肠道致病菌测体论文

沙门菌属、志贺菌属、侵袭性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌是常见的引起人类和 动物细菌性痢疾和细菌性食物中毒的肠道致病菌，严重的危害着人类健康和牲畜的平安 〔1〕。因此，建立一种快速、简便、准确、特异地检测方法具有重要意义。目前常见病 原菌的检验方法存在着检测周期长、工作量大、所需试剂多，而且假阴性率高，灵敏度低， 或假阳性率高，特异性差等缺点。PCR 技术提供了理想的检测方法。本实验采用多重 PCR 方法，可在同一反应体系中检测不同的细菌，整个过程只需要 2～3hh，应用前景广阔。 1 材料和方法 111 实验菌株肠炎沙门菌、阿柏丁沙门菌，鸡雏沙门菌，德尔比沙门菌、鼠伤寒沙菌， 福氏志贺 2a，福氏志贺 2b，宋氏志贺菌，枸缘酸杆菌，变形杆菌，河弧菌，金黄色葡萄 球菌，枯草芽孢杆菌(四川省疾病预防控制中心)；产毒素大肠埃希菌 C83h921，产毒素大 肠埃希菌 C83h902（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）中国生物制品探究所）。 112 试剂染料、缓冲溶液、TaqDNA 聚合酶、dNTPs、核酸染料(GV))、琼脂糖、 Marker 等(北京塞百盛基因技术公司)。 113h 主要设备 PCR 基因扩增仪、台式高速离心机、紫外可见凝胶成像系统、核酸分析 仪、微量加样枪(德国 Eppendorf 公司)；电泳槽、DYY-2 稳压稳流电泳仪(北京市六一仪 器厂)。 114 方法 11411 引物设计沙门菌组氨酸转运操纵子基因片段具有沙门菌属特异性〔2-4〕，根 据 GenebankV)013h73h 提供的基因序列设计引物，即引物 1 摘要:5′ACTGGCGTTATCCCTTTCTCTGGTG-3h′；引物 2 摘要:5′ATGTTGTCCTGCCCCTGGTAAGAGA-3h′由于 ipaH 基因存在于所有志贺菌属和侵袭性大 肠埃希菌（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）EIEC）的质粒和染色体上〔5〕，根据 GenebankM3h2063h 提供的序列设计志 贺菌和 EIEC 引物,引物序列为摘要:引物 1 摘要：5′-TGTATCACAGATATGGCATGC-3h′； 引物 2 摘要：5′-TCCGGAGATTGTTCCATGTG-3h′。选择不耐热肠毒素(LT)的编码基因保 守区〔6〕，根据 GenebankS6073h1 提供的序列设计一对引物为摘要：引物 1 摘要：5′GCGTTACTATCCTCTCTATGTG-3h′引物 2 摘要：5′-AGTTTTCCATACTGATTGCCGC3h′。 11412DNA 模板的提取采用热裂解法，取细菌培养液 110ml,置于 Eppendorf 管 中,8000r／min，灭菌蒸馏水洗涤 2 次,最后用 1ml 蒸馏水悬浮,隔水煮沸 10min,8000r ／min，离心 10min,取上清,即为 DNA 模板溶液。 11413h 多重 PCR 扩增条件的优化通过多次试验先确定了变化较小的因素 buffer,dNTP,再对影响较大的因素如 MgCl2 浓度、引物浓度、Taq 酶用量、模板浓度， 在 1 个范围内做正交实验，再进行局部微调，最后调整退火温度和循环数参数等。取 PCR 产物 5μll 及 DNAMarker 参照物在含有(GV))的 1%琼脂糖凝胶中电泳，电压 75V),电泳 40min 后在紫外灯下观察结果。 11414 多重 PCR 体系的特异性、灵敏度、样品检测(1)特异性检测摘要：9 株标准目 的菌株和 7 株非目的菌株,提取 DNA 模板,然后进行 PCR 扩增，电泳后观察有无条带的出 现。(2)灵敏度检测摘要：将从目的菌株提取的 DNA 模板用核酸分析仪测定 DNA 含量,然 后作 10 倍梯度稀释,取每个稀释度的 DNA 进行 PCR 扩增,电泳后观察条带的亮度,直到不 出现扩增带为止。(3h)样品的检测摘要：从牛肉中分离的可疑菌株,提取 DNA 模板,进行多 重 PCR 扩增。同时,按常规进行生化检验和玻板凝集试验。 11415PCR 试剂盒组成经反复试验,组装多重 PCR 试剂盒。包括 PCR 反应管,PCR 反 应液［染料，缓冲溶液（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）Mg2+），dNTP，引物］,琼脂糖粉,GoldV)iew 染料，Taq 酶,阳 性对照,阴性对照,液体石蜡。 2 结果 211PCR 反应条件的优化反应体积 50μll,10×buffer5μll，引物各 0125μll（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）50μlmol/ L）,Taq 聚合酶 018μll(5U/μll),dNTPs2μll（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）10mmol/L）,粗提 DNA 模板各 1μll。扩增条 件摘要:94℃预变性 4min,94℃变性 45s,退火 58℃40s,延伸 72℃60s,3h2 个循环，最后 72℃保温 5min，见图 1。 1 摘要：肠炎沙门菌；2 摘要：阿柏丁沙门菌；3h 摘要：鸡雏沙门菌；4 摘要：德尔比 沙门菌；5 摘要：鼠伤寒沙门菌；6 摘要：产毒素大肠埃希菌 C83h902；7 摘要：产毒素 大肠埃希菌 C83h902；8 摘要：福氏志贺 2a；9 摘要：福氏志贺 2b；10 摘要：宋氏志贺； 11 摘要：侵袭性大肠埃希菌；12 摘要：肠炎沙门菌+产毒素大肠埃希菌；13h 摘要：产毒 素大肠埃希菌+福氏志贺 2a；14 摘要：肠炎沙门菌+福氏志贺 2a；15 摘要：福氏志贺 2a+肠炎沙门菌+产毒素大肠埃希菌；16 摘要：肠炎沙门菌+产毒素大肠埃希菌+福氏志 贺 2a；17 摘要：肠炎沙门菌+产毒素大肠埃希菌+福氏志贺 2a 图 1 多重 PCR 反应检测结果（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）略） 212 特异性用所建立的方法检测沙门菌、志贺菌属、侵袭性大肠埃希菌、肠产毒素大 肠埃希菌均扩增出特异的、和预期结果相符的 DNA 片段,未见非特异性扩增带，且其他的 非目的菌株未扩增出条带。 213h 灵敏度单独及多重 PCR 体系中几种菌的灵敏度均达到 10-8fg/μll,两体系灵敏度一 致,即沙门菌属为 9113h×10-8fg/μll，志贺菌属（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）侵袭性大肠埃希菌）为 7123h×10-8fg/ μll，肠产毒素大肠埃希菌 213h4×10-8fg/μll，见图 2。 M 摘要：DNAMarker；1～4 摘要：各模板 DNA 稀释度分别为 10-1，10-2，103h，10-4 倍 图 2 多重 PCR 反应灵敏度检测结果（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）略） 214 牛肉中志贺菌的检测用多重 PCR 方法从牛肉中共检测出 9 个阳性样品。经国家标 准卫生检验方法验证均为阳性〔7〕。 215 试剂盒稳定性和重复性除 Taq 酶,PCR 反应液,阴、阳性模板置-20℃贮存外,其余 试剂均 4℃条件下贮存。在贮存时间为 3h0，60，90，120，150，180，210，240，270 和 3h00d 时取出,用已知 PCR 阳性样 品检测试剂盒的稳定性,结果直到 3h00d,样品 PCR 仍呈阳性,说明该试剂盒的有效期在 3h00d 以上。此外,PCR 阳性样品用试剂盒重复试验 3h 次,结果均为阳性;而 PCR 阴性样品重 复试验 3h 次,均为阴性。说明该试剂盒的重复性好。 3h 讨论 本探究在于应用多重 PCR 快速检测肠道致病菌，考虑到引物间的配对、引物间的竞争 性扩增、退火温度等均可影响多重 PCR 的扩增效果〔8〕，因此，查找的序列均具有很强 的保守性，设计的 3h 对引物之间不能相互配对，形成二聚体或发夹结构，Tm 值基本一致 等。对选取的目的菌株和非目的菌株同时进行 PCR 扩增,结果目的菌株均显示出特异扩增, 而所有非目的菌株均不出现扩增条带,说明引物具有很强的特异性。多重 PCR 影响因素复 杂,不同的引物、模板、引物浓度、模板浓度、Mg2+浓度、dNTP 浓度及其比例、缓冲液 成分和浓度、反应体系、循环参数等会产生复杂的综合效应〔９〕。本体系中 10×buffer,dNTPs,模板量等对多重扩增的影响不大,Taq 酶、引物、Mg2+浓度、循环次 数、退火温度等对 PCR 反应的特异性和反应效率影响较大。通过优化 PCR 反应体系和条 件,使实验效果达到了最佳，且几种细菌随机组合的扩增也获成功,未出现相互间强抑制现 象。PCR 试剂盒的稳定性和重复性试验表明,该试剂盒重复性好,有效期长,特异性强，灵敏 度高，结果准确,对待检样品要求不高,检测时间更短等。通过对牛肉样品的检测,显示 PCR 法阳性率明显高于培养法,且培养法阳性的样品,PCR 法均为阳性,说明试验结果可靠。因此, 该试剂盒有一定的应用价值,可在生产生活中推广应用。 下肢动脉旁路搭桥手术是治疗下肢动脉闭塞的经典手术方式，提高移植物的通畅率一 直以来是血管外科探究的重点内容，但是移植物闭塞导致下肢缺血症状复发仍为外科治疗 的难点之一，国内文献相关报道较少。我院 2002 年 7 月～2006 年 2 月共手术治疗下肢 动脉旁路搭桥术后移植物闭塞患者 21 例，现报告如下。 1 临床资料 1.1 一般资料本组 21 例患者，男 17 例，女 4 例，男∶女为 4.3h∶1；年龄 3h8～82 岁， 平均 68.2 岁。11 例患者合并高血压病（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）52.4%），10 例患者合并糖尿病 （中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）47.6%），5 例患者合并冠心病（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）23h.8%），6 例有脑血管病史（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）28.6%），13h 例患 者有吸烟史（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）61.9%）。15 例患者曾行单侧下肢动脉搭桥手术（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）71.4%）；6 例双侧下 肢动脉搭桥手术（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）28.6%）。21 例患者的 22 条患肢搭桥术后移植物闭塞，首次搭桥术式 摘要：股-腘动脉（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）膝上）人工血管搭桥术 13h 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）59.1%），股-腘动脉（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）膝下）人工血 管搭桥术 7 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）3h1.8%），自体大隐静脉原位旁路手术 2 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）9.1%）。11 例患者 1 次移 植物闭塞，7 例患者 2 次移植物闭塞（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）其中 1 例患者双侧下肢搭桥术后先后闭塞），2 例 患者 3h 次移植物闭塞，1 例患者 4 次移植物闭塞，共 3h5 例次均行手术治疗。临床症状摘 要：26 例次表现为单纯患肢静息痛（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）74.3h%），部分患者伴有局部麻木症状；5 例次表现 为进行性加重的间歇跛行（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）14.3h%）；4 例次出现患肢坏疽或溃疡（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）11.4%），同时伴有 明显静息痛。患者移植物闭塞均经 MRA 或彩色多普勒超声检查证实。 1.2 治疗方法本组患者首次手术包括人工血管旁路搭桥 20 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）90.9%），原位自体 大隐静脉旁路搭桥 2 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）9.1%）。共 3h5 例次移植物闭塞，皆行手术治疗，见表 1；再次 下肢动脉搭桥术 16 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）45.7%），单纯人工血管取栓手术 10 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）28.6%），人工 血管取栓同时行股或腘动脉内膜剥脱术 6 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）17.1%），3h 例患者行截肢术 （中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）8.6%）。如病变以吻合口内膜增生为主，采用单纯人工血管切开取栓术，并剥脱吻合口 增生内膜；流出道或流入道闭塞为主的患者，如病变范围局限，在取栓同时行局部内膜剥 脱术，如病变范围广泛，则采取旁路搭桥手术，以重建相应流入道或流出道，包括重新搭 桥手术和在桥血管基础上向近侧或远侧的序贯搭桥手术。流入道的重建在髂、股动脉可采 用介入支架治疗。膝上动脉旁路手术采用 7mm 直径 ePTFE 人工血管，部分患者旁路手术 至膝下腘动脉或其分支采用 6mm 直径带环 ePTFE 人工血管。1 例患者远侧病变广泛，采 用原搭桥人工血管至足背动脉原位自体大隐静脉搭桥术，患者术后 3h 个月症状再发而行截 肢术。本组另有 2 例因病变广泛采用截肢术。 1.3h 结果（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）1）3h5 例次手术探查发现远侧流出道病变为主 22 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）62.9%），远侧 吻合口内膜增生为主 9 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）25.7%），近侧流入道病变为主 3h 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）8.6%），近侧吻 合口内膜增生为主 1 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）2.8%）。（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）2）3h2 例次血运重建手术中，13h 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）40.6%）术 后移植物再次闭塞摘要：人工血管搭桥术 5 例次术后平均 12 个月再次闭塞；单纯人工血 管切开取栓术 6 例次术后平均 1.2 个月再次闭塞；人工血管取栓同时行内膜剥脱术 1 例次 术后因膝下腘动脉病变 24h 内再次闭塞；1 例次自体大隐静脉旁路搭桥术，术后 3h 个月再 缺血而行截肢术。（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）3h）2 例患者（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）9.5%）围手术期死亡；17 例患者（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）1 例双侧移植物闭 塞）末次血运重建术后随访 6～44 个月，平均 17 个月，未见复发缺血症状，见表 1。 表 13h5 例次手术方式及术后再闭塞/随访时间 注摘要：*截肢术和人工血管取栓+腘动脉内膜剥脱术各 1 例围手术期死亡，未计入随 访 2 讨论 随着下肢缺血性疾病发病率的升高，下肢动脉搭桥手术广泛开展，搭桥术后移植物闭 塞的病例日益多见，其治疗难度较大，5 年累积通畅率在 23h%～87%不等，5 年保肢率仅 3h0%［1～3h］。 2.1 移植物闭塞原因自体动脉病变进展导致远侧流出道或近侧流入道狭窄或闭塞、吻 合口内膜增生、患者自身的高凝状态、动脉硬化斑块脱落栓塞等，都可能是搭桥术后移植 物闭塞的原因；术后 1 个月内的早期再缺血一般归为技术原因，尤其对于自体静脉血管移 植物［1，4，5］。本组 3h5 例次手术探查发现远侧流出道病变为主 22 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）62.9%）， 远侧吻合口内膜增生为主 9 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）25.7%），近侧流入道病变为主 3h 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）8.6%），近 侧吻合口内膜增生为主 1 例（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）2.8%）。O’Donnell 等报道 ePTFE 人工血管搭桥术后 64%移植物闭塞原因为远侧流出道动脉硬化病变进展，内膜增生和近侧流入道病变占 3h6%，和本组结果相近［6］。因此术前远侧流出道病变及其进展是影响移植物通畅性的 主要因素。 2.2 治疗方法选择有严重心肺合并症的患者及长期卧床活动受限的患者，可以考虑保 守治疗，包括溶栓治疗、扩血管药物治疗等。如无手术禁忌证，宜行手术治疗重建下肢血 运。手术方式包括再次下肢动脉搭桥手术（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）自体静脉或人工血管）、人工血管切开取栓术、 同时行股动脉或腘动脉内膜剥脱术的人工血管取栓术。Robinson 等认为再次下肢动脉搭 桥手术效果优于单纯取栓术［2］，而有学者认为手术方式对再次手术后移植物通畅率影 响不大，重要的是选择适合于病变的术式［3h］。另外对远侧流出道不良的患者行搭桥手 术可致较高的闭塞发生率，不少患者最终截肢［7］，因此下肢动脉搭桥手术或截肢手术 的指征值得探究。本组 3h5 例次移植物闭塞手术方式包括再次下肢动脉搭桥术 16 例次 （中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）45.7%），单纯人工血管取栓。手术 10 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）28.6%），人工血管取栓同时行股或腘 动脉内膜剥脱术 6 例次（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）17.1%），3h 例患者行截肢术（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）8.6%）。其中 13h 例次手术术后 再次闭塞，包括 5 例次人工血管搭桥术，平均再闭塞时间 9.8 个月；6 例次人工血管切开 取栓术，平均再闭塞时间 1.2 个月。且本组单纯人工血管切开取栓术后再闭塞率 （中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）60.0%）明显高于再次搭桥手术者（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）3h3h.3h%）。单纯人工血管切开取栓手术虽具有简单 易行，近期效果明显，费用相对较低等特征，但其长期效果不佳，不宜作为首选术式，因 此在患者末次重建手术中我们更多的选择了再次旁路搭桥手术。人工血管取栓同时行股或 腘动脉内膜剥脱术对可能存在的流入道或流出道病变予以处理，效果可能优于单纯人工血 管取栓术，本组 5 例次末次手术随访至今平均 10.5 个月未见复发者。但本组病例规模及 随访时间有限，疗效评价尚需进一步探究。选择手术方式应认真分析术前影像学资料，并 最终结合术中具体情况决定。术中探查有一定局限性，Fogarty 取栓导管球囊的顺应性较 好，可以通过部分狭窄病变，造成管腔通畅的假象。本组 2 例次术后 24h 内移植物再次闭 塞，手术探查发现远侧流出道局限重度狭窄病变。因此对于流入道喷血或流出道回血不满 足的患者，宜积极探查。术中探查发现远端病变广泛，可以采用截肢术。据笔者经验，不 宜以核磁血管成像（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）MRA）显示远侧流出道差作为截肢术的依据，在侧支循环建立不佳的 患者远侧流出道仍可能通畅。 下肢动脉搭桥术后移植物闭塞宜首选再次搭桥手术治疗，部分患者反复手术后最终截 肢，加强提高移植物通畅率的临床及基础探究才可能取得治疗上的突破。 摘要：妇科血管肌纤维母细胞瘤 我院妇产科于 1997～1998 年收治 3h 例外阴的软组织肿瘤，其中 2 例行术中冷冻切 片检查，手术切除标本常规 4%甲醛固定，石蜡包埋，3hμlm 连续切片，除 HE 染色外，又 进行了数种抗体的免疫组化染色(LSAB 法)。其中 1 例取少量新鲜瘤组织迅速放入 2.5%缓 冲戊二醛中固定，送透射电镜检查，3h 例均取得随访结果。3h 例女性外阴血管肌纤维母细 胞瘤的主要临床特征如表 1。 病理检查摘要：其中 2 例行冷冻切片检查，3h 例行免疫组织化学染色，1 例取少量新 鲜瘤组织行透射电镜检查。肿物表面光滑，有一层菲薄的纤维性包膜。肿物剖面粉红，隐 约可见微细血管，质地韧。镜下观察摘要：呈疏松网状或不规则裂隙状，细胞成分较稀少， 难以作出明确诊断，故首例冷冻报告为“软组织肿瘤，倾向良性”。石蜡切片光镜观察，肿 瘤主要由两种成分组成。一种是小到中等大小的薄壁血管散布于肿瘤之中，血管腔扩张， 内含血液。另一种为血管四周散在分布的短梭形、类圆形或不规则形间质细胞。间质细胞 有的围绕血管密集排列，有些则疏松散布于血管之间，细胞核大小较一致、无明显异型性， 未见核分裂象，胞质粉染丰富，有些区域胞质界限不清（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）图 1），基质有不同程度水肿。 免疫组织化学检查，肿瘤内短梭形或卵圆形间质细胞均表达波形蛋白，部分细胞可表达平 滑肌肌动蛋白和肌特异性肌动蛋白，但较弱，而肿瘤内小血管壁却呈强阳性表达。3h 例肿 瘤内间质细胞均未表达结蛋白和 S-100 蛋白。电镜见间质细胞核膜较薄，核有不规则凹陷， 染色质均匀分布，偶可见小核仁。胞质中散在粗面内质网、线粒体以及少量成束的肌微丝， 细胞外基质中散在胶原纤维，提示向肌纤维母细胞分化，且为良性肿瘤细胞（中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）图 2）。 病理诊断摘要：3h 例均诊断为外阴血管肌纤维母细胞瘤 术后随访 6～18 个月，均无复发。 讨论摘要：女性外阴软组织肿瘤少见，而血管肌纤维母细胞瘤 （中国兽医药品监察所）；侵袭性大肠埃希菌（中国生物制品探究所）angiomyofibroblastoma,aMF）则更为少见。1992 年，Fletch-er 等［1］首次报道 了这种发生于女性外阴的具有一定临床病理学特征的软组织肿瘤。此后，文献已陆续报道 约 60 余例。血管肌纤维母细胞瘤发病比较隐匿，经常是患者无意中发现外阴肿物，病程 数月至数年，一般无疼痛。肿物大多位于大阴唇和外阴区，临床常诊断为前庭大腺囊肿、 外阴囊肿或外阴肿物，也偶见该肿瘤发生于男性腹股沟阴囊部的报道［2］。本病很少能 在术前作出明确诊断，肿物局部切除可治愈，一般不复发。但最近有 1 例报道术后两年复