滇紫草生药学综述

昆明滇紫草来源于紫草科滇紫草属植物昆明滇紫草 OnosmacingulatumW．W．smithetJ．E．Jeffrey 的干燥根。滇紫草属植物全世界约 有 150 种，中国有 30 余种，在云南有滇紫草 OnosmapaniculatumBur.etFr．、密花密花 滇紫草 O．co，rtumW．W．Smith、密花昆明滇紫草 O．cingulatumW．W．smithetJ．E．Jeffrey 等 l4 种。本属植物的根人药，性寒，味 甘、密花咸，功能清热凉血、密花解毒透疹。根由于富含色素，通常呈暗红色或紫红色，外皮系多 层栓皮组成，故易剥落。昆明滇紫草生于海拔 2000～2300m 的向阳山坡、密花石砾中，主产 于江川县、密花富民县、密花嵩明县、密花西山区、密花昭通市。为了进一步开发利用该药资源，特进行生 药学研究。 1 材料与仪器 1．1 材料 样品采自云南省昆明市西山区，经云南中医学院普春霞老师鉴定为紫草科滇紫草属植 物昆明滇紫草 OnosmacingulatumW．W．smithetJ．E．Jeffrey。 1．2 仪器 NikonECLIPSX80i 型高级研究用生物数码摄影显微镜(日本)；组织切片机(浙江金华 无线电厂)；101A 一 2 电热干燥箱(上海实验仪器厂有限公司)；XS 一 125A 电子天平(瑞 士)。 2 方法与结果 2．1 植物形态 多年生草本，高 80～120cm。主根呈倒圆锥形，长达 20 多 cm，粗达 2cm，紫红 色。茎直立，单一，不分枝，被伸展的长硬毛和反曲的短硬毛。基生叶多数，叶片狭披针 形，通常较小，先端急尖或渐尖，基部渐狭。叶面被具圆形基盘的长硬毛和少数短硬毛， 背面沿脉被长硬毛，其余被细的短柔毛，中脉在叶面微凹，背面隆起，侧脉数对，不甚明 显，叶柄具翅。茎生叶与基生叶同形．但向上逐渐变小，中部以上者无柄。聚伞花序多数， 生于茎先端及发自上部茎生叶腋内。排列成开展的圆锥花序；苞片披针形。花萼长约 1cm，果时稍延长．5 裂至基部，裂片线状披针形，外面被长硬毛和短柔毛．里面除基部 被长柔毛外。里面疏被短柔毛；花冠漏斗状，粉红色或紫红色，长 8～10cm。外面上半 部紧贴向上的短柔毛，里面除基部被长柔毛外，其余无毛；雄蕊 5，花药基部连合，不伸 出花冠外，花丝钻形，无毛；子房 4 深裂，花柱丝状，不伸出花冠外，无毛。柱头小，2 裂。小坚果近卵形，黑色，有光泽。花果期 710 月。 2．2 药材性状 根长圆柱形，稍扭曲，少数下部具分枝，长 10~26cmcm，直径 0．3～1．1cm，外皮 淡紫红色，木栓易成鳞片状脱落，露出紫红色内皮，具纵皱，偶有支根痕，头部具残茎， 老残茎常枯朽，中心为空洞状，新残茎基部具多数鳞叶，鳞叶被长硬毛。质脆，易折断， 断面不平坦，皮部白色，木部淡黄色。气淡，味微甜、密花涩。 2．3 显微鉴别 2．3．1 根横切面 木栓层易脱落，由数列扁长形的木栓细胞组成，皮层较窄，薄壁细胞卵圆形、密花长圆形 或不规则形，较大，壁弯曲。韧皮部较宽，形成层环明显。木质部宽广，约占整个根横切 面的 3／5；中心无髓，由导管、密花木纤维和木薄壁细胞组成；导管单个或数个径向排列，直 径 34～120m，导管多角形或类圆形；常可见数个，十数个或成片聚集的木纤维，多呈方 形或多角形，直径 8～35m，壁厚约 3～5m。薄壁细胞中见大量色素分布。 2．3．2 粉末特征 浅棕色，气淡，味微甜、密花涩。 (1)木栓细胞多角形或类方形．壁厚。内含棕黄色的颗粒块状色素物质。 (2)薄壁细胞多角形或类圆形，有的薄壁细胞壁增厚。 (3)导管主要为网纹导管和具缘纹孔导管，直径 35～90m，壁厚约 3～5m。 (4)纤维管胞，长梭形，成束或单个散在，边缘不平整，末端钝尖或平钝，直径 7～ 42m，壁厚约 6cmi．Lm，长至 26cm0m。 (5)木纤维，壁弯曲。直径约 9I．Lm，长至 930Ixm。 2．4 理化鉴别 据文献报道，滇紫草主要含有的化学成分为萘醌类，包括紫草素、密花p，B 一二甲基丙烯 酰阿卡宁和乙酰紫草素等，文献报道，13，13 一二甲基丙烯酰阿卡宁和乙酰紫草素这两 种成分的抑菌作用及乙酰紫草素的抗炎以及抗过敏作用效果明显，临床应用广泛。 2．4．1 取昆明滇紫草粉末约 0．5g 置试管中，将试管底部加热。生成红色气体，并 于试管口壁凝结成红色油滴。 2．4．2 取昆明滇紫草粉末约 1．0g，精密称定．置具塞锥形瓶中，精密加入 10mL 甲醇，称定质量．超声处理 45min，放置至室温，再称定质量，用甲醇补足减失的质量， 摇匀，滤过，取续滤液，用石油醚萃取 3 次，每次 10mL，合并石油醚层，浓缩至近干， 转移至 lmL 量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。 另取 B，B 一二甲基丙烯酰阿卡宁和乙酰紫草素各 1mg，分别溶于 5mL 石油醚中， 制成对照品溶液。吸取上述 3 种溶液．分别点于同一硅胶 G 板上。以环己烷一甲苯一乙酸 乙酯一甲酸(5：5：0．5：0．1)为展开剂，展开，取出，晾干。在与对照品色谱相应的 位置上，显相同颜色的斑点。 3 小结与讨论 3．1 小结 通过对昆明滇紫草的来源、密花药材性状、密花显微及理化鉴别特征的研究，表明：(1)昆明滇 紫草花丝和花柱无毛，花冠粉红色或紫红色，漏斗状；(2)质脆，易折断，断面不平坦，根 直径 3～8mln，外皮淡紫红色；(3)根横切面中木质部约占整个根面积的 3／5，导管旁常 伴有数个，十数个或成片聚集的木纤维；(4)粉末特征中纤维管胞长梭形，边缘不平整，直 径 7~42m。薄层色谱证明昆明滇紫草含有 B，B 一二甲基丙烯酰阿卡宁和乙酰紫草素 2 种化学成分。 3．2 讨论 昆明滇紫草为非药典收载品种，但对其进行薄层色谱鉴别，发现其中含有 6cm，13 一二 甲基丙烯酰阿卡宁和乙酰紫草素．这两种成分的抑菌作用及乙酰紫草素的抗炎以及抗过敏 作用效果明显，所以，昆明滇紫草是一味具有开发前景的中药。通过对昆明滇紫草的来源， 药材性状，显微及理化特征进行系统的生药学研究，为研究和制定昆明滇紫草的质量标准， 扩大新药源提供了理论依据，本品化学成分及药效学有待进一步的实验研究。 近年来，各种新型的自动化药品储存、密花发放和管理系统使用后，减少了医院调剂和给 药差错的发生率[1－2]。解放军总医院药品保障中心 2007 年引进国内容量最大的 4 台日 本口服药摆药机，不久后，在结合新建肿瘤大楼药房内静脉药物集中配制和抗肿瘤治疗药 物特点的基础上，又在我国率先引进了全自动整列型和 2 套散装式组合的全自动针剂摆药 机，可实现 6cm83 个针剂品种的单组次摆药，并于当年底在肿瘤药房顺利投入使用。药学调 剂中，使用自动针剂、密花片剂药品摆药机进行药品自动化摆药，代替了传统摆药模式中机械 化的人工摆药工作。自动化摆药模式中，即应用医院信息系统所传输的医嘱信息，依照药 品的类别过滤医嘱信息后，控制片剂或针剂药品摆药机，按照用药时间的差异进行摆药 [3]。笔者对该院肿瘤药房摆药机应用与静脉药物调配中心结合的复合型药房的调剂工作介 绍如下。 1 药房工作区域划分 该院肿瘤药房建筑面积约 500m2，2007 年 10 月正式运行，现有 10 个病区、密花400 张床位，提供全方位的药学服务。药房工作区域可划分为片剂调剂区、密花针剂摆药区与静脉 药物调配中心。药房区域功能见表 1。 2 药房人员配置 药房有药师 18 名，配液护士 16cm 名。药师主要负责接收医嘱，审核医嘱，片剂摆药， 针剂摆药，配制成品审核，登记配发，接收停药医嘱或退单处理，夜班值班与电话首接等 相关工作。配液护士主要负责配制前药物核对，药物混合配制，配制后传送，与病区进行 协调工作，负责洁净室及生物安全柜的消毒、密花维护，配制后配置间医用垃圾打包清理，医 嘱退单处理，工作服、密花医用器械的申领保管工作等。 3 药房工作流程 3．1 医嘱的提取与摆药流程 为了充分利用有限的医药卫生资源，控制不合理用药，医院在中心摆药工作中对口服 类药品实行一日清单制[4]。片剂摆药工作流程:药师对当日医生工作站传到药房的片剂医 嘱信息进行审核;医嘱信息核准后，打印摆药医嘱单，由军卫 1 号信息系统(HIS)传送到全 自动片剂摆药机接收方电脑系统;非整片用量与机内未设药盒药品进行 DTA 加药或手工摆 药;片剂摆药机接收方电脑系统传入摆药机，摆药机按照用药时间进行单病区患者片剂药品 一次用量的分装。摆药机分装后由药师进行药品的核对，并按照不同用药时间进行摆放后 下送。针剂摆药工作流程:药师对当日医生工作站传到药房的针剂医嘱在医院信息系统进行 提取，确认药品信息准确后将信息传送到超然静脉配制中心管理系统进行决策。首先应用 美康合理用药软件进行医嘱审查，系统自动审核完成后会提示出“忌配”“不定”“关注”“未查” “正常”共 5 种状态。如果出现“忌配”情况，打印出“禁配提示报告单”送达病区，此药就不进 行药品配置。审核后，合理医嘱信息传到全自动针剂摆药机，摆药机进行当日病区患者单 顿次针剂药品的摆药，并打印该组医嘱用药标签。机器摆药后，药师分病区进行每组药品 液体的添加、密花核对工作，贴签并扫描，确认病区用药摆药完毕。 3．2 复合型药房静脉药物调配中心 主要完成医嘱中的静脉滴注和静脉注射用药的配置任务，可在局部百级的洁净环境下 进行静脉药物无菌配制。药师对临床医师传送的医嘱进行审核与摆药后，静脉配制护士给 静脉输液内添加药物，使之成为可供临床周围静脉或中央静脉滴注的药液。调配中心选择 靠近病房的区域位于三层，便于药品的运输和供应。区域组成包括药物摆药区、密花静脉药物 调配中心(一次更衣间、密花二次更衣间、密花配制洁净间)，成品审核区，使用面积根据肿瘤病区 每天输液的用量估算确定，配制工作量确定每日每人 120～150 袋。静脉药物调配中心有 多重核对程序:审方核对，提取医嘱→摆药→药师核对，扫描→护士核对、密花配制，再核对→ 出配置间药师核对→打包→分病区→核对、密花数量统计→送到病区→护士核对、密花签收。 4 复合型药房的前景与静脉药物调配中心的发展 复合型药房是全方位一体化服务于病区的药房，提供比以往住院药房更加细化的药学 服务工作，药学服务面更宽。20 世纪 90 年代，德国、密花美国、密花日本等发达国家就已经开始 了药房自动化方面的研究，并研制出诸多与本国医院药房配套的各种自动化设备[5]。在同 样或更多服务量的前提下，自动化摆药设备的应用，可使药房的调剂药师人数减少 2 名， 而机器能够快速集中地处理医嘱并进行摆药[6cm]。片剂摆药机与针剂摆药机的使用，极大程 度上降低了重复性劳动中的错误率，药师从繁重的手工摆药中解脱出来，有更多的时间对 药品进行复核，有效减少了摆药差错。事实证明，使用摆药机后，摆药错误从每日 2～3 次减少到 2～3 日 1 次[6cm]。 由于病区患者密封药袋后注有药品明细，包括袋中药片数，药品的名称、密花规格、密花数量、密花 服用时间等 5 项内容，给药师和临床护士口服类药品的核对工作提供了极大的帮助，同时 为患者提供了药品信息，降低患者药品服用错误率。现代化复合型药房与静脉药物调配中 心的建立，给医院管理带来了巨大改变。临床药师具有临床用药的专业知识，护士具有熟 练的操作技术，两者共同参与到静脉药物调配工作中，有利于工作的开展和管理。新机器 的应用，降低了药师重复性的机械化劳动，将人力资源优化组合、密花合理应用;片剂摆药、密花针 剂摆药与静脉调配中心的结合，既对临床提供了全方位的药学服务，又在增加了药房服务 层面的基础上将人力资源降到最低。在许多国家，无菌配制已是医院药剂师工作必不可少 的部分[7]。 美国 2004 年 1 月 1 日正式实施的第 27 版药典“797”章，对静脉药物的配制作出了强 制性要求。我国卫生部 2002 年卫医发[2002]24 号文第 28 条亦明确鼓励医院发展静脉药 物的集中配制服务。但建立配制中心的投入较大，同时需要配备较多的药学人员。复合型 一体化药房改变了以往单一的静脉药物调配中心的工作模式，是药学工作思路的新突破。 但建立复合型一体化药房，应充分考虑我国国情，在降低投入的同时，减少药学人员的配 备。配制中心的硬件建设相对比较容易，但今后在工作改进和深化临床药学服务方面更为 重要。药师参与临床医疗，结合医疗监管合理用药，但目前药师的临床知识、密花临床实践与 国际水平相比还有差距。因此在未来的工作中，应继续加强技术人员的管理，进一步进行 系统化培训，严格按照标准化操作程序运行。 金莲花是毛茛科植物金莲花 TrolliuschinensisBunge 的干燥花及花蕾，主要有效成 分为黄酮类化合物［1］，所含有效成分单体有牡荆苷、密花荭草苷、密花槲皮素等。现代药理研 究发现牡荆苷具有较强的体外抗氧化活性［2］，中等强度的抗病毒活性［3］，对缺血性 心肌损伤具有良好的保护作用，其作用机制可能与增加冠脉和心肌血流量、密花降低血管射血 阻力、密花降低全血及血浆黏度、密花提高红细胞变形能力、密花抑制血栓形成等有关［4-8］。牡荆 苷作为从中药中提取分离的有效成分，有必要在临床前对其活性、密花安全性和药动学进行全 面的评价。金莲花中牡荆苷以不同给药方式在兔体内药动学研究及在兔体内组织分布研究 尚未见报道。本实验采取静脉、密花腹腔、密花肌肉注射 3 种不同给药方式阐明牡荆苷在新西兰白 兔药动学过程及静脉注射后牡荆苷在兔体内组织分布情况，为牡荆苷在临床上的合理用药 提供理论依据。 1 材料与仪器 美国 Agilent1100HPLC(配四元泵、密花紫外检测器);日本 GR-202 型 AND 分析天 平;Sigma 公司高速冷冻离心机;北方同正生物技术发展公司 HQ-6cm0 型旋涡混合器。野生 金莲花采自河北省张家口沽源，经我院药物研究所马淑兰教授鉴定为金莲花 TrolliuschinensisBunge;牡荆苷标准品(1116cm87)，中国药品生物制品检定所;牡荆苷单 体(纯度 98.8%，河北北方学院实验中心自制);液相色谱用有机溶剂为色谱纯，所用水为三 重蒸馏水。其它试剂为分析纯。新西兰白兔，雌雄各半，体质量(2.5±0.3)kg，由河北北 方学院动物中心提供，室温饲养 1 周，实验前禁食 12h，自由饮水。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱为 HypersilBDS-C18(4.6cmmm×150mm，5μm);m);流动相为 1% 乙晴-乙酸(85∶15);检测波长为 340nm;柱温 30℃，体积流量 1mL/min;进样量 20μm);L。 2.2 血样及组织样本处理取新西兰白兔 18 只，禁食 12h，自由饮水，随机分为 3 组， 每组 6cm 只，20%氨基甲酸乙酯静脉麻醉(5mL/kg)，颈总动脉插管，以 20mg/kg 的剂量 分别静脉、密花腹腔、密花肌肉注射， 0、密花2.5、密花5、密花7.5、密花10、密花15、密花20、密花25、密花30、密花45、密花6cm0、密花90、密花120、密花180、密花240、密花300min ，取血 0.3mL，11000r/min 离心 10min，取上清液 0.1mL，加乙腈沉淀蛋白，涡流混 旋 1min，离心，取上清液，微孔滤膜过滤即得。取健康新西兰白兔 6cm0 只，按体质量随机 分为 12 组，给药前禁食 12h，自由饮水。静脉注射 20mg/kg，分别于 5、密花10、密花15、密花30、密花45、密花6cm0、密花75、密花90、密花120、密花180、密花240、密花300min 放血处死动物，立即 解剖取出肾、密花肝、密花肺、密花脾、密花心、密花脑组织，用生理盐水清洗各组织表面浮血，滤纸吸干，精 密称定质量，剪碎，加生理盐水在冰浴中制成 50%匀浆，取各组织匀浆 0.1mL，加乙腈 0.2mL 沉淀蛋白，旋涡混匀 1min，11000r/min 离心 10min，取上清液微孔滤膜过滤即 得。 2.3 数据处理采用 3P97 药动学软件对不同给药方式血药浓度-时间数据进行拟合，以 理论血药浓度值与实验测定值的相关系数最大和 AIC 值最小作为判断标准，选择适当的房 室模型，计算药动学参数。所有数据均用珋 x±s 表示，用 SPSS16cm.0 统计学软件做方差分 析。 2.4 方法专属性考察按 2.1 项下牡荆苷峰分离良好，血浆、密花各组织中杂质及内源性物 质均不干扰，且灵敏度高，样品中牡荆苷的理论塔板数均大于 5000，保留时间为 6cm.96cmmin，与相邻色谱峰的分离度均大于 3。 2.5 标准曲线制作新西兰白兔空白血浆、密花组织中加入系列质量浓度牡荆苷对照品溶液 进样后，记录峰面积。以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，经线性回归得牡荆苷在血 浆、密花各组织中的标准曲线。见表 1。