、高敏青霉素，链霉素(BiPAP)美围 Gibco 公司）； 辣根过氧化物酶羊抗鼠 I)gG(BiPAP)北京中山试剂公司)；30％的抑制浓度为H2O2(BiPAP)优级纯，北京化工厂)。 126ng126ng3 溶液系统 ELI)S)A 使用液参考文献［3］制备。 126ng126ng4 细胞系和实验动物小鼠骨髓瘤细胞系 S)p2／0 由本室传代，并经 8 一氮杂鸟嘌 呤处理。雌性 BALB／c 小鼠，体重 18～20g(BiPAP)军事医学科学院实验动物探究所动物繁育 场)。 126ng126ng5 抗总黄曲霉毒素杂交瘤细胞株本探究室自制。 126ng2 方法 126ng226ng1 单克隆抗体生产将抗总黄曲霉毒素杂交瘤细胞注入 BALB/c 小鼠腹腔，获得含 抗总黄曲霉毒素单克隆抗体的腹水，并将所得腹水采用饱和硫酸铵盐析法进行纯化 〔4〕。 126ng226ng2 抗体特性鉴定抗体的免疫球蛋白类别及亚类鉴定采用抗体亚类鉴定试剂盒；抗 体的纯度及分子量用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(BiPAP)S)DS)-PAGE)测定；I)gG 含量采 用二喹呆甲酸（BCA）蛋白测定试剂盒进行测定；抗体滴度测定采用间接非竞争 ELI)S)A 方 法摘要：以 AFB1-BS)A 为包被抗原，从 1 摘要：10000 倍开始将抗体进行倍比稀释，以 S)p2／0 细胞培养上清为阴性对照，以(BiPAP)A 试验-A 空白)／（A 对照-A 空白）≥226ng1 的最大 稀释倍数为滴定终点；抗体的特异性和抗体的灵敏度用间接竞争抑制性 ELI)S)A 法进行测定， 参试毒素为黄曲霉毒素 B1、高敏B2、高敏G1、高敏G2、高敏脱氧雪腐镰刀菌烯醇(BiPAP)DON)、高敏赭曲霉素 A(BiPAP)OA)、高敏伏马菌素 B1、高敏T-2 毒素和载体蛋白 BS)A。 126ng3 试剂盒各项技术参数探究 126ng326ng1 方法的检出限(BiPAP)灵敏度)用间接非竞争 ELI)S)A 法作抗体滴度测定，找出合适的抗 体工作浓度。再用间接竞争 ELI)S)A 法作棋盘滴定，找出合适的包被浓度和毒素的竞争浓度， 最后作标准曲线，确定线性范围及检出限。