黄柏盐炙工艺影响因素分析论文

【摘要】目的：确定影响黄柏盐炙工艺的因素。方法:以盐酸小檗碱为检测指标，用 HPLC 法分别考察不同闷润时间、加盐量、炒制时间和温度等因素下不同炮制品中盐酸小 檗碱的含量。结果：黄柏经盐润后，盐酸小檗碱的含量增加；闷润 2 个小时盐酸小檗碱的 含量最高；随着炒制温度的提高和时间的延长，盐炙黄柏和清炒黄柏中盐酸小檗碱的含量 均有下降的趋势，但盐炙黄柏中盐酸小檗碱的含量均较相应的清炒黄柏中的含量高。结论： 加盐量、闷润时间、炒制温度与时间均为影响盐炙黄柏炮制工艺的影响因素。 【关键词】黄柏盐炙工艺 黄柏为芸香科植物黄皮树 PhellodendronchinenseSchneid．的干燥树皮。该药苦的干燥树皮。该药苦、 寒。归肾、膀胱经。具有清热燥湿，泻火除蒸，解毒疗疮之效。已经有二千多年的药用历 史，为中医传统的清热泻火药。自晋代以来大量的医药文献中，计有净制、切制、蜜制、 酒制、盐制、炭制、乳汁制等近 20 种炮制方法。2005 年版《中国药典》[1]只收载了盐 制和炭制的方法。 中医传统理论认为黄柏盐炙可引药入肾，缓和苦燥之性，增强滋肾阴、泻相火、退虚 热的作用。在 2005 年版《中国药典》[1]的附录药材炮制通则中对盐制黄柏是这样规定的： “取净药材，加盐水拌匀，闷透，置锅内，以文火加热，炒至规定的程度时，取出，放凉。 每 100kg 净药材用食盐 2kg。”但对黄柏的盐制工艺如溶解盐的加水量、闷润时间、加盐 量、炒制的温度和时间、炒制的程度等并未做出明确的规定，这就导致盐制黄柏的炮制品 质量有很大差异。特别是加盐量和炒制程度，各省的炮制规范有很大差异。如《湖南省中 药材炮制规范》[2]（1983 年版）规定：……炒至外表呈黄褐色，取出即可。每 100kg 药材用盐 5kg。而《四川中药饮片炮制规范》[3]中则规定：……炒至黑黄色为度。每 100kg 药材用盐 2kg。为了阐明炮制机理，本文以黄柏中的主要成分盐酸小檗碱为检测指 标，对影响黄柏盐制工艺的几个因素进行了考察，为今后制定黄柏盐制的合理炮制工艺， 阐明炮制机理提供科学依据。 1 仪器与试剂 LC-10ATVP 高效液相色谱仪、SPD-10AVP 紫外检测器（岛津）；KQ-250 型超声波 清洗器（昆山市仪器有限公司）；SartoriusDp225D 型电子天平；QE-200 克药材粉碎 机（武义县屹立工具有限公司）；黄柏药材，购自四川省药材公司，经辽宁中医药大学药 用植物教研室王冰教授鉴定为芸香科植物黄皮树 PhellodendronchinenseSchneid.的干 燥树皮。盐酸小檗碱对照品（中国药品生物制品检定所，批号：0713-9906）；乙腈为色 谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。 2 黄柏中盐酸小檗碱的含量测定 2.1 色谱条件色谱柱 TC-C18（150mm×4.6mm，安捷伦）；流动相：乙腈-0.1% 磷酸溶液（50：50）（每 100ml 加十二烷基硫酸钠 0.1g），检测波长为 265nm；流速： 1ml/min；柱温为 30℃。理论板数按盐酸小檗碱计算应不低于 4000。 2.2 对照品溶液的制备精密称取在 100℃干燥 5 小时的盐酸小檗碱对照品适量，加甲 醇制成每 1ml 含 0.1mg 的溶液，即得。每次进样 5μll。 2.3 供试品溶液的制备取本品粉末（过 40 目筛），精密称定，置 100ml 量瓶中，加 甲醇约 80ml，超声处理（功率 250W，频率 40kHz）30 分钟，放冷，用甲醇稀释至刻 度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。每次进样 10μll。 2.4 线性关系考察精密称取盐酸小檗碱对照品 5.06mg,置 50ml 量瓶中，加甲醇稀释 至刻度，摇匀,即得每 1ml 含盐酸小檗碱 0.1012mg 的对照品溶液。分别精密吸取对照品 溶液 2.5、5.0、7.5、10.0、12.5?LL，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标， 盐酸小檗碱进样量（?Lg）为横坐标，经线性回归处理，回归方程为 Y=2299814.229x7561,r=0.9998。结果表明盐酸小檗碱的进样量在 0．的干燥树皮。该药苦253～1.265?Lg 范围内呈良好的 线性关系。 2.5 精密度试验取对照品溶液重复进样 5 次，每次进样 5?LL，测得峰面积积分值，平 均峰面积为 1094362.8，RSD 为 0.98%。 2.6 稳定性实验取生品的供试品溶液一份，分别在 0、1、2、3、6、10、12、24h 分别测得峰面积，平均峰面积为 1059038.5，RSD=1.04%，表明在 24 小时内基本稳定。 2.7 重复性试验取同一批的生品五份，分别精密称定，按上述样品溶液制备方法和色 谱条件测定，平均含量为 0.451%，RSD 为 2.26%。 2.8 加样回收率试验采用加样回收法，取已知含量的生品精密称定，再分别精密加入 盐酸小檗碱对照品适量，按上述样品溶液制备方法和色谱条件测定，计算平均回收率为 99.03％，RSD 为 2.21%（n=5）。 3 影响黄柏盐炙工艺的因素考察 3.1 溶解盐的溶媒（水）用量的考察取 100g 黄柏饮片 6 份，按每 100g 药材加入 2g 盐的比例，分别加入 20ml、30ml、40ml 的水将 2g 盐溶解（每个溶液量各做 2 份）， 用喷壶均匀喷洒在药材表面，并置密闭容器中闷润 90 分钟。结果：当溶媒用量为 20ml 时，药材未能完全润透；用量为 40ml 时，药材未能将水完全吸尽，容器底部仍有剩余液 体；当用量为 30ml 时，药材完全将盐水全部吸尽，且药材润透。故将溶解盐的溶媒 （水）用量定在每 100g 药材用水 30ml 将盐溶解。 3.2 加盐量的考察 3.2.1 盐对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响取黄柏 50g 其中一份不加盐只喷入 15ml 的 水，另一份用同样量的水将药材量 2%的盐溶解，再喷入药材；各做 2 份。闷润 90 分钟后， 取出，摊开自然干燥，测定含量，结果见表 1。表 1 加盐与不加盐的含量比较 3.2.2 加盐量对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响取黄柏 50g，再分别取药材量 1%、2%、3%、4%、5%、6%的盐，均用同样量的水（按每 100g 药材用水 30ml）溶 解，喷入，闷润 90 分钟，取出，摊开自然干燥，测定含量，结果见表 2。表 2 加盐量对含 量的影响 3.3 闷润时间的影响取黄柏 50g，用药材量 2%的盐、30%的水喷入，分别不闷润、 闷润 1h、2h、4h、6h 和 8h，然后在 140℃的温度下炒 5 分钟，晾凉后，粉碎过筛，测 含量，结果见表 3。表 3 闷润时间对含量的影响 3.4 炒制时间和温度的影响 3.4.1 清炒法对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏 50g，分别在 130℃、140℃、150℃、160℃和 170℃分别炒 3、5、7 分钟，结果见表 4。表 4 炒 制温度和时间对含量的影响（清炒法） 3.4.2 水润炒对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏 50g，按药材量 30%的水喷入闷润 90 分钟后，分别在 130℃、140℃、150℃、160℃和 170℃炒 3、5、7 分钟，结果见表 5。表 5 炒制温度和时间对含量的影响（水润炒法） 3.4.3 盐炙法对盐酸小檗碱含量的影响取黄柏 50g，按药材量 2%的盐和 30%的水闷 润 90 分钟，分别在 130℃、140℃、150℃、160℃和 170℃炒 3、5、7 分钟，结果见 表 6。表 6 炒制温度和时间对含量的影响（盐炙法） 4 讨论与结论 4.1 传统中医药理论认为，药物经盐炙后，增强疗效。从实验结果来看，黄柏经盐水 喷润后无论炒与未炒盐酸小檗碱的含量皆较生品有所增加；且随着含盐量的增加，盐酸小 檗碱的含量先随之增加，后又缓慢下降。认为盐的加入不仅使药材组织变得松脆，易于粉 碎，更有利于有效成分的溶出，使盐酸小檗碱的含量增加。 4.2 闷润时间对黄柏中盐酸小檗碱的含量也有影响，但影响不太大。从结果来看，闷 润 2 个小时不但使药材润透，且有效成分的含量也比较高。 4.3 从炒制温度和时间对黄柏中盐酸小檗碱含量的影响结果上看，随着炒制温度的提 高和时间的延长，盐酸小檗碱的含量有下降趋势，温度越高，炒制时间越长，含量越低。 清炒法和水润法相比较，水润法比清炒法中盐酸小檗碱的含量稍高，估计是药材经水闷润 后再炒制，破坏了药材中的粘液质成分，使有效成分易于溶出。在相同的温度和时间下， 盐炙法的含量要明显高于清炒法和水润法，这进一步验证了盐炙法不仅使能引药下行，增 强滋阴降为的作用，更有助于药物的粉碎，使有效成分的易于溶出。 4.4 从以上影响黄柏盐炙因素的考察结果来看，闷润时间、加盐量与炒制温度与时间 对盐酸小檗碱的含量皆有影响。这为下一步确定黄柏盐炙的合理炮制工艺、阐明黄柏炮制 的机理，制定黄柏炮制品的质量标准提供了可靠的依据。 【摘要】介绍几种中药的特殊用法。 【关键词】中药功效（作用）成分汤剂（煎剂） 中药来源广，成分复杂，性能不一，因而在传统的汤剂中就有一些特殊的煎服法：如： 先煎、后下、烊化、包煎、另炖等。多数药物都能得到正确地运用，但仍有一些药未被重 视。现就临床常见宜错的几种中药提出探讨，望同行及广大医务工作者注意。 1 麻黄 麻黄为麻黄科植物草麻黄 EphedrasinicaStafp、中麻黄 EphedraintermediaetC.A.Mey、或木贼麻黄 EphedraequisetinaBge 的草茎[1][2] [3]。是常用的辛温解表药之一，具发汗解表，宜肺平喘、利尿消肿之效。有效成分麻黄碱 和伪麻黄碱存在于茎髓及节中，在水中的溶解度不大，具挥发性[4]。麻黄碱具平喘作用， 伪麻黄碱具利尿之效，发汗解表则为挥发油之能。因此，在汤剂中，平喘、利尿应先煎， 而解表则不需先煎。 2 钩藤 钩藤为茜草科植物钩藤 Uncariarhyunchophylla(Miq)Jacks、大叶钩藤 UncariamacrophyllaWall、毛钩藤 UncariahirsuteHavil、华钩藤 Uncariasinensis(Oliv)Havil。或无柄果钩藤 UncariasessilifructusRoxb 的干燥带钩茎 枝[1][2][3]，是常用的平肝息风药，有清热平肝、息风定惊的作用。有效成份钩藤碱不耐 热，在汤剂中不宜久煎，应后下[2]。钩藤碱对心、肝、肾有一定损害，故心、肝、肾功能 不全者慎用。 3 冰片 冰片为龙脑香 DryobalanopsaromaticaGaertn.f.树脂加工品，或龙脑香树的树干、 树枝切碎，经蒸馏冷却而得的结晶，称“龙脑冰片”，亦称“梅片”。由菊科植物艾纳香 BlumeabalsamiferaDC.的叶升华物经加工而成，称“艾片”。用化学方法合成的称“机制冰 片”。冰片是常用的开窍药之一，具开窍醒神、清热止痛的功用。在水中几乎不溶，临床应 用时，0.15g～0.3g，多入丸散。一定要入汤剂时应冲服，不可煎煮[2]。 4 芒硝 芒硝为含硫酸钠的天然矿物经精制而成的结晶体[1][2][3]。主含含水硫酸钠 （Na2SO4.10H2O）。具泻下攻积，润燥软坚，清热消肿之效，应溶于药汁或开水溶化 后服[2]。 5 芦荟 芦荟为百合科植物库拉索芦荟 AloebarbadensisMiller 及好望角芦荟 A.feroxMiller 的汁液经浓缩的干燥物[1][2][3]；能泻下，清肝，杀虫。其有效成分芦荟苷 （C12H22O9），很难溶于水（芦荟苷是碳苷）[4]，故一般不入汤剂，常入丸散，每次 1g～2g[2]。 6 朱砂 朱砂为硫化矿类辰砂族辰砂，主含硫化汞（HgS）[1][2][3]，功效为清心镇惊，安神 解毒。用量 0.1～0.5g，入丸散，不入煎剂[1][2]。因汞离子易与一些药物成分络合生成 难溶性络合物，长期或大量服用易中毒；故内服不可过量或持续服用，孕妇及肝功能不全 者禁服[2]。 7 琥珀 琥珀为古代松科植物，如枫树、松树的树脂埋藏地下经年久转化而成的化石样物质； 具镇惊安神，活血散瘀，利尿通淋之功。主含二松香醇酸的聚脂化合物，不溶于水。常用 量 1.5g～3g，研末冲服，或入丸散，不入煎剂[2]。 8 血竭 血竭为棕榈科植物麒麟竭 DaemonoropsdracoBL.的果实及树干中渗出的树脂[1][2] [3]，是较常用的活血化瘀药。主含血竭素，血竭红素及其它三萜类成分都不溶于水[2] [4]；内服，多入丸散，研末服，每次 1g～2g[1][2]；不入煎剂，无瘀不用。 9 青黛 青黛为爵床科植物马篮 Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek、蓼科植物蓼蓝 PolyonumtinctoriumAit 或十字花科植物菘篮 IsatisindigoticaFort.的叶或茎叶经加工 制得的干燥粉末或团块[1][2][3]。有清热解毒，凉血消斑，清肝泻火，定惊之效；主含靛 蓝、靛玉红靛棕、靛黄等，难溶于水；一般作散剂冲服，或入丸剂服，内服 1.5g～3g[1] [2]。 10 雷丸 雷丸为白蘑科真菌雷丸的干燥菌核，具杀虫消积之功。有效成分雷丸素是一种蛋白水 解酶，易溶于水，加热即被破坏[1][3]。因此，雷丸不宜入煎剂；入丸散 15～21g；一次 5～7g，饭后调服。在汤剂中宜打碎冲服或吞服[2]。 以上是几种中药的特殊用法在此提出，望同行或广大医务工作者注意。本人认为，在 使用药物时最好遵循药典和药书，特别是一些特殊用法。否则，既浪费药材，又得不到应 用的疗效；既增加患者经济负担，又收不到好的社会效益；严重的还会引起不必要的毒副 反应，危及患者健康和生命安全。 【摘要】目的选择适宜的对照品，建立能够准确测定甘草中总黄酮含量的方法。方法 针对甘草苷、柚皮苷、芦丁 3 种对照品分别使用紫外分光光度法，通过全波长扫描，比较 不同对照品和样品与显色前后的最大吸收波长，从而确定适合的对照品。结果甘草苷对照 品和样品液经过碱处理后最大吸收波长分别为 334，334.5nm 且全波长扫描后得到峰形 基本一致，而柚皮苷对照品经过相同处理后最大吸收波长在 419.5nm，芦丁对照品和样 品分别经过 Al2（NO3）3-NaOH-NaNO2 显色后最大吸收波长在 510nm 和 363nm。 通过对 3 种方法的测定结果进行统计学分析，以甘草苷为对照品的测定结果分别与另外两 种方法差异显著。结论选用甘草苷为对照品应用于紫外分光光度法测定甘草总黄酮成分准 确度较高，是切实可行的含量测定方法。 【关键词】甘草黄酮紫外分光光度法 Abstract:ObjectiveToselecttheappropriatestandardfordeterminationofflavo noidsinGlycyrrhiza.MethodsTocomparethelargestabsorptionwavelengthbywav elengthscanningofultravioletspectrophotometry.ResultsStandardLiquiritinands amplesprocessedbyalkalihadthelargestabsorptionatthe334nmand334.5nmwav elength,andstandardNaringinatthe419.5nmwavelength.ConclusionTodetermin econtentofflavonoidsinglycyrrhizawithultravioletspectrophotometrybystandard Liquiritinisapracticalmethodwithhigheraccuracy. Keywords:Glycyrrhiza;Flavonoids;Ultravioletspectrophotometry 甘草中的黄酮类成分包括黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查尔酮类和双 黄酮类［1］化合物，其中以二氢黄酮类和查尔酮类含量较高［2］。二氢黄酮类包括：甘 草苷(liquiritin)、甘草苷元(liquiritigenin)、新甘草苷(neoliquiritin)、甘草素 （liquiritigenin）等，查尔酮类包括：异甘草苷(isoliquiritin)、异甘草素 （isoliquiritigenin）、异甘草苷元(isoliquiritigenin)、新异甘草苷(neoisoliquiritin)等 ［3～7］。而其中比例较大的成分以甘草苷为主［8］。 甘草总黄酮的测定常用芦丁［9～10］、柚皮苷［11～13］为对照品通过紫外分光光 度法进行测定，而《中国药典》中甘草项下没有规范总黄酮成分含量的测定方法［14］， 导致甘草总黄酮成分有多种不同的测定方法。本实验研究通过对不同测定方法进行考察， 比较不同对照品和样品采用相应方法显色后的最大吸收波长，对 3 种对照品相应测定结果 分析，确定最适宜甘草总黄酮含量测定的对照品和测定方法。