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鼠妇水煎物镇痛作用研究论文

2020-03-13 16:16
【摘要】目的观察鼠妇水煎物的镇痛作用。方法通过小鼠扭体法致痛、热板法致痛、 大鼠甩尾法热刺激致痛实验对鼠妇水煎物进行镇痛活性研究。结果鼠妇水煎物(蛋白含 量)90,180,360mg·kg-1 灌胃(ig)对醋酸引起的小鼠扭体反应有明显的抑制作用, 抑制率为 32.00%~58.15%;灌胃给药后 30min 和 45min 明显提高小鼠热板痛阈(P< 0.01,P<0.05),镇痛效果随给药量的增加呈剂量依赖关系。结论鼠妇水煎物对多种疼 痛模型均具有明显的抑制作用并呈剂量依赖关系。 【关键词】鼠妇镇痛水煎物 ResearchontheAnalgesicEffectsofWaterDecoctionofArmadillidiunmvulgarei nMice Abstract: ObjectiveTostudytheanalgesiceffectsofwaterdecoctionofArmadillidiumvulgarei nmice.MethodsTheanalgesiceffectsofwaterdecoctionfromArmadillidiumvulgare inmicewerestudiedinmiceandratsusingwrithingreaction,hotplatenociceptiveteplatenociceptivete standtailflicktest.ResultsTheanalgesicexperimentshowedthatproteinofwaterde coctionfromArmadillidiumvulgreatthedoseof90,180,360mg·kg1hadsignificantinhibitiontowrithingresponse(P<0.01,P<0.05)inducedbyaceticacid.Theinhibitoryratewasfrom32.00%to58.15%.Thepainthresholdinmicewithth ehotplateprocedureincreasedobviouslyafterbeingtakenwaterdecoctionfromArmadill idiumvulgarefor30minand45min(P<0.01,P< 0.05).Thethreegroupswithdifferentdoasgescouldobviouslyincreasethepainthres holdinimce.Thepainthresholdinratsprocedureincreasedobviouslyafterbeingtake nwaterdecoctionfromArmadillidiumvulgarefor60minand90mininthetailflicktest( P<0.01,P< 0.05).Thethreegroupswithdifferentdosagescouldobviouslyincreasethepainthres hold.ConclusionThewaterdecoctionfromArmadillidiumvulgarehassignificantana lgesiceffectonanimalmodelsandshowsobviouslydoseplatenociceptiveteeffectralationship. Keywords:Armadillidiamvulgare;Antalgesia;Waterdecoction 鼠妇为鼠妇科动物平甲虫 Armadillidiamvulgave 的干燥全体[1],分布在广东、 河北、山东、江苏、浙江等地。主要含多糖、蛋白质、蚁酸,具有解毒止痛、破血利水作 用。国内曾有报道[1],将鼠妇煎煮用于肝癌晚期的止痛,作用持久性优于杜冷丁,民 间有用于治疗手术后疼痛。有文献报道[2],鼠妇中蛋白起镇痛作用。为此,本文以鼠 妇水煎物的蛋白含量为指标,采用两种动物三种镇痛模型对鼠妇水煎物镇痛作用进行研究, 为进一步开发鼠妇及临床用药提供实验理论依据。 1 材料与方法 1.1 药物鼠妇干体,购于长春中医学院,并由长春中医学院鉴定。焙干鼠妇,经粉碎 后用水煎煮 3~4h,过滤,8000r/min 离心取得上清液即为鼠妇水煎物,采用 Folin 酚法 测定蛋白浓度。 1.2 试剂盐酸曲马多 50mg/片,由石药集团欧意药业有限公司生产,批号: H1096106。生理盐水由内蒙古康源药业提供,批号:030819。冰醋酸由北京北化精细 化学品有限责任公司提供。 1.3 实验动物 18~22g 清洁级昆明小鼠,雌雄各半,由吉林大学生物实验中心提供。 清洁级 Wistar 大鼠,体重 180~200g,雌雄各半,由吉林大学生物实验中心提供。 1.4 实验仪器安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司;智能热板仪(YLS6Bplatenociceptivete6B), (HH)恒温水浴锅,江苏中大仪器厂。 1.5 统计学处理实验数据以±ss 表示,组间组内比较采用 t 检验。 1.6 方法 1.6.1 醋酸诱发小鼠扭体镇痛实验[3,4] 取禁食 12h 小鼠 50 只(雌雄各半)随机分成 5 组,第 1 组灌胃(ig)生理盐水,为 阴性对照组;第 2 组灌胃(ig)盐酸曲马多 15mg/kg,为阳性对照组;第 3~5 组分别灌 胃不同剂量的鼠妇水煎物受试液组(蛋白含量分别为 90,180,360mg·kg-1)3 个剂量。 各组给药 30min 后,分别每只鼠腹腔注射(ip)0.6%醋酸溶液 0.1ml/10g,观察 20min 内各鼠有无扭体反应出现及产生的扭体反应数并计算扭体次数减少百分率(%)。 整个实验温控于(21±s1)℃。 扭体次数减少百分率(%)=对照组扭体反应均数-试药组扭体反应均数试药组扭体反 应均数×100% 1.6.2 小鼠热板法[5] 将 50 只雌性小鼠(初筛,5s<痛阈<30s)随机均分 5 组,每组 10 只。第 1 组灌胃 (ig)生理盐水,为阴性对照组;第 2 组灌胃(ig)盐酸曲马多 1.5mg/kg,为阳性对照 组;第 3~5 组分别灌胃不同剂量的鼠妇水煎物受试液(蛋白含量分别为 90,180,360mg·kg-1)3 个剂量。灌胃后 15,30,45 及 60min 记录小鼠投入热板 至出现舔后足的反应时间(s)作为痛阈值。如小鼠在热板上停留 60s 后仍无痛反应,应 立即取出,按 60s 计算。痛阈提高百分率(%)为: 痛阈提高值(%)=用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值用药前平均痛阈值×100% 1.6.3 大鼠甩尾法[6] 以(55±s1)℃恒温水浴为热致痛源。取 Wistar 大鼠固定后,将其尾尖部以上 5cm 放入热水中,记录大鼠尾部入水到缩离水面的时间,间隔 5min 测两次,挑选甩尾反应平 均时间在 3~10s 以内的大鼠 50 只,雌雄各半,随机分为 5 组,第 1 组灌胃(ig)生理盐 水,为阴性对照组;第 2 组灌胃(ig)盐酸曲马多 1mg/ml,为阳性对照组;第 3~5 组 分别灌胃不同剂量的鼠妇水煎物受试液组(蛋白含量为 90,180,360mg·kg-1)3 个剂 量。于给药后 30,60,90,120,150min 分别测定大鼠的甩尾时间,痛阈提高百分率 (%)。 2 结果 从表 1 可见,与对照组相比,在醋酸诱发小鼠扭体镇痛实验中,盐酸曲马多和鼠妇水 煎物 3 个剂量组对醋酸诱发小鼠扭体反应均有明显的抑制作用(P<0.01),鼠妇水煎物 的低、中、高 3 剂量扭体减少百分率分别为 32.00%,48.15%,58.51%。镇痛效果随 给药量的增加呈剂量依赖关系。表 1 鼠妇水煎物对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响(略) 在小鼠热板实验里,盐酸曲马多和鼠妇水煎物均能延长小鼠热板痛阈反应时间(P< 0.05 或 P<0.01)。鼠妇水煎物在 ig 后 15min 发挥药效,30min 左右药效达到最大。 鼠妇水煎物低、中、高剂量镇痛效果随给药量的增加呈剂量依赖关系。结果见表 2。表 2 鼠妇水煎物对小鼠热板热刺激实验影响(略) 在大鼠甩尾热刺激法中,鼠妇水煎物低、中、高剂量组均能明显提高大鼠甩尾热刺激 的痛阈,与给药前基础痛阈值及对照组比较均有显著性差异(P<0.05 或 P<0.01),而 且鼠妇水煎物低、中、高 3 个剂量镇痛效果随给药量的增加呈剂量依赖关系,见表 3。由 此可见,鼠妇水煎物具有镇痛作用。表 3 鼠妇水煎物对大鼠热刺激甩尾实验影响(±ss) 3 讨论 《本草纲目》曰:鼠妇又名鼠蟠、地虱、湿生虫等,气味酸、温、无毒。主治气癃小 便不利,妇人经闭血瘕,久疟寒热,风虫牙齿疼痛,小儿撮口惊风,鹅口疮等[2]。鼠 妇体内多糖含软骨素 A 或 C,或含玻璃(糖醛)酸。所含脂类中有不皂化物 10%,丙酮不 溶脂 5%,皂化后的脂肪酸组成为十四酸 0.7%,十六酸 20.6%,十八酸 8.3%,廿酸 0.7%,十八碳烯酸 53.7%,十八碳二烯酸 10.1%,十八碳三烯酸 2.5%,其他不饱和脂 肪酸 3.2%,不皂化物含 41.0%甾醇,其主要为胆甾醇,可能还含蚁酸。在中医药方面, 鼠妇具有很高的药用价值。在止痛方面,鼠妇主要含蛋白质、蚁酸,具有解毒止痛、破血 利水作用。有报道鼠妇用于手术后疼痛、肝癌剧痛,效果可与杜冷丁相媲美。民间有用新 鲜鼠妇适量煎汁口服止腹痛,且鼠妇治疗癌性疼痛的临床观察中镇痛效果肯定[2]。本 实验结果证明鼠妇水煎物对多种镇痛模型均有较强的镇痛作用,为其临床治疗应用提供了 科学依据。 【摘要】目的探讨徐长卿水煎剂对小鼠抗炎及镇痛的作用。方法采用棉球植入致小鼠 慢性炎症的方法,测定小鼠肉芽肿的重量;用热板法测定小鼠的镇痛阈值,用扭体法测定 小鼠扭体反应的潜伏期和扭体次数。结果徐长卿水煎剂可使小鼠肉芽肿重量明显减轻;2h 痛阈值明显延长,扭体反应潜伏期延长、扭体次数明显较少。结论徐长卿水煎剂具有一定 的抗炎和镇痛作用。 【关键词】徐长卿抗炎镇痛小鼠 EffectoftheExtractofCynachumpaniculatumonAntiinflammationandAnalgesicinMice Abstract:ObjectiveTostudytheantiinflammatory,analgesiceffectoftheextractofCynachumpaniculatuminmice.Meth odsTomeasuretheweightsofgranuloma,Analgesicthreshold,latentperiodoftorsio nbodyreaction.ResultsExtractofCynachumpaniculatumcouldrelieveweightsofgr anuloma,prolonganalgesicthresholdandlatentperiodoftorsionbodyreaction.Con clusionTheextractofCynachumpaniculatumhastheeffectsofantiinflammationandanalgesic. Keywords:Cynachumpaniculatum;Anti-inflammatorymice;Analgesic;Mice 徐长卿为萝藦科植物徐长卿 Cynachumpaniculatum(Bge.)Kitag 的干燥根及根茎 [1]。为我国历版药典收载的常用中药,广泛用于风湿、寒凝、气滞、血淤所致的风湿痹 痛、腰痛、跌打伤痛、牙痛等各种痛症。近年发现用于手术后疼痛及癌症疼痛也有一定的 止痛作用。 徐长卿的主要活性成分为丹皮酚(paeonol)。研究表明丹皮酚具有镇静、镇痛、催 眠、解热、抗炎、抗过敏和免疫调节等多种药理生理活性[2]。其适用证为发热、头痛、 神经痛、肌肉痛、风湿性关节炎和类风湿性关节炎,并且丹皮酚具有毒副作用小,吸收、 代谢和排泄迅速的特点。目前在临床上还常用于多种炎症和咳嗽,但对于徐长卿水煎剂抗 炎及镇痛作用效果却没有科学实验证明。本次实验对徐长卿水煎剂抗炎及镇痛作用进行了 初步研究。 1 材料 1.1 药物徐长卿水煎剂:取市售徐长卿全草干品,粉碎,加水煎煮 3 次,收集水煎液, 浓缩,使徐长卿含量按生药量计算为:30g/100ml。 1.2 试剂冰醋酸、氨水,均为国产分析纯。 1.3 动物昆明种小鼠,雌雄各半,体重 18~22g,由延边大学医学部实验动物科提供。 1.4 仪器 GB204 型精密电子称,恒温干燥箱,均由上海仪器厂制。 2 方法 2.1 抗炎实验根据文献稍加改进[3]。取 40 只小鼠,雌雄各半,用 20%乌拉坦麻醉 后,于小鼠背部植入 20mg 高压灭菌棉球。手术后第 2 天开始随机分成 4 个组:对照组, 徐长卿水煎剂大、中、小剂量组,每组 10 只。大、中、小剂量组每天分别按 240,120,60mg/kg 灌胃,对照组以等体积蒸馏水灌胃,各组灌胃给药 1 次/d,连续给 药 7d。于末次给药 1h 后脱臼颈椎处死小鼠,手术取出棉球肉芽肿,称重,其重量减去棉 球重量为肉芽肿湿重。然后将其置于 58℃烘干箱中,干燥 24h,取出称重,其重量减去 棉球重量即为肉芽肿干重。 2.2 镇痛实验 2.2.1 热板法[3]取雌性小鼠若干只,把每只小鼠放在 55℃金属板上,先进行动物 筛选,把两次镇痛阈均值小于 6s 或大于 30s 的动物剔除。将筛选合格的小鼠 40 只随机分 为 4 组:对照组,徐长卿提取物大、中、小剂量组,每组 10 只。大、中、小剂量组每天分 别按 240,120,60mg/kg 剂量灌胃,对照组以等体积蒸馏水灌胃。各组动物分别灌胃 给药 1 次,于 1,1.5,2h 测定小鼠镇痛阈值。 2.2.2 扭体法[4]取小鼠 40 只,随机分为 4 组:对照组,徐长卿提取物大、中、小 剂量组,每组 10 只。大、中、小剂量组每天分别按 240,120,60mg/kg 灌胃,对照组 以等体积蒸馏水灌胃,连续给药 4d。于最后给药 1h 后,每只小鼠按 0.1ml/10g 分别腹 腔注射 6g/L 冰醋酸,观察出现扭体反应的潜伏期和 15min 内的扭体次数。扭体反应表现 为腹部收缩、躯体扭曲、后肢伸展及蠕行等。 2.3 统计学处理数据以平均数±s标准差表示,应用 S6BAS6B8.2 版统计软件进行统计处理。 统计方法采用 t 检验。 3 结果 3.1 徐长卿提取物对棉球致小鼠慢性炎症作用的影响从表 1 可见,与对照组比较,大 剂量组徐长卿提取物能明显抑制棉球植入致小鼠肉芽肿的生长(P<0.01)。表 1 徐长卿 提取物对棉球肉芽肿致小鼠慢性炎症作用的影响(略) 3.2 徐长卿提取物对小鼠镇痛作用的影响 3.2.1 热板法从表 2 可见,与对照组比较,大、中、小剂量组 1,1.5h 镇痛阈值和中、 小剂量组 2h 镇痛阈值无显著差异(P>0.05),而大剂量组 2h 镇痛阈值与对照组比较,具 有显著差异(P<0.01)。表 2 徐长卿提取物对热板法致小鼠疼痛反应的影响(略) 3.2.2 扭体法从表 3 可见,与对照组比较,大剂量组明显延长扭体反应潜伏期 (P<0.05);大剂量组和中剂量组均明显减少小鼠扭体次数(P<0.05 或 P<0.01)。表 3 徐长卿提取物对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响(略) 4 讨论 徐长卿提取物中含有丰富的丹皮酚黄酮类化合物等[2]。徐长卿能刺激下丘脑垂体、 肾上腺皮质系统并有增强作用,因而可抑制免疫反应;同时有改善血液循环和抗炎作用, 在临床上用于抗炎。胡传英[6]报道徐长卿酊剂可刺激囊壁,破坏囊壁纤维层,使囊内 黏液蛋白的变形,可将囊肿消失,并刺激囊肿局部血液循环。本实验研究结果表明,徐长 卿水煎剂能明显抑制棉球肉芽增生(P<0.05 或 P<0.01),说明徐长卿水煎剂具有明显 的抗炎作用。 疼痛是由一些强烈的伤害性刺激经过神经反射弧,传至大脑皮层引起的一种感觉。在 临床上所用的镇痛剂种类甚多,但它们的作用归纳为两个方面:一是减弱疼痛的感觉;二 是改善对疼痛的反应。实验采用小鼠热板和扭体法,通过两种不同的疼痛模型证明了徐长 卿水煎剂具有镇痛作用。其中热板法实验可见徐长卿提取物不同浓度均可推迟小鼠舔后足 反应出现的时间,其中徐长卿水煎剂 240mg/kg 剂量组,在给药 2h 效果明显,表明徐长 卿水煎剂具有中枢镇痛作用。扭体法实验可见徐长卿提取物的较高浓度可延长小鼠扭体出 现的潜伏期和扭体次数,240mg/kg 剂量组作用明显。说明徐长卿提取物对化学刺激性物 质引起的炎性疼痛也有抑制作用。 总之,徐长卿提取物具有一定的抗炎、镇痛作用。文献报道[7],黄酮类化合物的 抗炎、镇痛机理与钙离子拮抗有关,其详细作用机理有待进一步研究。 【摘要】目的探讨养血生乳口服液的药理作用。方法观察养血生乳口服液对产后大鼠 及急性失血小鼠 Hb 和 RBC 的影响,及对小鼠产后乳汁分泌量和游泳时间的影响。结果产 后大鼠及急性失血小鼠 Hb 和 RBC 明显降低,经养血生乳口服液治疗后,动物 Hb 和 RBC 显著升高,母鼠在产后第 4 天和第 10 天的泌乳量明显升高,小鼠游泳时间明显延长。结 论养血生乳口服液有明显的补血、抗疲劳和促进产后乳汁分泌作用。 【关键词】养血生乳口服液补血抗疲劳乳汁分泌 Abstract: ObjectiveTostudythemainpharmacologicalactionofYangxueS6BhengruOralLiquid. MethodsEffectsofYangxueS6BhengruOralLiquidonHbandRBCinpuerperalratandac utebleedingmicewereobserved.Itseffectsonbreastmilksecretionofpuerperalmic
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