鼻炎舒水的薄层鉴别论文

1 药品与试剂 薄荷脑,欧前胡素,甘草次酸,均购自中国药品生物制品检定所；薄荷 MenthahaplocalyxBriq.；白芷 Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.；甘草 GlycyrrhizauralensisFisch.；以上药材均为市售；鼻炎舒水由大连医科大学附属一院提 供（批号 20040212，20040305，20040408）规格为 5ml/支，每毫升含生药 1g；硅 胶 G，青岛海洋化工厂出品；羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，上海化学试剂公司产品。所用 试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 薄荷的薄层色谱鉴别［1］ 2.1.1 对照品溶液的配制精密称取薄荷脑标准品，加石油醚制成每毫升含 2mg 的溶液， 作为对照品溶液。 2.1.2 供试样品溶液的配制取本品 10ml,加石油醚 10ml，置水浴中加热回流 30min，分取石油醚层作为供试品溶液。 2.1.3 阴性对照溶液的制备将处方中薄荷除去，按本品制备工艺及供试品溶液制备方 法，制成阴性对照溶液，装瓶备用。 2.1.4 鉴别方法用微量注射器分别精密吸取供试样品溶液 10，15μll，对照品溶液 10μll，阴性对照溶液 10μll，分别点于同一硅胶 G-CMC-Na 板上，以苯-醋酸乙酯（17： 3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5%香草醛硫酸溶液，在 105℃烘至斑点显色清 晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无此斑 点。结果见图 1。 2.2 白芷的薄层色谱鉴别［1］ 2.2.1 对照品溶液的配制精密称取欧前胡素标准品，加醋酸乙酯制成每毫升含 1mg 的 溶液，作为对照品溶液。 2.2.2 供试样品溶液的配制取本品 5ml，加乙醚提取两次，10ml/次，合并提取液， 挥干乙醚，残渣加醋酸乙酯 1ml 溶解，作为供试品溶液。 2.2.3 阴性对照溶液的制备将处方中白芷除去，按本品制备工艺及供试品溶液制备方 法，制成阴性对照溶液，装瓶，备用。 2.2.4 鉴别方法用微量注射器分别精密吸取供试样品溶液 10，15μll，对照品溶液 10μll，阴性对照溶液 10μll，分别点于同一硅胶 G-CMC-Na 薄层板上，以石油醚-乙醚 (3∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无此斑点。结果见图 2。 2.3 甘草的薄层色谱鉴别［1］ 2.3.1 对照品溶液的配制精密称取甘草次酸标准品，加无水乙醇制成每毫升含 1mg 的 溶液，作为对照品溶液。 2.3.2 供试样品溶液的配制取本品 5ml，置圆底烧瓶中，加 2mol/L 盐酸 50ml，加热 水解 1h，放冷，加乙醚提取 2 次，15ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加无水乙醇 3ml 溶解，加 0.02g 活性炭搅拌，滤过，取滤液作为供试品溶液。 2.3.3 阴性对照溶液的制备将处方中甘草除去，按本品制备工艺及供试品溶液制备方 法，制成阴性对照溶液，装瓶，备用。 2.3.4 鉴别方法用微量注射器分别精密吸取供试品溶液 10，15μll，对照品溶液 10μll，阴性对照品溶液 10μll 分别点于同一硅胶 GF254 薄层板上，以石油醚-苯-醋酸乙酯冰醋酸(10∶20∶7∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试 品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无此斑点。结果见图 3。 2.4 薄荷色谱鉴别结果见图 1。 由图 1 可以清楚的看到，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的一个蓝色斑点（Rf=0.477），阴性对照液无干扰。 2.5 白芷色谱鉴别结果见图 2。 由图 2 可以清楚地看到，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的一个淡黄色斑点（Rf=0.296），阴性对照液无干扰。 2.6 甘草色谱鉴别结果见图 3。 由图 3 可以清楚地看到，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的一个淡蓝绿色斑点（Rf=0.327），阴性对照液无干扰。 3 讨论 在薄荷的薄层检测中，本文比较了苯-醋酸乙酯（19∶1）、苯-醋酸乙酯（18∶2）等不 同溶剂的展开系统的展开效果，均不理想。通过摸索最终确定了以苯-醋酸乙酯（17∶3）为 本实验的展开系统，斑点清晰，分离效果较理想。 1 器材 1.1 药材 菊科植物白子菜 Gynuradivaricata(L.)DC.（经广西中医学院中药鉴定教研室蔡毅副 教授鉴定为栽培品种，2006-03 采于广西南宁）。 1.2 仪器与试剂 Motic 成像显微系统，所有试剂均为分析纯。 2 方法 石蜡切片法，表面制片法，粉末制片法。 3 结果 3.1 根横切面类圆形，次生构造不发达。①表皮细胞 1 列，类长方形，外侧壁略增厚， 排列整齐。②皮层较厚，外侧有数列扁平薄壁细胞，内侧为十余列类圆形细胞；内皮层明 显。③维管束 4～6 束，外韧型。④韧皮部狭窄；形成层不明显；木质部相对较宽，由导 管、木纤维、射线组成；导管多 1～2 个聚生，径向排列，周围常有纤维环绕；初生射线 宽而长；次生射线较短。⑤髓部明显，由薄壁细胞组成。见图 1。 3.2 茎横切面类圆形。①表皮细胞 1 列，类长方形，排列整齐，外被角质层；可见非 腺毛。②表皮下为 3～4 列厚角细胞；皮层较厚，薄壁细胞类圆形，排列疏松。③维管束 外韧型，20～24 束，呈环状排列；韧皮部较窄，外侧可见壁较薄的纤维细胞；形成层不 明显，髓射线宽广；木质部相对较宽，由导管、木纤维、射线组成；导管多 1～2 个聚生， 径向排列，周围常有纤维环绕。④髓部宽广，约占横切面 2/3，由大型薄壁细胞组成。见 图 2。 3.3 叶横切面①上下表皮细胞各 1 列，类长方形，排列整齐，外被角质层；气孔和非 腺毛易见于下表皮。②栅栏组织多为 2 列，不通过主脉；海绵组织较窄，细胞排列疏松。 ③主脉维管束外韧型，常为 5 个，其两侧可见纤维束。见图 3。 3.4 叶表面①上表面：表皮细胞类多角形，垂周壁平直，可见非腺毛。②下表皮细胞 多角形，垂周壁波状弯曲，易见不定式气孔和非腺毛。见图 4。 3.5 粉末特征灰棕色。气清香味淡。①菊糖众多，直径 8.6～100μlm。②非腺毛较多， 常由 3～9 个细胞组成。③偶见石细胞，壁较薄，宽为 40～80μlm。④导管多为网纹，偶 见螺纹、具缘纹孔型。见图 5。 4 小结 通过上述研究表明，白子菜显微特征主要如下：根横切面次生构造不发达，有表皮、 内皮层细胞和髓部。叶栅栏组织有 2 列；粉末中可见大量菊糖及非腺毛。以上显微特征对 白子菜有鉴别意义。 1 白术及其混伪品性状检索 1.根茎或块根呈肥厚团块状，表面有瘤状突起、沟纹 2.根茎表面灰黄色或灰棕色，有须根痕，顶端有下陷圆盘状茎基和芽痕。质地坚实， 不易折断；断面不平坦，有棕色点状油室散在。气清香，味甘，微辛，嚼之略带粘性…… ……………………………………………………………………………白术 2.根茎表面灰黄色或土棕色，下部具须根痕，顶端有残留的茎基。质地坚硬，不易折 断；断面有不规则的纤维，可见凸起筋脉纹（菊花心）。气特异，味淡，微苦…………… …………………………………………………………………菊三七 1.根茎或块根呈不规则连珠状、疙瘩状或结节状圆柱形，圆柱形或圆锥形，无瘤状突 起 3.根茎或块根呈圆柱形、圆锥形 4.断面有明显形成层环、放射状纹理 5.根茎表面黄棕色，有显著纵沟及侧根痕。质地坚硬，不易折断；断面略平坦，有散 在褐色油点。香气浓烈特异，味微苦…………………………………………………………… ……………………………………………………………………木香 5.根茎圆柱形，切片表面灰棕色或黄棕色，形成层环明显，木质部呈放射状纹理，质 地坚硬，易折断；断面无油点。气微，味微苦、辛……………………芍药 4.根表面灰棕色或灰褐色，有纵皱纹或横长纹理。顶端有凹陷的茎痕及红色叶柄残基， 质地坚硬，不易折断；断面略平坦，黄白色至浅灰色，有凹点油室，形成层环和放射状纹 理不明显。香气特异，味苦，微粘………………………土木香 3.根茎或块根呈不规则连珠状、疙瘩状或结节状圆柱形 6.根茎表面灰棕色，具纵皱纹、横曲纹及残留的须根痕，顶端具茎痕或茎基。质地坚 实，断面黄白色或灰白色，有棕色油点散在，暴露稍久有白毛状结晶析出………………… ………………………………………………………………茅苍术 6.表面无纵皱纹，无残留须根痕，顶端不具茎痕或茎基。质地疏松，断面有油点散在， 久置无白毛状结晶析出 7.根茎表面深棕色，有横纹。断面平坦，纤微性强，有棕红色油点散在。气特异，味 辛，微苦…………………………………………………………………………………………… …………………………………………………关苍术 7.根茎表面棕黑色，断面纤微性不强，有黄棕色油点散在。香气较淡，味辛、苦…… ……………………………………………………………………………………………………… ………………………………北苍术 2 白术及其混伪品粉末显微特征检索 1.粉末中石细胞较多 2.油室碎片多见 3.粉末棕色，具韧皮纤维，成束或单个散在，淡黄色，呈短梭形，末端钝圆或分叉， 初生壁与次生壁界限明显，壁层纹细密；木纤维长梭形，偶有分叉………………………… …………………………………………………………………………………北苍术 3.粉末棕色，不具韧皮纤维，木纤维多成束，长梭形或纺锤形，壁厚，孔沟明显。细 胞中菊糖有时与针晶相混。导管为具缘纹孔或网纹，直径 19～48μlm，导管分子短……… ………………………………………………………………………………茅苍术 2.无油室碎片或难见 4.粉末淡黄棕色，菊糖呈扇形或略呈扇形，表面显放射状纹理。木栓石细胞单个或 3 ～5 个成群，淡黄色，呈类多角形、类长方形或类长圆型，少数呈纺锤形，直径 37～ 64μlm。孔沟及胞腔明显，有的可见层纹，腔内不含黄色分泌物。草酸钙针晶细小，长 10 ～32μlm。油室碎片难见………………………………………………………………………… ……………………白术 4.粉末土黄色，无菊糖、油室碎片。棒状针晶两两成对排列于薄壁细胞中或散在，木 栓细胞腔内成堆充满三角形砂晶。有较多石细胞。韧型纤维呈飘带状，末端具短分支或一 端钝圆，直径 1.7～7μlm，胞腔明显，无孔沟……………………关苍术 1.粉末中无石细胞 5.粉末中有菊糖 6.粉末黄绿色，菊糖极多，呈扇形，表面观有放射状纹理。木纤维多成束，长梭形， 直径 16～24μlm，纹孔口横裂缝状，十字状或人字状。油室碎片有时可见，内含黄色或棕 色分泌物。木栓细胞垂周壁微波状弯曲…………………………木香 6.菊糖呈不规则块状，无放射状纹理 7.粉末棕黄色，有木栓细胞及油室碎片，具草酸钙方晶。菊糖众多，呈不规则块状。 无淀粉粒。纤维多成束存在，长梭形，尖端弯曲斜尖，壁厚薄不均，直径 13～ 23μlm…………………………………………………………………土木香 7.粉末类白色，无草酸钙方晶、油室碎片和石细胞。菊糖呈透明不规则块状。纤维有 两种，壁薄者先端锐尖或钝圆，具斜纹孔，壁厚者稍弯曲，孔沟不明显…………………… …………………………………………………………菊三七 5.粉末类白色，无菊糖。含晶细胞方形或长方形，纵向连接，草酸钙簇晶较多，排列 呈纵行。淀粉粒类圆形，脐点三叉状或星状。木纤维主为纤维管胞，呈长梭形，纹孔口斜 裂缝状，孔沟明显，薄壁细胞呈类方形，壁呈连珠状，可见纹孔……芍药 3 小结 白术的混伪品大多数来源于白术同科植物，其相似程度较大，鉴别比较困难，但只要 把性状和显微特征结合起来，大多数种类可以正确鉴别。 根茎呈肥厚团块状，表面有瘤状突起，粉末中有石细胞、菊糖、草酸钙针晶，为白术 的重要鉴别特征。 根茎表面的颜色、须根痕的有无、下陷圆盘状茎基和芽痕、质地、断面棕色点状油室 等可作为白术药材的辅助鉴别特征。 1 仪器与试药 １．１仪器ＵＶ－２２０１紫外可见分光光度计（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）；倾斜式高速 万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；ＰＢ２０３－Ｎ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌ ｅｒＴｏｌｅｄｏ仪器上海有限公司）；ＡＪ１５０Ｌ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌｅｒｉ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌｅｒｉ ｎＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）。 １．２试药实验用药材采自北京市昌平区，落叶晾干，经鉴定为柿树科柿属柿 DiospyrosKaki Ｌ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌｅｒｉ．ｆ．；芦丁对照品（中国药品生物制品检定所，批号：０８０－９３ ０３）；ＡｌＣｌ３·６Ｈ２Ｏ等均为分析纯。等均为分析纯。 2 方法与结果 ２．１因素水平表乙醇作为提取溶剂，对乙醇浓度、溶剂量及提取次数和时间３种因 素进行考察，每种因素分为３个水平，结果见表１。 2.2 供试品溶液的制备精密称取柿叶最粗粉（１０～２２目之间）１ｇ共９份，按照共９份，按照 表２Ｌ电子精密天平（Ｍｅｔｔｌｅｒｉ９（３４）正交实验设计方案，用对应浓度和体积的乙醇回流提取相应次数和时间。 回流结束后合并提取液，放冷，抽滤，滤液转移至１００ｍｌ或２００ｍｌ量瓶中，分别 以其相应的提取溶剂定容，过微孔滤膜（０．４５ μl ｍ），作为供试品溶液。