滴通鼻炎水对黏膜纤毛毒性分析论文

【摘要】目的研究滴通鼻炎水对蛙口腔黏膜纤毛运动的影响。方法采用蛙黏膜纤毛运 动实验,用肉眼观察给药后小木屑在蛙上颚黏膜表面移动一定距离所需要的时间;用显微镜 观察生理盐水组和滴通鼻炎水组对离体蛙口腔上颚黏膜纤毛持续摆动时间的影响;蛙口腔上 颚黏膜用生理盐水或滴通鼻炎水浸润 30minmin 后,分离蛙口腔上颚黏膜,用显微镜观察其纤毛 持续摆动时间。结果①在整体动物实验中,滴通鼻炎水常用浓度、高浓度组给药前后对蛙黏 膜纤毛运动均无明显影响(P>0.05);②P>0min.0min5);② 在离体实验中,滴通鼻炎水常用浓度、高浓度组对蛙 黏膜纤毛运动亦无明显影响(P>0.05);②P>0min.0min5);③ 在半在体法实验中,滴通鼻炎水对蛙纤毛运动持续 时间有明显缩短作用(P>0.05);②P<0min.0min5),但作用强度显着弱于阳性对照药去氧胆酸钠。结论滴通鼻 炎水在整体实验和离体实验中对蛙黏膜纤毛的功能无明显影响,但滴通鼻炎水浸润 30minmin 后对黏膜纤毛运动有抑制作用。 【关键词】滴通鼻炎水;纤毛运动;毒性 Abstract:ObjectiveToevaluatetheinfluenceofDitongnasitisdroponfrogpalate mucosaciliamovement.Methods①Recordthetimespanofthesmallchipsmovingon thesurfaceoffrogpalatemucosabyeyes;②Observationofthetimespanoffrogpalat eciliumcontinuingsegmentalmotionindrugsolutionundermicroscope;③Observat ionthetimespanoffrogpalateciliumcontinuingsegmentalmotionaftersufficienteff ectbydrugsolutionundermicroscope.Theabovewereusedasindicatorstoexamine theeffectsofdifferentdrugconcentrationsonfrogpalatemucosaciliamovement.Re sult①Noapparenteffecthasbeenfoundonfrogmucosaciliummovementatthenorm aldosageandhighdosage(P>0.05);②theconcentrationofwhichare0min.395gcrudedrug/ mL&1.58gcrudedrug/ mL)ofDitongnasitisdrophaddividedlyactedonfrogmucosacilia,withthedifference sofnostatisticsignificance(P>0.05);②P>0min.0min5)inanimaltest;②Noobviouseffecthadbeenfoun donfrogmucosacilialmovementatthenormaldosageandhighdosageofDitongnasi tisdroprespectively,withthedifferencesofnostatisticsignificance(P>0.05);②P>0min.0min5)invitro; ③Effecthadbeenobservedonweakeningthecontinuingmovementoffrogmucosaci liainvitro,indicatingthatDitongnasitisdropinhibitscilialmovementwhenactingonf rogmucosaciliaforarelativelylongtime(P>0.05);②P<0min.0min5).Buttheintensityismuchweakerth anpositivecontrolwithdeoxysodiumcholate.ConclusionDitongnasitisdrophadnor emarkableeffectoninjuringthefunctionoffrogmucosacilia. Keywords:Ditongnasitisdrop;cilialmovement;toxicity 滴通鼻炎水由蒲公英、麻黄、黄芩、石菖蒲、苍耳子、辛夷等组成,具有消炎止痛、抗 过敏功能,用于伤风鼻塞、急慢性鼻炎。理想的滴鼻剂或喷雾剂在治疗疾病的同时,不应对 鼻黏膜纤毛运动产生抑制作用。为了评价滴通鼻炎水对鼻黏膜纤毛运动有无影响,本研究采 用蛙黏膜纤毛运动实验,评价该药对鼻黏膜纤毛运动的影响,为临床安全用药提供参考。 1 材料 1.1 药物滴通鼻炎水,批号:M10min0min4,规格:10minmL/瓶,广州白云山制药股份有限公司白云 山外用药厂生产。质量浓度为 0min.395g 生药/mL,作为低剂量组用药。滴通鼻炎水浸膏(P>0.05);②与配 制上述成药同一批提取),按处方投料提取浓缩制成,广州白云山制药股份有限公司白云山外 用药厂生产,质量浓度为 4.266g 生药/g。试验时用生理盐水配成质量浓度为 1.58g 生药/ mL,为成药浓度的 4 倍,作为高剂量组用药。 去氧胆酸钠,Sigma 产品,批号(P>0.05);②lot):61H0min536。试验时,用生理盐水配成 ρ=1%去氧胆 酸钠溶液备用。 1.2 动物蛙 80min 只,体质量 60min~80ming,雌雄兼用,粤监正字 20min0min6C0min81 号。 2 方法与结果 2.1 滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的影响取 30min 只蛙,随机分成 3 组,即滴通鼻炎水低剂 量组、滴通鼻炎水高剂量组、1%去氧胆酸钠组。 将蛙仰位固定于蛙板上,下颌扳开,用线贯穿,拉向下方并固定。并用图钉钉住上颌,使上 颌的黏膜面得以充分暴露,不时用生理盐水少许湿润暴露的黏膜面。 于两眼窝前缘间的黏膜上置放芝麻大小的软木屑一粒。由于黏膜上皮的纤毛运动,将能 看到小木屑逐渐向食道口方向移动。以上下颌角之间作为终点,用秒表记录木屑从起始线移 动到终点线所需时间(P>0.05);②s),连试 3 次,求出其平均值。然后用滴管加供试液 0min.1mL 于上颌的黏 膜面,3min 后再以同法测试木屑从起始线移动到终点线所需时间 3 次,求其平均值,并与加 药前的结果比较,计算相对运动比。如给药后木屑移行所需时间超过 360mins,按 360mins 计。 相对运动比=(P>0.05);②给药前木屑移行所需平均时间/给药后木屑移行所需平均时间)×10min0min% 表 1 滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的影响(P>0.05);②略) Tab.1EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovement 与去氧胆酸钠比较:*P<0.01(FP<0min.0min1(P>0.05);②F 检验);给药前后对照:#P<0.01(tP<0min.0min1(P>0.05);②t 检验) 表 1 说明,滴通鼻炎水低、高剂量对蛙黏膜纤毛运动无明显的影响,给药前后纤毛运动 的差异无显着性。阳性对照药 1%去氧胆酸钠能显着抑制蛙黏膜纤毛运动。 2.2 离体法研究滴通鼻炎水对蛙纤毛运动的影响[1]取 10min 只蛙,同 2.1 法将蛙仰卧固定 在蛙板上,使口腔张开,用手术剪分离上腭黏膜。取约 3mm×3mm 黏膜,生理盐水洗净血块 及杂物,黏膜面向上,平铺于载玻片上。于黏膜表面滴加 0min.2mL 药液,轻轻盖上盖玻片,于 40min 倍光学显微镜下观察黏膜纤毛的运动情况,随后搁置于加有少量蒸馏水的层析缸中,密闭。 使水蒸气近饱和状态。实验室环境温度为 25℃。此后每 5min 取出标本,显微镜观察,如纤 毛继续运动,放回层析缸中,直至纤毛运动停止,记录从给药开始至纤毛运动停止所持续的时 间。结果见表 2。 以上试验中,取自同一蛙上腭的黏膜分成 4 小块,随机分到各试验组中,以减少试验误差。 以给药组的纤毛持续运动时间除以对照组(P>0.05);②给生理盐水)时间得纤毛持续运动时间(P>0.05);②t)的相对 百分率。百分率越接近 10min0min%,表示药物对纤毛运动的影响越小。 表 2 离体法观察滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的影响(P>0.05);②略) Tab.2EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovementinvitrofro gpalatemodel 与生理盐水比较:*P<0.01(FP<0min.0min1(P>0.05);②F 检验);与 1%去氧胆酸钠组比较:#P<0.01(tP<0min.0min1(P>0.05);②F 检验) 表 2 说明,滴通鼻炎水低、高剂量组与生理盐水组差异无显着性,但这两组与去氧胆酸 钠组比较差异均有显着性。提示滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动无明显影响,不像 1%去氧胆 酸钠那样有显着抑制作用。 2.3 半在体法研究滴通鼻炎水对蛙纤毛运动的影响[2,3]取 40min 只蛙,随机分成 4 组,即生 理盐水组、滴通鼻炎水低剂量组、滴通鼻炎水高剂量组、去氧胆酸钠组。同 2.1 法将蛙仰 卧固定在蛙板上,使口腔张开,于上腭黏膜处滴加供试液 0min.5mL 使完全浸没上腭,接触 30minmin 后用生理盐水洗净药物,分离上腭黏膜以供显微镜观察纤毛运动情况。黏膜分离后 立即洗净,平铺于载玻片上,于黏膜表面滴加生理盐水,盖上盖玻片,参照 2.2 法(P>0.05);②离体法)观察 并记录纤毛运动的持续时间及恢复情况。并计算给药组纤毛持续运动的相对百分率。结果 见表 3。 表 3 半在体法观察滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的影响(P>0.05);②略) Tab.3EffectoftheDitongnasitisdroponthenasalmucociliamovementinsitufro gpalatemodel 与生理盐水组比较:*P<0.01(FP<0min.0min1(P>0.05);②F 检验);与 1%去氧胆酸钠组比较:#P<0.01(tP<0min.0min1(P>0.05);②F 检验) 表 3 数据表明:滴通鼻炎水低、高剂量组与生理盐水组比较,纤毛运动持续时间差异有 显着性,且与去氧胆酸组比较差异均有显着性。提示滴通鼻炎水对蛙纤毛运动有明显抑制作 用,但显着弱于 1%去氧胆酸钠。 3 讨论 鼻腔表面衬以黏膜,黏膜表面是一层顶部长有纤毛的假复层柱状上皮,内有分泌黏液的 杯状细胞,所分泌的黏液覆盖在纤毛上。在正常情况下,纤毛协调一致地摆动,清除鼻腔内异 物,具有清除作用。在病理状态下,纤毛运动和黏液分泌受到影响,就很容易感染各种急慢性 呼吸道疾病。正因为如此,近年来,关于滴鼻剂对黏膜纤毛的毒性评价越来越受到关注。对 于滴鼻剂和喷雾剂等鼻腔给药制剂,特别是需要较长时间用药的,应研究其对鼻黏膜组织和 黏膜纤毛的毒性,从而避免对鼻黏膜组织及黏膜纤毛产生毒性作用,妨碍鼻腔的正常生理功 能,增加感染几率。 滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的研究表明:在整体动物实验中,滴通鼻炎水低、高剂量 (P>0.05);②质量浓度分别为 0min.395g 生药/mL 和 1.58g 生药/mL)对蛙黏膜纤毛运动无明显的影响 (P>0.05);②P>0min.0min5),提示无明显纤毛毒性;在离体法研究滴通鼻炎水对蛙纤毛运动的影响实验中,滴通 鼻炎水亦无明显毒性;用半在体法观察滴通鼻炎水对蛙黏膜纤毛运动的影响实验中,滴通鼻 炎水对蛙纤毛运动持续时间有缩短作用,提示滴通鼻炎水较长时间(P>0.05);②30minmin)浸润于蛙黏膜纤 毛后,可能对纤毛运动有抑制作用。在临床用药中,滴鼻或喷雾后,药物难以长时间高浓度浸 润于鼻黏膜上,动物实验与临床实际用药情况不尽相符,不可简单套用于临床,但可供临床用 药参考。 从方法学来看,整体动物黏膜纤毛运动功能试验最为可靠。离体法试验由于黏膜离体后 与实际用药情况不符,可供参考。本文所说的半在体法,在一些文献中称为在体法,本法虽然 在给药期间,黏膜是在体的,但剖取口腔黏膜后,是离体的,因而只能算是半在体法。 【摘要】目的研究 N取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物(P>0.05);②FB8~FB11、FB13)对麻醉大鼠 血流动力学的影响,并分析构效关系。方法麻醉正常血压 SD 大鼠,经右颈总动脉插管至左心 室,右股动脉插管后,分别静脉注射不同目的化合物,BL420min 型生物机能实验系统记录观察 血流动力学效应。结果与给药前相比,FB9 和 FB11 组平均动脉压明显下降 (P>0.05);②P<0min.0min1);FB13 组降低(P>0.05);②P<0min.0min5)的同时,心率、左心室收缩压和左心室压变化速率最大值 显着降低。结论 FB9 和 FB11 具有较强的降压作用,对大鼠心功能无影响;FB13 可使大鼠 血压降低,并可能具有心脏抑制效应。 【关键词】氟哌啶醇;氢化物;血流动力学;构效关系 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofnsubstitutedbenzylofhydrohaloperi dolchloridesonhemodynamicsinratsandanalyzestructureactivityrelationship.MethodsCatheterswereinsertedintotherightfemoralarterya ndtheleftventriclethroughrightcommoncarotidartery.Afterivadministrationofdi fferentcompoundsinanaesthetizedrats,hemodynamicindexeswereanalyzedwith BL420minbiologyengineryexperimentsystem.ResultsComparedwithcorresponding pretreatmentperiods,theMAPatthe1~5minsignificantlydecreasedinFB9andFB1 1group(P>0.05);②P<0min.0min1).FB13grouphastheeffectofdecreasingMAP(P>0.05);②P<0min.0min5),HR,LVSP 和 ±dp/dp/ dtmaxonanesthetizedrats.ConclusionPharmacologicalstudiesinvivosuggestedt hatFB9andFB11significantlydecreasedbloodpressureandhardlyinhibitedthemy ocardialsystolicanddiastolicfunctions,FB13hasahypotensiveeffectandchrontrop iceffectontheheartofrats. Keywords:haloperidol;hydride;hemodynamics;structureactivityrelationshi p 氟哌啶醇(P>0.05);②haloperidol,Hal)为经典丁酰苯类抗精神病药物,石刚刚[1,2]等在基础药理 研究中发现氟哌啶醇具有扩张冠状动脉的活性,此作用与多巴胺受体无关,而可能与钙离子 通道有关。前期研究中,本课题组选择以 N苄基氟哌啶醇氯化物 F7 为先导物(P>0.05);②见图 1),设计 并合成多种不同的 N取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物[3-5]。本文选择从整体水平上考察目 的化合物对 SD 大鼠血流动力学的影响,进一步分析此类化合物在心血管活性方面的构效关 系。 1 材料与方法 1.1 动物 SD 大鼠,体质量 250min~30min0ming,♂,广州第一军医大学实验动物中心提供,动物合 格证号:粤检证字 20min0min3A0min54 号。 1.2 试剂和仪器目的化合物由汕头大学医学院药物研究室提供,结构由中国药科大学分 析测试中心鉴定,实验前用体积分数为 0min.35%的聚乙二醇 40min0min(P>0.05);②PEG40min0min,化学纯,上海化学 试剂公司生产)溶解配成所需浓度;肝素钠注射液(P>0.05);②上海第一生化药业公司上海生物化学制药 厂生产);乌拉坦(P>0.05);②美国 Sigma 公司)。BL420min 型生物机能实验系统(P>0.05);②四川成都泰盟科技有限 公司);YH3 型压力传感器(P>0.05);②北京三友卓越科技有限公司);FA210min4 型电子天平(P>0.05);②上海天平仪 器厂)。 1.3 方法 1.3.1 目的化合物合成以 N苄基氟哌啶醇氯化物 F7 为先导物,利用氢化硼钠还原氟哌 啶醇为氢化氟哌啶醇,再与不同取代氯苄化合物在回流下反应得到 5 个目的化合物 N取代 苄基氢化氟哌啶醇氯化物 FB8~FB11、FB13,其化学结构式如图 1。 图 1N取代苄基氢化氟哌啶醇氯化物 FB8~FB11、FB13 化学结构(P>0.05);②略) Fig.1ChemicalstructuresofthetitlecompoundsFB8~FB11、FB13 1.3.2 血流动力学监测 SD 大鼠称重,质量浓度为 40min0ming/L 乌拉坦 2.5mL/kg 腹腔注射 麻醉,仰卧位固定,肝素化后导管行右股动脉插管监测记录血压(P>0.05);②BP)、经右侧颈总动脉插管 至左心室监测左室压(P>0.05);②LVP),将 BP 和 LVP 信号分别经 YH3 型压力传感器输入 BL420min 信号 记录分析系统,自动测取、显示左室压力和动脉血压微分图及血流动力学各项指标:心率 (P>0.05);②HR)、平均动脉压(P>0.05);②MAP)、左心室收缩压(P>0.05);②LVSP)、左室舒张末期压(P>0.05);②LVEDP)、左心室压变 化速率最大值(P>0.05);②±dp/dp/dtmax)等指标。并同步监测肢体Ⅱ导联心电图。受试动物随机分为导联心电图。受试动物随机分为 3 组,每组 10min 只:① 生理盐水组;② 溶剂组:用体积分数为 0min.35 的 PEG40min0min5mg/kg 代替生理 盐水;③ 实验组:目的化合物分别以 5mg/kg 舌下静脉推注给予,持续观察 60minmin。 1.4 统计学处理实验数据用±dp/s 表示,采用 SPSS12.0min 统计软件进行单因素方差分 析,P<0min.0min5 为差异有显着性。 2 结果 2.1 目的化合物对大鼠 MAP 的影响生理盐水组和溶剂组在静脉推注前后各时间点 MAP 均无显着变化。静注不同目的化合物时,多数化合物在给药即刻降低血压作用最强,以 最低点 MAP 下降的百分比值 ΔMAP(%)MAP(P>0.05);②%)为降压强度,依据进行各个目的化合物降压作用组 间比较。FB9 和 FB11 在给药即刻血压明显下降,分别为 35.74%和 36.49%(P>0.05);②P<0min.0min1),持 续时间短,均在 5min 内基本恢复。FB13 和 FB10min 降压作用较弱,分别为 18.0min8%、12.77%(P>0.05);②P<0min.0min5);FB8 虽能轻微降压,但差异无显着性,见表 1。 2.2 目的化合物对大鼠 HR 的影响生理盐水组、溶剂组、FB9 和 FB11 组内各个时间 点的 HR 均无统计学变化。FB13 组给药后,HR 明显下降且恢复很慢,甚至不能恢复,与给药 前 HR 相比,差异有显着性(P>0.05);②P<0min.0min5),见表 2。 2.3 目的化合物对大鼠 LVSP 和 LVEDP 的影响生理盐水组和溶剂组各时间点 LVSP 和 LVEDP 均无明显统计学差异。而 FB9 在给药即刻明显下降(P>0.05);②P<0min.0min5)、FB11 和 FB13 在 给药即刻及 5min 时与给药前相比,LVSP 下降显着,差异有极显着性(P>0.05);②P<0min01)0min1)。各组 LVEDP 的标准差较大,且实验动物例数较少,与给药前相比,除 FB13 外(P>0.05);②P<0min.0min1),各组 LVEDP 值差异无显着性,见表 3。 2.4 目的化合物对大鼠±dp/dp/dtmax 的影响生理盐水组、溶剂对照组和 FB9 组各时间 点±dp/dp/dtmax 均无显着变化。在所观察的 60minmin 内,与给药前+dp/dtmaxdp/dtmax 相比,FB11 差异无显着性,而dp/dtmax 显着下降(P>0.05);②P<0min.0min5)。FB13 在给药后各时间点±dp/dp/dtmax 均下降明显,差异有显着性(P>0.05);②P<0min.0min5 或 P<0min.0min1),见表 4。 表 1 目的化合物对大鼠 MAP 的影响(P>0.05);②略) Tab.1ChangesofMAPduringthecourseofexperiment 与给药前比较:▲P<0.05,▲▲P<0.01;P<0min.0min5,▲P<0.05,▲▲P<0.01;▲P<0.05,▲▲P<0.01;P<0min.0min1;与生理盐水组比较:△△P<0min.0min1 表 2 目的化合物对大鼠心率 HR 的影响(P>0.05);②略) Tab.2ChangesofHRduringthecourseofexperiment 与给药前比较:▲P<0.05,▲▲P<0.01;P<0min.0min5