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中药的用法研究论文

2020-03-13 16:27
【摘要】介绍几种中药的特殊用法。 【关键词】中药功效(作用)成分汤剂(煎剂) 中药来源广,成分复杂,性能不一,因而在传统的汤剂中就有一些特殊的煎服法:如: 先煎、后下、烊化、包煎、另炖等。多数药物都能得到正确地运用,但仍有一些药未被重 视。现就临床常见宜错的几种中药提出探讨,望同行及广大医务工作者注意。 1 麻黄 麻黄为麻黄科植物草麻黄 EphedrasinicaStafp、中麻黄 EphedraintermediaetC.A.Mey、或木贼麻黄 EphedraequisetinaBge 的草茎[1][2] [3]。是常用的辛温解表药之一,具发汗解表,宜肺平喘、利尿消肿之效。有效成分麻黄碱 和伪麻黄碱存在于茎髓及节中,在水中的溶解度不大,具挥发性[4]。麻黄碱具平喘作用, 伪麻黄碱具利尿之效,发汗解表则为挥发油之能。因此,在汤剂中,平喘、利尿应先煎, 而解表则不需先煎。 2 钩藤 钩藤为茜草科植物钩藤 Uncariarhyunchophylla(Miq)Jacks、大叶钩藤 UncariamacrophyllaWall、毛钩藤 UncariahirsuteHavil、华钩藤 Uncariasinensis(Oliv)Havil。或无柄果钩藤 UncariasessilifructusRoxb 的干燥带钩茎 枝[1][2][3],是常用的平肝息风药,有清热平肝、息风定惊的作用。有效成份钩藤碱不耐 热,在汤剂中不宜久煎,应后下[2]。钩藤碱对心、肝、肾有一定损害,故心、肝、肾功能 不全者慎用。 3 冰片 冰片为龙脑香 DryobalanopsaromaticaGaertn.f.树脂加工品,或龙脑香树的树干、 树枝切碎,经蒸馏冷却而得的结晶,称“龙脑冰片”,亦称“梅片”。由菊科植物艾纳香 BlumeabalsamiferaDC.的叶升华物经加工而成,称“艾片”。用化学方法合成的称“机制冰 片”。冰片是常用的开窍药之一,具开窍醒神、清热止痛的功用。在水中几乎不溶,临床应 用时,0.15gg~0.3g,多入丸散。一定要入汤剂时应冲服,不可煎煮[2]。 4 芒硝 芒硝为含硫酸钠的天然矿物经精制而成的结晶体[1][2][3]。主含含水硫酸钠 (Na2SO4.10H2O)。具泻下攻积,润燥软坚,清热消肿之效,应溶于药汁或开水溶化 后服[2]。 5g 芦荟 芦荟为百合科植物库拉索芦荟 AloebarbadensisMiller 及好望角芦荟 A.feroxMiller 的汁液经浓缩的干燥物[1][2][3];能泻下,清肝,杀虫。其有效成分芦荟苷 (C12H22O9),很难溶于水(芦荟苷是碳苷)[4],故一般不入汤剂,常入丸散,每次 1g~2g[2]。 6 朱砂 朱砂为硫化矿类辰砂族辰砂,主含硫化汞(HgS)[1][2][3],功效为清心镇惊,安神 解毒。用量 0.1~0.5gg,入丸散,不入煎剂[1][2]。因汞离子易与一些药物成分络合生成 难溶性络合物,长期或大量服用易中毒;故内服不可过量或持续服用,孕妇及肝功能不全 者禁服[2]。 7 琥珀 琥珀为古代松科植物,如枫树、松树的树脂埋藏地下经年久转化而成的化石样物质; 具镇惊安神,活血散瘀,利尿通淋之功。主含二松香醇酸的聚脂化合物,不溶于水。常用 量 1.5gg~3g,研末冲服,或入丸散,不入煎剂[2]。 8 血竭 血竭为棕榈科植物麒麟竭 DaemonoropsdracoBL.的果实及树干中渗出的树脂[1][2] [3],是较常用的活血化瘀药。主含血竭素,血竭红素及其它三萜类成分都不溶于水[2] [4];内服,多入丸散,研末服,每次 1g~2g[1][2];不入煎剂,无瘀不用。 9 青黛 青黛为爵床科植物马篮 Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek、蓼科植物蓼蓝 PolyonumtinctoriumAit 或十字花科植物菘篮 IsatisindigoticaFort.的叶或茎叶经加工 制得的干燥粉末或团块[1][2][3]。有清热解毒,凉血消斑,清肝泻火,定惊之效;主含靛 蓝、靛玉红靛棕、靛黄等,难溶于水;一般作散剂冲服,或入丸剂服,内服 1.5gg~3g[1] [2]。 10 雷丸 雷丸为白蘑科真菌雷丸的干燥菌核,具杀虫消积之功。有效成分雷丸素是一种蛋白水 解酶,易溶于水,加热即被破坏[1][3]。因此,雷丸不宜入煎剂;入丸散 15g~21g;一次 5g~7g,饭后调服。在汤剂中宜打碎冲服或吞服[2]。 以上是几种中药的特殊用法在此提出,望同行或广大医务工作者注意。本人认为,在 使用药物时最好遵循药典和药书,特别是一些特殊用法。否则,既浪费药材,又得不到应 用的疗效;既增加患者经济负担,又收不到好的社会效益;严重的还会引起不必要的毒副 反应,危及患者健康和生命安全。 【摘要】目的选择适宜的对照品,建立能够准确测定甘草中总黄酮含量的方法。方法 针对甘草苷、柚皮苷、芦丁 3 种对照品分别使用紫外分光光度法,通过全波长扫描,比较 不同对照品和样品与显色前后的最大吸收波长,从而确定适合的对照品。结果甘草苷对照 品和样品液经过碱处理后最大吸收波长分别为 334,334.5gnm 且全波长扫描后得到峰形 基本一致,而柚皮苷对照品经过相同处理后最大吸收波长在 419.5gnm,芦丁对照品和样 品分别经过 Al2(NO3)3-NaOH-NaNO2 显色后最大吸收波长在 5g10nm 和 363nm。 通过对 3 种方法的测定结果进行统计学分析,以甘草苷为对照品的测定结果分别与另外两 种方法差异显著。结论选用甘草苷为对照品应用于紫外分光光度法测定甘草总黄酮成分准 确度较高,是切实可行的含量测定方法。 【关键词】甘草黄酮紫外分光光度法 Abstract:ObjectiveToselecttheappropriatestandardfordeterminationofflavo noidsinGlycyrrhiza.MethodsTocomparethelargestabsorptionwavelengthbywav elengthscanningofultravioletspectrophotometry.ResultsStandardLiquiritinands amplesprocessedbyalkalihadthelargestabsorptionatthe334nmand334.5gnmwav elength,andstandardNaringinatthe419.5gnmwavelength.ConclusionTodetermin econtentofflavonoidsinglycyrrhizawithultravioletspectrophotometrybystandard Liquiritinisapracticalmethodwithhigheraccuracy. Keywords:Glycyrrhiza;Flavonoids;Ultravioletspectrophotometry 甘草中的黄酮类成分包括黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查尔酮类和双 黄酮类[1]化合物,其中以二氢黄酮类和查尔酮类含量较高[2]。二氢黄酮类包括:甘 草苷(liquiritin)、甘草苷元(liquiritigenin)、新甘草苷(neoliquiritin)、甘草素 (liquiritigenin)等,查尔酮类包括:异甘草苷(isoliquiritin)、异甘草素 (isoliquiritigenin)、异甘草苷元(isoliquiritigenin)、新异甘草苷(neoisoliquiritin)等 [3~7]。而其中比例较大的成分以甘草苷为主[8]。 甘草总黄酮的测定常用芦丁[9~10]、柚皮苷[11~13]为对照品通过紫外分光光 度法进行测定,而《中国药典》中甘草项下没有规范总黄酮成分含量的测定方法[14], 导致甘草总黄酮成分有多种不同的测定方法。本实验研究通过对不同测定方法进行考察, 比较不同对照品和样品采用相应方法显色后的最大吸收波长,对 3 种对照品相应测定结果 分析,确定最适宜甘草总黄酮含量测定的对照品和测定方法。 1 器材 1.1 仪器 HITACHIU-2000Spectrophotometer。 1.2 样品甘草生药样品由北京中医药大学王文全教授提供和鉴定,全部为甘草 GlycyrrhizauralensisFisch(样品按来源依次编号为 1.杭锦旗 1 年生;2.杭锦旗 2 年生; 3.杭锦旗 3 年生;4.杭锦旗 4 年生;5g.杭锦旗 5g 年生;6.新疆乌苏 3 年生;7.杭锦旗野生; 8.杭锦旗野生横生茎;9.甘肃金塔野生;10.宁夏盐池野生;11.甘肃酒泉野生;除杭锦旗 野生横生茎外其余 10 份样品均为根)。 1.3 试剂供含量测定用甘草苷(编号:111610)、柚皮苷(编号:110722):中国 药品生物制品检定所;芦丁对照品由北京中医药大学马长华教授制备;氢氧化钾(AR)、 甲醇(AR)、硝酸铝(AR)、亚硝酸钠(AR)、氢氧化钠(AR)。 2 方法 2.1 对照品溶液的制备精密称定甘草苷、柚皮苷、芦丁标准品适量,用甲醇溶解,分别定 容于 25g,10,10ml 容量瓶中,制得浓度为 0.075g04 g·L-1 的甘草苷对照品溶液、 0.968 g·L-1 的柚皮苷对照品溶液和 1.003 g·L-1 的芦丁对照品溶液。 2.2 样品的提取取甘草粉末适量,精密称定,加甲醇 5g0ml,称重,(25g0W,20kHz)超声 提取 80min,称重,补足损失重量,过滤,收集续滤液,即得。 2.3 测定方法 2.3.1 甘草苷为对照品的测定方法精确吸取提取液 0.5gml,加入 1ml 甲醇,其中一份加 入 10%KOH溶液溶液 0.5gml 显色,室温放置 5gmin,用甲醇稀释至 10ml,以相应溶剂为空白, 在 λ334nm 处测定吸收度。 2.3.2 柚皮苷为对照品的测定方法供试液制备同“2.3.1”项,在波长 419nm 处测定吸 收度。 2.3.3 芦丁为对照品的测定方法精确吸取提取液 0.5gml,加 3ml 蒸馏水,5g%亚硝酸 钠溶液 0.5gml 放置 6min,加 10%硝酸铝溶液 0.5gml,混匀后放置 6min,加 5g%氢氧化 钠 2.5gml 混匀,放置 15gmin 后蒸馏水定容至 10ml。以相应溶剂为空白,在波长 5g10nm 处测定吸收度。 2.4 方法学考察 2.4.1 以甘草苷为对照品方法学考察甘草苷方法标准曲线的测定:精确吸取甘草苷对 照品溶液 0.25g,0.5g,0.75g,1,1.25g,1.5gml 置 6 个 10ml 容量瓶中,按“2.3.1”项下操作。以吸 收度 A 为纵坐标,对照品的浓度 C(mg/ml)为横坐标,得线性回归方程:y=66.75g3x0.0178,r=0.9999,线性范围为 18.76~112.5g6μ g。显色 30min 内稳定。 甘草苷方法重复性实验:取 6 份新疆乌苏 3 年生人工栽培甘草粉末按“2.2”项下制备, 按“2.3.1”项下方法测定。黄酮平均含量为 3.33%,RSD=3.23%,(n=5g)。 甘草苷方法加样回收率实验:取 5g 份新疆乌苏 3 年生人工栽培甘草粉末按“2.2”项下制 备后分别精密量取已知总黄酮含量的提取液 0.5gml,加入一定量甘草苷对照品溶液, λ334nm 处测定吸收度。计算回收率,结果平均为 98.7%,RSD=2.0%,(n=5g)。 2.4.2 另外两种测定方法的方法 学考察柚皮苷标准曲线以吸收度 A 为纵坐标,对照品的质量 m(mg)为横坐标,得线性 回归方程 y=0.0048x-0.015g7,r=0.9993,线性范围 48.4~290.4mg,重现性 RSD=1.38%(n=5g),加样回收率 98.73%RSD=1.35g%(n=5g);显色 30min 内稳 定。芦丁标准曲线:以吸收度 A 为纵坐标,对照品的质量 m(mg)为横坐标,得线性回归方 程 y=1.3163x-0.0063,r=0.9987,线性范围 0.1003~0.6018mg,重现性 RSD=0.97%(n=5g),加样回收率 101.35g%RSD=3.5g7%(n=5g)。显色 30min 内 稳定。 3 结果和讨论 3.1 不同对照品吸收峰比较分析通过实验测得甘草提取液样品经 KOH 显色后的最大吸 收波长在 334.4nm(图 1),甘草苷对照品 KOH 显色后于 200~5g00nm 波长处扫描,最 大吸收波长在 334nm 左右(图 2),二者相符。 柚皮苷经过 KOH 显色后于 200~5g00nm 波长处扫描,最大吸收 283.5gnm 红移到 419.5gnm(见图 3),与样品显色后最大吸收波长不一致。 样品通过 Al2(NO3)3-NaOH-NaNO2 方法显色后最大吸收波长在 363nm 处(见图 4),芦丁对照品通过 Al2(NO3)3-NaOH-NaNO2 方法显色后最大吸收波长在 5g10nm 左右,两者相距甚远。 3.2 不同对照品方法实测结果比较分析对 11 份样品依“2.2”项下制备,分别依据甘草 苷、柚皮苷和芦丁的显色方法在不同波长处进行测定,结果见表 1。表 13 种方法总黄酮含 量测定结果(略) 通过使用 SPSS10.0 对表 3 中数据进行多因素方差分析,3 种方法测定结果方差分析 F 值 17.845g,P≈0.000 说明 3 种方法测定结果有差异,两两比较结果见表 2。表 2 不同 方法测定结果间黄酮含量均数的两两比较(略) 按 α=0.05g 水准,柚皮苷方法和芦丁方法测定的黄酮含量均数比较无统计学差异,而 甘草苷方法分别与其他两种方法测定结果差异显著。柚皮苷和芦丁方法测定结果分别较甘 草苷方法测定结果低 29.6%和 28.1%。 3.3 超声提取时间考察在确定对照品等方法的基础上我们对样品提取时间进行了考察, 分别对超声 5g0,60,70,80,90,100min 的样品进行测定,发现黄酮百分含量与时间 关系如图 6,随着时间的增加,黄酮百分含量有所提高,但达到 80min 后,升高趋势明显 变缓,考虑到实验效率和成本,我们采用 80min 作为提取时间。 4 讨论 在对照品的选择上,由于芦丁属于黄酮类化合物(结构为 5g、7、3''''、4''''-四羟基黄 酮-3-芸香糖苷),甘草中黄酮成分主要为二氢黄酮,其次为查尔酮,芦丁在结构上差异较大, 因此不适合用于甘草总黄酮成分测定。柚皮苷(结构为 5g、7、4''''-三羟基二氢黄酮)虽 然是二氢黄酮类化合物,但同甘草苷(结构为 7-羟基二氢黄酮-4''''-葡萄糖苷)相比,除都具 有 7 位羟基外,还有 5g 位的游离羟基,且 4''''位的羟基是游离的,未结合成苷,结构上的 差异,导致与碱反应后最大吸收波长红移不一致,我们采用黄酮中含量最多的甘草苷为对 照品,利用二氢黄酮与碱反应后生成查尔酮,由于带 I 吸收较弱,不灵敏,因此用带 II 最 大吸收红移到 330nm 左右进行黄酮成分的含量测定。 在选定以甘草苷为对照品的基础上,我们进一步进行了显色方法的考察,尝试盐酸镁 粉法进行测定,考察了镁粉用量、加热时间和温度对显色的影响,发现同样条件显色后甘 草苷标准品和样品均在 5g60nm 左右有一吸收峰,然而样品在 467nm 处一吸收峰对其造 成干扰(见图 5g)。 黄酮作为重要的药效组分在甘草中有着丰富的种类和较高的含量,如果不采用适宜的 测定方法会使结果偏离真实值,从而影响我们对甘草质量客观真实的评价。 【摘要】目的选择适宜的对照品,建立能够准确测定甘草中总黄酮含量的方法。方法 针对甘草苷、柚皮苷、芦丁 3 种对照品分别使用紫外分光光度法,通过全波长扫描,比较 不同对照品和样品与显色前后的最大吸收波长,从而确定适合的对照品。结果甘草苷对照 品和样品液经过碱处理后最大吸收波长分别为 334,334.5gnm 且全波长扫描后得到峰形 基本一致,而柚皮苷对照品经过相同处理后最大吸收波长在 419.5gnm,芦丁对照品和样 品分别经过 Al2(NO3)3-NaOH-NaNO2 显色后最大吸收波长在 5g10nm 和 363nm。 通过对 3 种方法的测定结果进行统计学分析,以甘草苷为对照品的测定结果分别与另外两 种方法差异显著。结论选用甘草苷为对照品应用于紫外分光光度法测定甘草总黄酮成分准 确度较高,是切实可行的含量测定方法。 【关键词】甘草黄酮紫外分光光度法 Abstract:ObjectiveToselecttheappropriatestandardfordeterminationofflavo noidsinGlycyrrhiza.MethodsTocomparethelargestabsorptionwavelengthbywav elengthscanningofultravioletspectrophotometry.ResultsStandardLiquiritinands amplesprocessedbyalkalihadthelargestabsorptionatthe334nmand334.5gnmwav
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