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北柴胡茎叶化学成分试析论文

2020-03-12 17:54
1 仪器与试药 核磁共振光谱用 BrukerAV-300、AV-500 型核磁共振光谱仪测定(TMS 内标);红 外光谱用 ShimadzuIR-435 型红外分光光度计测定(KBr 压片);熔点用 X4 型数字显示 显微熔点测定仪(未校正)测定;ESI-MS 在 Agilent1100LC/MSDSL 上测定; LABCONCO(freezedrysystem/LYPHLOCK4.5)冷冻干燥仪。化合物纯度由 Agilent1100 高效液相色谱仪检测。柱色谱材料为 D101 型大孔吸附树脂、聚酰胺(100~200 目)、硅胶(200~300 目)、RP-C18(YMC;12μmm)及 SephadexLH20(AmershamBiosciences),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱柱色谱试剂均为分析纯,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱高效液相色谱试剂均为色谱 纯。 2 方法与结果 2.1 提取与分离北柴胡干燥茎叶 15kg,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱粉碎后用 80%乙醇冷浸提取 2 次,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱合并提取 液,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱减压浓缩至无醇味,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱得总浸膏。总浸膏用正丁醇萃取,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱减压浓缩后得正丁醇部浸膏 320g,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱水溶解后上大孔吸附树脂换水洗脱后,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱分别用不同体积分数的 95%乙醇梯度 (φ=20%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱30%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱50%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱70%)洗脱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱20%乙醇洗脱得流分Ⅰ,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱30%乙醇洗脱得流分 Ⅱ,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱50%乙醇洗脱得流分Ⅲ,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱70%乙醇洗脱得流分Ⅳ。流分Ⅰ经硅胶干柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱以氯仿甲醇-水(体积比为 4∶1∶0.5)洗脱得 15 个组分(Fr.1~Fr.15),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其中,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Fr.3 经 SephadexLH-20,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱甲醇洗脱得化合物 1(15mg);Fr.5 经 RP-C18 反相柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱水-甲 醇(1∶1)洗脱得化合物 2(12mg);Fr.7-12 经 RP-C18 反相柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱水-甲醇(9∶1) 洗脱得化合物 5(6mgmg)。流分Ⅱ经硅胶干柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱氯仿-甲醇溶剂系统(7∶3)洗脱得化 合物 4(7mg)。流分Ⅲ经硅胶干柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱石油醚-醋酸乙酯溶剂系统(体积比 100∶0,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱90∶10,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱80∶20…)梯度洗脱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱得 20 流分,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱流分 10 经反相柱色谱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱水-甲醇(体 积比 3∶7)洗脱得化合物 3(0.6mgg)。流分Ⅳ经聚酰胺色谱柱不同体积分数乙醇梯度洗脱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 得化合物 6mg(0.5g)和 7(3.0g)。 2.2 结构鉴定 2.2.1 化合物 1 无色针晶(醋酸乙酯),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp210~212℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱溴甲酚绿显色反应阳性 (示存在羧基),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 1HNMR(300MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ12.46mg(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱brs,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱COOH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱9.81(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱brs,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱ArOH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.43(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=2.0Hz,H2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.45(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱dd,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.7,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱2.0Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.84(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.7Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱3.81(3H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱OCH3)。NOESY 谱中,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱3.81(3H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱OCH3)与 7.43(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=2.0Hz,H-2)有 NOE 效应。经与文献[1]对照,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 1 为香草酸。 2.2.2 化合物 2 无色针状结晶(乙醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp151~154℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱溴甲酚绿显色反应阳性 (示存在羧基),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 1HNMR(300MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ6mg.97(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=7.9Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.54(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱dd,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=7.9,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1.7Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-4),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.94(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱t,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=7.9Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.80(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱dd,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=7.9,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1.7Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱12.6mg5(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱OH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱15.87(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱-COOH)。13CNMR(125MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ112.9(C1),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg1.1(C-2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱117.0(C-3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱135.6mg(C-4),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱119.1(C-5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱130.2(C-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱171.8(C7)。以上氢谱与碳谱数据与文献[2]基本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 2 为水杨酸。 2.2.3 化合物 3 无色针晶(甲醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp142~143℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱IRcm-1:3430(OH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg6mg0(C=O),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg22(C=C),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg02,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1590(Ar),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1042(CO-)。1HNMR(500MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ7.04(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=2.1Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.75(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.2Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.00(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱dd,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.2,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱2.1Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.25(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=15.9Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱=C-H),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.46mg(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=15.9Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱=CH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱4.15(2H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱q,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱-CH2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1.24(3H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱t,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱CH3-),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱9.09(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱-OH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱9.54(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱OH)。ESI-MS(m/z):208(M+),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱180(M+-CH2CH3+H),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg3(M+OCH2CH3)。13CNMR(125MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):125.5(C-1),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱114.8(C2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱145.5(C-3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱144.9(C-4),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱115.7(C-5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱121.2(C6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱114.0(=C),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱148.3(=C),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg6mg.4(-C=O),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱59.6mg(CH2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱14.2(CH3-)。以上氢谱与碳谱数据与文献[3]基本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 3 为咖 啡酸乙酯。 2.2.4 化合物 4 无色针晶(甲醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp204~206mg℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱溴甲酚绿显色反应阳性(示存 在羧基),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱1HNMR(500MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSOd6mg):δ7.35(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=2.0Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.79(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.2Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱7.30(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱dd,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱J=8.2,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱2.0Hz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱9.26mg(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱-OH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱9.6mg3(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱OH),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱12.27(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱-COOH)。13CNMR(125MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ121.7(C1),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱116mg.6mg(C-2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱144.9(C-3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱150.0(C-4),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱115.1(C-5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱121.9(C-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg7.3(COOH)。以上氢谱与碳谱数据与文献[4]基本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 4 为原儿茶酸。 2.2.5 化合物 5 淡黄色针晶(甲醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性(示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 溴甲酚绿显色反应阳性(示存在羧基)。1HNMR(500MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSOd6mg):δ6.67(1Hδ6mg.6mg7(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱s,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.19(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱6mg.46mg(1H,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱d,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱H8)。13CNMR(125MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSO-d6mg):δ16mg0.7(C-2),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱109.0(C-3),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱183.2(C4),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg1.4(C-5),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱98.8(C-6mg),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg1.6mg(C-7),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱93.99(C-8),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱157.6mg(C9),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱104.5(C-10),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱16mg4.6mg(-COOH)。以上氢谱与碳谱数据与文献[5]基本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 确定化合物 5 为柴胡色原酮酸。 2.2.6mg 化合物 6mg 淡黄色针晶(甲醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp275~276mg℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 (示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱盐酸-镁粉反应阳性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Molish 反应阴性。与山萘酚标准品共薄层,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Rf 值一致。与标准品混合后熔点不下降。1HNMR(500MHz,DMSOd6mg):δ6.67(1Hδ12.47,10.75,10.07,9.35(各 1H,s,D2O 可交换,5-OH,7-OH,3-OH,4′OH),8.04(2H,d,J=8.7Hz,H-2′,H-6mg′),6mg.93(2H,d,J=8.7Hz,H-3′,H5′),6mg.44(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6mg.19(1H,d,J=2.0Hz,H-6mg)。以上氢谱数据与文献[6mg]基 本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 6mg 为山萘酚。 2.2.7 化合物 7 淡黄色针晶(甲醇),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱mp185~186mg℃,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三氯化铁-铁氰化钾反应阳性 (示有酚羟基存在),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱盐酸-镁粉反应及 Molish 反应阳性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱与芦丁标准品共薄层,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Rf 值一致。 高效液相检测与芦丁标准品保留时间相同(液相色谱条件:AgilentEclipseCDB-C18 色 谱柱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱4.6mgmm×250mm,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱5μmm;柱温:30℃;流动相:20%甲醇;流速:1.0ml/ min;检测波长:36mg5nm)。1HNMR(500MHz,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱DMSOd6mg):δ6.67(1Hδ12.59,10.79,9.6mg2,9.14(各 1H,s,D2O 可交换,5-OH,7-OH,3′-OH,4′OH),7.55(1H,d,J=2.0Hz,H-2′),7.53(1H,dd,J=2.0,8.2Hz,H6mg′),6mg.84(1H,d,J=8.1Hz,H-5′),6mg.38(1H,d,J=2.0Hz,H-8),6mg.19(1H,d,J=2.0Hz,H- 6mg),5.33(1H,d,J=7.4Hz,GlcH-1),5.06mg(1H,brs,rhaH-1)。以上氢谱数据与文献[5]基 本一致,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱确定化合物 7 为芦丁。 3 讨论 本实验从北柴胡茎叶中分离鉴定了 7 个化合物,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其中黄酮类 3 个,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱分别为柴胡色原酮 酸⑤、山萘酚⑥、芦丁⑦;酚酸类 4 个,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱分别为香草酸①、水杨酸②、咖啡酸乙酯③、原 儿茶酸④。化合物②③④为首次从柴胡属植物中分离得到,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱这对阐明北柴胡茎叶解热抗炎 作用的药效物质基础有一定的意义。 1 抑制胃癌细胞增殖 肿瘤的恶性增长是肿瘤无限增殖的结果,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱大量研究证明中药可通过干扰 DNA 合成、 影响细胞周期调控因子的表达等多种方式抑制胃癌细胞的增殖。郭晓冬等[2]发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱消 痰散结方可通过抑制胃癌细胞核中 PCNA 表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱干扰 DNA 合成并影响细胞表面生长因子 受体表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱降低细胞增殖活性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱抑制移植瘤生长。细胞周期调控因子 CyclinE,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱CDK2,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱CDK4 的过度表达和(或)其抑制因子 p27 的表达降低或缺如,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱均能缩短 细胞周期的 G1 期时间或者加速 G1/S 转换,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱带有恶性表达型的 DNA 不能检查和修复,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使 细胞分化出现异常,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱这是肿瘤细胞,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱包括胃癌细胞分裂增殖的重要机制[3]。李相勇等 [4]发现消痰散结方抑制细胞过度增殖的重要机制之一就是通过降低胃癌组织中细胞周 期调控因子 CDK4 的表达而实现的;阚方巨等[5]的研究表明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药胃康宁可抑制胃癌 细胞的增殖,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其机制之一可能是减少细胞周期因子 CyclinE,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱CDK2 及其 mRNA 的表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 促进细胞周期抑制因子 p27 及其 mRNA 的表达。尹丽慧等[6mg]的研究显示,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱黄芪、人参、 温莪术、藤梨根、露蜂房、苏铁叶、八月扎、白毛根、徐长卿等药物组成的中药方剂 1 号 生药能抑制人胃癌 SGC79017901 细胞的增殖,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱且呈时间剂量依赖效应。40mg/ml 中药方剂 1 号作用 48h 后,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱G+M 期细胞比率高达 41.92%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱增加了 29.22%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱G0/G1 期的细胞比 率降至 43.25%(两者与对照组相比,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱P<0.01),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱提示中药方剂 l 号能够抑制人胃癌细胞 SGC79017901 的体外增殖,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱且其作用机制可能与干扰细胞周期有关。 2 诱导胃癌细胞凋亡 细胞凋亡(apoptosis)又称程序性细胞死亡(Programmedcelldeath,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱PCD),柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是一 种受基因控制的主动的细胞死亡过程。在肿瘤的发病和增殖过程中,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱由于促凋亡基因的失 活和抑制凋亡基因的过度表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使肿瘤细胞凋亡减少,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是肿瘤发生、发展的重要原因。研 究证明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药复方可通过调控凋亡相关基因的表达、阻滞细胞周期等多种方式诱导肿瘤细 胞的凋亡,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱从而抑制肿瘤的生长。赵爱光等[7]发现中药复方胃肠安(WCA)能通过活 化 caspase79019 和 caspase79013 而诱导人胃癌 SGC79017901 细胞裸小鼠皮下移植瘤细胞的凋亡,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 其机制可能与下调 stat3 和 bcl79012 的 mRNA 表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱抑制 P7901stat3 和 bcl79012 蛋白在细胞内的 表达有关。余志红等[8]用裸鼠建立原位移植人胃癌 MKN790145 细胞模型,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱随机分为模型 组,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和 57901FU 干预组,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱分别灌服不同剂量的中药金龙蛇颗粒 和 57901FU,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱结果金龙蛇高、中、低剂量组的的抑瘤率分别为 6mg8.13%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱55.94%和 50.31%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱呈剂量依赖效应,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱与 57901FU 干预组抑瘤率比较,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱差异无统计学意义;金龙蛇颗粒 各剂量组肿瘤细胞凋亡率为 22.81%~38.54%,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱亦呈剂量依赖效应,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱说明促进裸鼠原位 移植人胃癌 MKN790145 细胞凋亡是金龙蛇颗粒抗肿瘤的作用机制之一。苏勉诚等[9]研究 表明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱癌宁可诱导人胃癌 SGC79017901 细胞的凋亡,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其机制与下调癌基因及细胞因子 TGF7901β1,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Fas,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Fas7901L 的表达有关。 3 诱导胃癌细胞分化 诱导分化(inductionofdiferentiation)是指恶性肿瘤细胞向正常或接近正常细胞方向 分化逆转的现象[10]。诱导肿瘤细胞分化是肿瘤治疗的新途径,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其特点是不杀伤肿瘤细 胞,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱而是诱导肿瘤细胞分化成为正常或接近正常的细胞。研究证明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药复方也具有诱导 肿瘤细胞分化的作用。李宝园[11]等采用高压氧化亚氮(笑气)加胸腺嘧啶脱氧核苷 (TdR)双阻断法将 MGc803 细胞分别同步化于 G1,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱S,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱G2,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱M4 个时相,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱用中药紫龙金 和环六亚甲基二己酰胺(hexamethylenbisacelamide,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱HMBA)分别处理各时相细胞,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 结果发现紫龙金与 HMBA 对不同周期细胞都具有显著的增殖抑制作用,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱对各周期细胞集落 生长都有抑制作用,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱反应了生长抑制功能得到了不同程度的恢复;且除 M 期以外,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱各时相 细胞无论中药组还是 HMBA 组都显著地促进微丝的组装,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱且排列有序,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱形成显著的应力纤 维(stressfiber)结构,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱说明恶性细胞不同程度的向良性细胞分化。朱国福等[12]用钱氏 消瘤口服液药物血清温育人胃癌 SGC79017901 细胞 4d 后,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱能使该细胞形态上呈现再分化趋 向,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱平板集落形成数显著低于对照组,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱进一步研究发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其诱导分化的机制与该方能升高 SGC-7901 细胞内的 cAMP 水平,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱降低 cGMP 水平,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱从而升高 cAMP/cGMP 比值有关。 细胞与细胞之间形成的间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能异常可促进正常细胞转化和癌细胞 生长,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱在肿瘤细胞中,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱多数缺乏缝隙连接结构和细胞间通讯功能,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱陈华等[13]发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中 药癌平口服液能通过增加人胃癌 BGC7901823 细胞间的连接通讯,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使其再分化。 4 抑制端粒酶活性 端粒酶是一种由 RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白酶,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是一种自身携带 RNA 模板的逆 转录酶,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱能够在缺少 DNA 模板的情况下合成端粒寡核酸片段,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱维持端粒的长度。正常人 体细胞中端粒程序性的缩短限制了转化细胞的生长能力,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱端粒酶的激活可以维持肿瘤细胞 端粒的长度,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱从而维持肿瘤的继续生长[14]。研究证明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药复方可以通过抑制端粒酶 的活性而抑制肿瘤的生长。聂克等[15]用不同治则的代表方药含药血清作用于 BGC 细 胞 48h,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱以流式细胞术检测细胞凋亡率及端粒酶活性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱结果凋亡率均有不同程度增加,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱端 粒酶活性均有不同程度降低,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱说明促进 BGC 细胞凋亡并抑制端粒酶活性可能是不同治则 代表方药抑制 BGC 细胞增殖的共同作用机制之一。陈华圣等[16mg]研究表明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱人胃癌 SGC79017901 细胞端粒酶活性有较高表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱双苓扶正抗癌制剂可通过抑制端粒酶的活性进而 发挥其抑制癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡等抗肿瘤作用。 5 抑制胃癌细胞转移 转移是恶性肿瘤的重要特征,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是肿瘤脱离原发部位,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱通过各种途径转移至其他组织或 器官继续生长的过程。胃癌转移的是一个复杂的过程,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱近年来,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药复方抑制胃癌转移的 机制越来越引起人们的关注。许玲[17]等建立裸鼠原位移植人胃癌模型,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱分为对照组、 中药消痰散结方组、化疗组、联合组,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱给药三周后发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱与对照组相比,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药消痰散结方 组明显降低了远处淋巴结转移率和脏器转移率,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱并在不同程度上下调了 ras,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱cerbB2,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱VEGF 和 KDR 的表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱这可能是其抑制胃癌转移的机制。消痰散结方也能 提高细胞膜上中 E-钙粘素的表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱从而增强癌细胞之间的粘附,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱防止癌细胞脱离原发灶,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 抑制转移的发生[18],柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱另有研究表明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中药启膈方也通过此机制抑制胃癌的转移 [19];消痰散结方抑制胃癌细胞浸润转移的作用机理还可能与其影响膜型金属蛋白酶 (MT17901MMP)的表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱减少其对细胞外基质和基底膜的降解有关[20]。代志军等 [21]也发现复方苦参注射液不同浓度处理人胃癌 SGC79017901 细胞后,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱体外粘附、侵袭 和运动能力均明显减弱,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱其抑制作用有明显的剂量依赖性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱且发现其机制与抑制粘附分子 CD44v6mg 的表达有关。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱VEGF) 是一种强的促血管生成因子,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱对原位肿瘤的生长和转移瘤的形成起了重要作用,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱研究发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 中药复方可下调肿瘤组织 VEGFmRNA 及其受体 KDRmRNA,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱FltmRNA 的表达 [22~24],柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱从而起到抗胃癌浸润和转移的作用。 6mg 抑制癌基因表达 研究表明,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱人体某些抗癌基因(antioncogene)的失活和癌基因(oncogene)的激活以 及这些变异基因的异常表达是胃癌发生和发展的最根本原因。而调控癌基因的表达是中药 复方抗癌的重要机制之一。陈华[25]发现中药癌平口服液含药血清可显著抑制癌基因 c7901erbB79012 的表达,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱这可能是其抗癌作用的机制之一。周本杰等[26mg,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱27]研究发现,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱N7901 甲基7901N’-硝基-亚硝基胍(MNNG)所致的大鼠溃疡性胃癌组织中 P2lras,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱c7901erbB2 的表达均 成阳性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱而复方连黛片治疗组二者的表达均成阴性,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱且可降低 MNNG 所致的大鼠溃疡性胃 癌的发生率,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱并能改善模型大鼠的体质,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱说明连黛片对抗原癌基因 P2lras,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱c7901erbB2 的激 活可能使其防治胃癌的机理之一。徐力等[28]研究证实,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱三物白散加味方抗癌的机理与 降低人胃癌 SGC79017901 细胞 P53,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱Bcl79012,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱rasP21,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱CD44 的表达率有关。 7 问题与展望 中医药治疗胃癌的疗效和优势已得到公认,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱中医药抗胃癌的研究也成为国内外研究的 热点。但由于中药复方成分和抗癌机理复杂,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱关于机制方面的实验研究虽已取得了一定的 进展,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但仍存在诸多问题需要解决,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱今后应从以下几方面着手。 7.1 重视中医理论的指导中医的治疗应遵循辨证论治的原则才能取得良好的效果,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱而 应用于动物实验的移植性胃癌动物模型无法满足实验对“证”的需要,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使中医的治疗缺乏针 对性。在忽视“证”的客观因素下,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱探讨中医药抗癌的疗效和机制,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱将会丧失中医固有的内 涵和优势。所以今后应加强中医病证结合动物模型的研究,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使病的模型符合中医证型的需 要,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使中医药的治疗更加有针对性。 7.2 进行深入系统的研究大多数文献中观察的指标都比较少,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱缺乏深入细致的研究,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 研究的方剂也有限,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱而且大多以经验方为主,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱虽然能够在一定程度上说明中药复方抗癌的 机制,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但难以从根本上阐明中药复方治疗胃癌的确切机理。笔者建议今后应对中药复方进 行深入、系统的研究,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱加强经典方剂的研究,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱以逐步阐明中药抗胃癌的机理。 7.3 改进研究方法中药有其自身的特点,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱所以其研究方法需进一步改进,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使其更能符 合中医的特点。如 MTT 法,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱虽已成为公认的验证药物敏感性的实验,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但是否适合于中药实 验,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是否能验证中药抗癌的效果,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱值得商榷。因为有些中药是直接诱导细胞凋亡或者杀伤 细胞,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱有些是通过调整机体的功能,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱间接的抑制细胞生长或诱导细胞凋亡。又如中药血清,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱 在体外研究时较中药原药更符合中医治疗的特点,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱尽管目前还存在诸多争议,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但值得深入 研究。 7.4 重视中药毒副作用的研究中药虽具有低毒的特点,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但并不是没有毒副反应。大多 数文献均只报道了中药具有良好的治疗作用,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱但在取得良好效果的同时,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱是否也增加了药 物的毒副反应,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱对此,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱文献中鲜有报道。作为药物,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱不管是中药还是西药,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱都存在毒副反 应的问题[29]。今后应加强对中药毒副反应的研究,柱色谱试剂均为分析纯,高效液相色谱试剂均为色谱使其能更好的服务于临床。
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