呼吸困难患者血浆脑利钠肽论文

【摘要】目的探讨呼吸困难患者的血浆脑利钠肽(BNP)BNP))水平与呼吸困难病因之间的相 关性及临床意义。方法 153 例呼吸困难的患者分为三组:AA 组肺源性呼吸困难组 51 例;BB 组 术后循环血量过多引发呼吸困难组 46 例;BC 组心肌收缩力障碍引发呼吸困难组 56 例,检测 其血浆 BNP) 水平和超声心动图检查左室射血分数(BNP)LVEF),),部分患者行漂浮导管监测血流动 力学。结果 153 例呼吸困难患者的血浆 BNP) 水平和左室射血分数(BNP)LVEF),)分别是:AA 组为 (BNP)178.25±45.43)pg/L、(BNP)0.61±0.07)pg/L;BB 组为(BNP)3545.58±1147.48)pg/L、 (BNP)0.59±0.06)pg/L;BC 组为(BNP)10471.55±3599.23)pg/L、(BNP)0.32±0.11)pg/L。C 组病人的 血浆 BNP) 浓度显着高于 B 及 A 组;B而 B 组与 A 组 EF), 值无明显差别,血浆 BNP) 浓度 A 组较 B 组显着增高。结论 BNP) 的释放直接与心室容量负荷过度和心室收缩力障碍相关,心室收缩 力障碍似乎更能够引起血浆 BNP) 水平升高。 【关键词】心力衰竭;B呼吸困难;B循环血量;B脑利钠肽;B血流动力学 Abstract:AObjectiveTodeterminethecorrelationbetweenthebloodlevelofB natnat riureticpeptide(BNP)BNP))andhemodynamicalterations,andevaluatethediagnosticval ueofBNP)inpatientswithdyspneaduetodifferentcauses.MethodsBNP)levelswereob tainedbyarapidimmunofluorescenceassayin153patientswithdyspnea,whichwer edividedintothreegroups,firstgroupforlungdisease(BNP)51patients),secondforoverlo adofcirculatorybloodvolume(BNP)46patients),andanotherforcardiogenicgroup(BNP)56pa tients).Hemodynamicparametersofallpatientsweredetermined,andleftventricul arenddiastolicdiameters(BNP)LVEDD)weremeasuredwithechocardiogram.ResultsP)ul monarycapillarywedgepressure(BNP)P)CWP),mmHg)was(BNP)8.20±2.60)inthefirstgroup, (BNP)11.50±3.72)inthesecondgroupand(BNP)30.43±7.61)inthelastgroup.Centralvenous pressure(BNP)CVP),mmHg)ofthreegroupswere(BNP)6.50±1.90), (BNP)20.95±4.11)and(BNP)15.27±4.96)respectively.BNP)(BNP)pg/ L)levelswere(BNP)178.25±45.43), (BNP)3545.58±1147.48),and(BNP)10471.55±3599.23)respectively,andleftventriculareje ctionfraction(BNP)LVEF),)were(BNP)0.59±0.06), (BNP)0.61±0.07),and(BNP)0.32±0.11).BNP)level(BNP)918148±453125)pg/ LofthegroupwithLVEDD≥60mmwasmuchhigherthanthatofthegroupwithLVEDD <60mm(BNP)298158±167151)pg/ L,whichwaslowestinpulmonarydiseasesgroupwithanormalleftandrightventricul arenddiastolicdiameter(BNP)3514±2614)pg/ L.TherewasagreatdifferenceofBNP)betweencardiogenicdyspneagroup(BNP)761130± 480147)pg/Landpulmonarydiseasegroup(BNP)3514±2614)pg/ L.ConclusionsBeingakindofcardiacneurohormonesecretedfromcardiacventricle sasaresponsetoventricularvolumeexpansionandpressureoverload,BNP)hadasig nificantincreasedlevelinpatientswithhighP)CWP). Keywords:Aheartfailure;Bdyspnea;Bnatriureticpeptide;Bhemodynamics 脑利钠肽(BNP)BNP))是含 32 个氨基酸的多肽,刺激 BNP) 分泌的条件主要是心室负荷及室壁 张力的改变。本研究对 2005 年 4 月至 2006 年 3 月在本院中心 ICU 住院以呼吸困难为主 诉的 153 例重症患者均经干式快速免疫荧光法定量分析检测 BNP) 和超声心动图检查左室 射血分数(BNP)LVEF),),其中 82 例患者行血流动力学检查,探讨呼吸困难患者的血浆脑利钠肽 (BNP)BNP))的水平及临床意义。 1 资料与方法 1.1 分组① A 组:A肺源性呼吸困难组 51 例,其中男 36 例,女 15 例,平均年龄 (BNP)70.5±8.9)岁。其中慢性阻塞性肺病 12 例、重症肺炎 5 例、重症支气管哮喘 15 例、急 性肺损伤 11 例、ARDS8 例。② B 组:A术后循环血量过多引发呼吸困难组 46 例,其中男 33 例,女 13 例,年龄(BNP)70.8±6.2)岁,排除既往有心脏病史、超声心动图检查左室射血分数 (BNP)LVEF),)<0.49 的患者。③ C 组:A心肌收缩力障碍引发呼吸困难组(BNP)心肌梗死及心肌炎患者), 其中男 31 例,女 25 例,年龄 19~85(BNP)60.8±15.2)岁,其中冠心病急性心肌梗死 48 例,急性 心肌炎 8 例,NYHA 心功能Ⅲ级级 12 例,Ⅳ 级 44 例。心衰诊断参照 F),ramingham 标准。排 除病例:A肝肾功能衰竭、内分泌疾病、气胸、心包填塞、心脏瓣膜疾病、肥厚性心肌病、扩 张性心肌病、肺心病。 1.2 方法以呼吸困难为主诉且呼吸频率>25 次/min,伴辅助呼吸肌参与的患者 153 例 常规问诊、体格检查、心电图、胸部 X 线、超声心动图及同时测定血浆 BNP) 水平。82 例 患者行漂浮导管检查,穿刺锁骨下静脉,插入漂浮导管至肺动脉分支,测定休息时肺毛细血管 嵌压(BNP)P)CWP))和中心静脉压(BNP)CVP))。肺源性呼吸困难组经超声心动图检查无左、右心室增大, 左室射血分数(BNP)LVEF),)>0.49。心衰诊断依据 F),ramingham 标准,综合心脏超声等影像学和 肺毛细血管嵌压(BNP)P)CWP))等实验室检查以及病程中对治疗的反应等作出诊断,心功能分级按 照美国心脏病协会 NYHA 分级方法。BNP) 浓度测定采用美国 Boisite 公司 Triage 干式快 速定量诊断仪,采集静脉全血 2mL 加入 EDTA 抗凝试管,摇匀,取 250μLEDTALEDTA 抗凝全血加 入检测板,采用双抗夹心免疫荧光测试条(BNP)Biosite 公司)对血浆 BNP) 定量测定,15min 即可 测出结果。NYHA 心功能分级、超声心动图检查、漂浮导管检查、BNP) 检测采用盲法。 1.3 统计学处理实验数据以±s 表示,两组均数比较采用 t 检验,多组均数的显着性检验 用单因素方差分析,以 P)<00505 为差异有显着性。 2 结果 三组患者血浆 BNP) 水平、血动学参数与左室射血分数(BNP)LVEF),)的比较见表 1,2。C 组病 人的血浆 BNP) 浓度高于 B 及 A 组(BNP)P)<0.01),B 组也高于 A 组(BNP)P)<0.01)。B 组与 A 组病人 的 EF), 值差别无显着性(BNP)P)>0.05),但 C 组低于 A、B 两组(BNP)P)<00501)。B 组及 C 组病人 P)CWP) 高于 A 组(BNP)P)<00501),C 组高于 B 组(BNP)P)<0.01);BB、C 组病人的 CVP) 明显高于 A 组 (BNP)P)<0.01)。可见,循环血量过多和心肌收缩力障碍引起的心源性呼吸困难 BNP) 水平均明显 增高,心肌收缩力障碍 BNP) 水平增高更明显。 表 1 三组患者血浆 BNP) 水平和左室射血分数(BNP)LVEF),)的变化(BNP)略) Tab.1BNP)levelsandLVEF),%inthreegroups 与 A 组比较:A*P<0.01;P)<0.01;B与 B 组比较:A#P<0.01P)<0.01 表 2 三组漂浮导管检查患者 BNP) 水平、血动学参数和左室射血分数(BNP)LVEF),)的变化(BNP)略) Tab.2BNP)levelsandLVEF),%andHemodynamicinthreegroups 与 A 组比较:A*P<0.01;P)<0.01;B与 B 组比较:A#P<0.01P)<0.01 3 讨论 血浆 BNP) 主要来源于心室肌细胞分泌,是反映心室功能不良更敏感、更特异的指标 [1,2]。BNP) 的释放与心室容积扩张和心室压力超负荷直接相关[1-3]。以 BNP) 浓度 80pg/ mL 为临界值,应用 BNP) 诊断 HF), 的阴性预测值为 98%,阳性预测值为 90%,敏感性为 98%, 特异性为 92%[4]。在房间隔缺损病人中,仅合并肺动脉高压者的 BNP) 浓度升高,且与肺动 脉压力呈正相关,提示右室收缩期负荷过重引起的室壁应力增高导致了 BNP) 的分泌增加。 血压对于 BNP) 的分泌影响不明显,血浆 BNP) 浓度与血压不相关。BNP) 对于心脏充盈压急性 改变有一定的敏感性,在急性心动过速及应用右旋糖酐使心脏充盈压及左房容量扩张会导致 BNP) 升高。急性心肌梗死病人梗死区的 BNP) 浓度明显高于非梗死区,BNP) 水平与左心室室 壁受累范围和临床心功能分级之间存在相关性[5]。在心梗后 2~3d,由于神经体液系统激 活以及心肌细胞缺血坏死、室壁受到牵拉,BNP) 会一过性增高;B在此之后持续增高提示心梗 后发生左室功能不全,若持续升高达 90d 则提示发生左室重塑[6]。本研究结果显示,血浆 BNP) 水平与心室收缩功能、容量负荷和肺毛细血管楔压(BNP)P)CWP))密切关联,心肌收缩功能越 差(BNP)EF), 值越低/P)CWP) 越高),血浆 BNP) 水平升高越明显(BNP)P)<0.01)。EF), 值差别无显着性 (BNP)P)>0.05)时,容量负担越重(BNP)中心静脉压 CVP) 越高),BNP) 水平升高越明显(BNP)P)<0.01),与有关 文献报道相符[1,5,6]。本研究表明,心衰患者组与左心室射血分数正常的肺源性呼吸困难 组比较,心衰患者 BNP) 浓度也显着升高(BNP)P)<0.01),说明 BNP) 的释放与左心室收缩功能下降 有关,随着左心室射血分数的下降,BNP) 水平也随之增高;B心室收缩功能对 BNP) 水平的影响 明显高于心室容量负担过重对 BNP) 水平的影响(BNP)P)<0.01);B三组不同病因导致呼吸困难患者 血浆 BNP) 水平存在明显差异(BNP)P)<0.01),血浆 BNP) 水平正常(BNP)BNP)<250pg/L)提示肺源性呼 吸困难可能性大,血浆 BNP) 水平轻到中度升高(BNP)1000pg/L 【摘要】目的测定广东土牛膝中腺苷的含量。方法采用反相高效液相色谱法,色谱 柱:ADiamonsilTMC18 柱,流动相:A甲醇磷酸盐缓冲溶液nat磷酸盐缓冲溶液(BNP)体积比 12∶88),流速:A1.0mL·min1,检测波长 260nm,柱温 30℃。结果腺苷的平均回收率为 99.5%,RSD 值为 1.69%;B方法 精密度试验 RSD 值为 1.15%(BNP)n=6)。结论该法可用于广东土牛膝中腺苷的含量测定。 【关键词】广东土牛膝;B腺苷;BHP)LC;B含量测定 Abstract:AObjectiveTodeterminethecontentofadenosineinRadixEupalorriChi nenseLinnbyRP)HPLC.MethodsSampleswereanalyzedonaDiamonsilTMC18coluHP)LC.MethodsSampleswereanalyzedonaDiamonsilTMC18colu mn(BNP)250mm×4.6mm,5μLEDTAm)usingCH3OHnatNaH2P)O4·Na2HP)O4(BNP)12∶88)asmobileph ase.Theflowratewas1.0mL·min1andthedetectionwavelength260nm.ResultsThemethodexhibitedgoodlinearityf rom0.0396to0.6336μLEDTAg.Theaveragerecoveryforadenosinewas99.5%andRSD1.6 9% (BNP)n=6).ConclusionThemethodcouldbeusedtodetermineadenosinecontentinRadi xEupalorriChinenseLinn. Keywords:ARadixEupalorrichinenseLinn;Badenosine;BRP)HPLC.MethodsSampleswereanalyzedonaDiamonsilTMC18coluHP)LC 广东土牛膝(BNP)RadixEupalorriChinenseLinn)为菊科植物华泽兰的干燥根及根茎,广东 土牛膝资源丰富,分布较广,在民间沿用历史悠久,具有清热解毒、凉血利咽、抗炎镇痛的功 效[1,2],临床上常用于治疗各种咽喉炎、扁桃腺炎等。为评价广东土牛膝的内在质量,本文 以腺苷为指标成分[3],建立了广东土牛膝中腺苷含量测定的高效液相色谱法,该法具有分离 效果好,简便、准确等优点,可用于该药材的初步质量控制。 1 仪器和试药 1.1 仪器 日本岛津高效液相色谱仪(BNP)LCnat10ATvp 溶剂输送泵,SP)Dnat10Avp 紫外可见检测nat可见检测 器,CTOnat10Asp 柱温箱),HWnat2000 色谱工作站(BNP)南京千谱软件公司)。 1.2 药材来源及处理 土牛膝样品(BNP)批号 20051102,东莞国药集团中药饮片有限公司,产地广东;B批号 20060109,东莞国药集团中药饮片有限公司,产地广东;B批号 0500201,佛山康泰和医药有 限公司中药饮片加工厂,产地广东),由广东药学院生药学教研室刘基柱副教授鉴定为菊科泽 兰属植物华泽兰(BNP)EupalorrichinenseLinn)的根及根茎。将其粉碎,于 60℃下干燥 4h,置 干燥器内备用。 1.3 药品与试剂 腺苷对照品(BNP)中国药品生物制品检定所提供,批号 879-200202,供含量测定用);B甲醇磷酸盐缓冲溶液为 色谱纯,水为双蒸水,磷酸二氢钠和磷酸氢二钠均为分析纯。 2 实验部分 2.1 溶液的制备 2.1.1 供试品溶液 取本品粉末(BNP)过 3 号筛)约 1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 50%(BNP)体积分数)的甲 醇磷酸盐缓冲溶液 20mL,称定重量,超声处理 45min,放冷,再称定重量,用 50%(BNP)体积分数)甲醇磷酸盐缓冲溶液补足减失重 量,摇匀,滤过,取续滤液即得。 2.1.2 对照品溶液 精密称取腺苷对照品 9.90mg,置 50mL 量瓶中,加 50%(BNP)体积分数)的甲醇磷酸盐缓冲溶液适量,振摇使 溶解,再加 50%(BNP)体积分数)的甲醇磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度,摇匀,得浓度为 198μLEDTAg·mL-1 的腺苷对照品 贮备液。 2.2 色谱条件及系统用性试验 色谱柱:ADiamonsilTM(BNP)钻石)C18 柱(BNP)250mm×4.6mm,5μLEDTAm,迪马公司);B流动相:A甲醇磷酸盐缓冲溶液 nat磷酸盐缓冲溶液[取 0.01mol·L-1 磷酸二氢钠 68.5mL 与 0.01mol·L-1 磷酸氢二纳 31.5mL 混合(BNP)pH=6.5)](BNP)体积比 12∶88);B流速:A1.0mL·min-1,检测波长:A260nm;B柱 温:A30℃。分别取对照品溶液(BNP)腺苷浓度为 7.92μLEDTAg·mL-1),供试品溶液 20μLEDTAL 注入色谱仪, 按上述色谱条件,记录色谱图(BNP)图 1,2)。腺苷和样品中相邻色谱峰的分离度大于 1.5;B理论塔 板数以腺苷峰计算不低于 3000;B保留时间约为 17.40min。 图 1 腺苷对照品 HP)LC 图略 图 2 广东土牛膝药材样品 HP)LC 图略 2.3 方法学考察 2.3.1 线性与范围 分别精密吸取一定量的对照品贮备液用 50%(BNP)体积分数)的甲醇磷酸盐缓冲溶液稀释成浓度为 1.98、3.96、7.92、15.84、23.76、31.68μLEDTAg·mL-1 的对照品溶液,分别取 20μLEDTAL 进样 测定,以峰面积(BNP)A)对对照品质量浓度(BNP)ρ))进行回归,得回归方程 A=32416.91ρ)+1071.34,r=0.9999,试验表明腺苷在 0.0396~0.6336μLEDTAg 之间与峰面 积线性关系良好。 2.3.2 精密度试验 取质量浓度为 7.92μLEDTAg·mL-1 的腺苷对照品溶液 20μLEDTAL,连续测定 5 次,记录峰面积并计 算,结果腺苷峰面积的平均值为 256682,RSD 为 0.72%,表明仪器精密度良好。 2.3.3 稳定性试验 取土牛膝供试品溶液(BNP)批号 20051102),在 0、2、4、8、12h 分别进样 20μLEDTAL,记录峰 面积,结果腺苷峰面积的平均值为 229720,RSD 为 1.69%,表明供试品溶液在 12h 内稳定。 2.3.4 重复性试验 取同一批号(BNP)批号 20051102)样品 6 份,按“2.1.1”项下方法制备溶液,分别进样测定,结 果腺苷平均含量为 0.1406mg·g-1,RSD 为 1.15%,表明分析方法精密度良好。 2.3.5 加样回收试验 精密称取已知含量(BNP)批号 20051102)土牛膝样品约 0.5g,共 9 份,分别用刻度吸量管精 密加入浓度为 198μLEDTAg·mL-1 的腺苷对照品溶液 0.23、0.23、0.23、0.36、0.36、0.36、0.50、0.50、0.50mL,按“2.1.1”项下方法制 备供试品溶液,在上述色谱条件下进样 20μLEDTAL 进行分析,结果见表 1。 表 1 腺苷回收率试验结果略 2.4 样品测定 取土牛膝样品 3 批,按“2.1.1”项下方法制备供试品溶液,分别取 7.92μLEDTAg·mL-1 的对照 品溶液与供试品溶液各 20μLEDTAL,注入液相色谱仪,测定,计算腺苷的含量,结果见表 2。 表 2 样品的测定结果(BNP)略) 3 讨论 3.1 提取溶剂的选择分别用不同体积分数(BNP)30%、50%、70%、90%)甲醇磷酸盐缓冲溶液混合液进行 试验,结果腺苷的含量分别为 0.1398、0.1408、0.1383、0.1267μLEDTAg·mL-1,表明用体积 分数为 50%的甲醇磷酸盐缓冲溶液溶剂提取比较完全。 3.2 腺苷提取方法选择文献[4-7]主要用超声处理和加热回流方法,本文考察了以 50% (BNP)体积分数)甲醇磷酸盐缓冲溶液为提取溶剂,样品分别超声处理和回流处理,结果腺苷的含量分别为 0.1408、0.1385μLEDTAg·mL-1,并且超声处理 45min 与 60min 的结果一致,因此选择 45min 作为提取时间。 3.3 检测波长的选择取腺苷对照品溶液,用 50%(BNP)体积分数)甲醇磷酸盐缓冲溶液溶液做参比,置紫外可见检测可 见分光光度计仪器中,在 210~400nm 波长扫描,结果腺苷对照品溶液在 260nm 处有最大 吸收波长,故选择 260nm 作为检测波长。