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冠心病患者血浆含量测定论文

2020-03-13 17:40
【摘要】目的:测定冠心病患者与健康对照者血浆中 MBL 含量,分析其变化情况,从固有 免疫的角度探讨冠心病的可能致病机制。方法:采集 100 例冠心病(CHD)CHD))患者空腹静脉血, 健康对照者 60 例,采用 ELISA 法对血浆中 MBL 含量进行检测。结果:100 例冠心病人血浆 MBL 含量的平均值为 3900μg/L,g/L,标准差为 3209;60 例健康对照组血浆 MBL 含量的平均 值为 2056μg/L,g/L,标准差为 1824。冠心病组血浆 MBL 含量高于健康对照组,经 t 检 验,t=4071,P<001,差别有统计学意义。结论:冠心病组血浆 MBL 水平高于健康对照组,二 者均值比较差别有统计学意义,血浆 MBL 参与了冠心病的发生、发展过程。 【关键词】冠心病;MBL;ELISA;含量 【ABSTRACT】Objective:ThemainpurposeofthisstudyistomeasuretheMBLle velinplasmawithcoronaryheartdiseaseandtrytoanalyzethepossiblemechanismo fCHD)sdevelopmentfromtheviewofinnateimmune.Methods:100bloodsamplesof CHD)patientsand60thatofhealthcontrolswerecollectedandtestedbyELISA.Result s:TheplasmalevelofMBLwere3900μg/L,g/L,SD)3209incases,while2056μg/L,g/ L,SD)1824incontrols.TheplasmalevelofMBLincasesishigherthanthatofcontrols(CHD)t =4071,P<001).Conclusion:TheplasmalevelofMBLishigherinCHD)patientsthanth atincontrols. 【KEYWORD)S】CHD);MBL;ELISA;Plasmalevel 冠心病(CHD)coronaryheartdisease,CHD))是一种严重危害人类健康的疾病,其发病率和死 亡率居首位,尤其在发达国家更为严重,而在我国也呈逐年上升趋势[1]。其病因和发病机制 尚未完全阐明,近年来,冠心病发病的炎症学说越来越得到重视[2],对一些炎性因子和急性期 蛋白的研究也越来越深入。甘露聚糖结合凝集素(CHD)mannanbindinglectin,MBL)是一种兼 有调理素和直接激活补体功能的免疫分子,参与构成抗感染的第一道防线[3]。国外有些学 者报道 MBL 与动脉粥样硬化发生、发展有关[4~7],但国内尚无报道,因此本研究主要测定 冠心病患者血浆中 MBL 含量,并对其变化进行分析,从天然免疫的角度探讨冠心病的可能致 病机制,为其辅助诊断和治疗提供资料。 1 材料与方法 11 实验材料 主要设备:低温冰柜(CHD)thermo,美国);酶标仪(CHD)Starfax2100,美国);普通高速离心机 (CHD)TGL168,上海) 主要试剂:MBLELISA 试剂盒(CHD)北京现代高达生物技术有限责任公司) 12 实验方法 121 标本的收集:空腹静脉血标本用 ED)TAK2 抗凝管(CHD)2ml)收集。 冠心病(CHD)CHD))组:共 100 例,为河北北方学院附属第一医院 20049~200510 月住院的 冠心病患者,男 51 例,女 49 例;年龄 45~70 岁,平均(CHD)6041±9443)岁。病例均经心电图、 心肌酶谱和临床症状等综合诊断,符合 WHO 冠心病诊断标准。 健康对照组:60 例,为来院进行健康体检者,男性 32 例,女 28 例,年龄 43~71 岁,平均 (CHD)6027±7198)岁,病例无冠心病症状、体征,超声心动图及心电图均正常。冠心病组与健康 对照组组间年龄无统计学差异。 122 标本的处理 取 1ml 全血放入 15ml 离心管中,5000 转/min 离心 5min,分离血浆,-86℃保存,供测 定血浆 MBL 含量。 123 血浆中 MBL 含量测定 按 MBLELISA 试剂盒说明书,基本操作如下: 标本及试剂准备:冠心病、健康对照血浆标本从低温冰柜(CHD)-86℃)中取出,溶解并恢复至 室温,离心(CHD)3500 转/min5min)。取上清 2μg/L,l,用标本稀释液对标本进行 200 倍稀释(CHD)加入 398μg/L,l 标本稀释液[PBS+005%BSA]),混匀。所有实验用试剂均在室温平衡后使用。 操作步骤: ① 取 100μg/L,l 稀释标本加入酶标板中,同时做对照,第一孔加 100μg/L,l 稀释液作空白,第二孔 向后依次加含 MBL 不同浓度(CHD)0,1,2,5,10,25,50,100ng/ml)的标准液各 100μg/L,l,标准孔均 作复空; ② 置 37℃水浴 1h; ③ 将板中的液体弃去,每孔加入 150μg/L,l 洗板液进行清洗,室温静置 3min,弃去洗板液,反 复 3 遍; ④ 清洗后,每孔加入 100μg/L,l 酶标记的 MBL 抗体,37℃1h,使酶标抗体与标本充分结合。 ⑤ 清洗,操作同③; ⑥ 清洗后,每孔加入底物 A、B 各 50μg/L,l,室温避光 15min。每孔加入终止液 50μg/L,l,轻轻 混匀 20s; ⑦ 用酶标仪比色测定波长为 450nm,参考波长为 620nm。在 20min 内完成。 2 结果 用 SPSS130 软件进行统计分析,冠心病组、健康对照组血浆 MBL 含量的比较,采用两 样本均数比较的 t 检验。 100 例冠心病人血浆 MBL 含量的平均值为 3900μg/L,g/L,标准差为 3209;60 例健康对照 组血浆 MBL 含量的平均值为 2056μg/L,g/L,标准差为 1824。冠心病组血浆 MBL 含量高于健 康对照组,经 t 检验,t=4071,P<001,差别有统计学意义,见表 1。表 1 冠心病组与对照组 MBL 含量水平比较 3 讨论 人类血清 MBL 浓度主要受结构基因外显子 1 密码子点突变的影响和启动子区多态性的 调控[8~11]。国外已有一些 MBL 基因与冠心病的相关性研究[4~6],但对血浆 MBL 浓度 与冠心病的相关性研究很少,只有冰岛的一份前瞻性研究报告[7]:高浓度的血浆 MBL 者,尤 其是糖尿病病人、高血脂、血沉升高人群患心肌梗死的概率较低,提示 MBL 可能与清除动 脉粥样硬化因素有关。雷克雅未克 Landspitali 大学的瓦尔迪马森(CHD)HelgiValdimarsson) 和同事分析了当地的研究资料,共纳入了 1967 年以后的近 2 万参试者。在对其中 987 名 70 岁参试者的横断面研究中,作者发现,MBL 水平高(CHD)>1000mg/L)与水平低相比,心肌梗塞 风险下降 36%(CHD)P<0001)。为证实此结论,研究者对另一个有 1309 名中年人的人群进行了 前瞻性分析。结果发现 MBL 水平高和心肌梗塞风险减弱有关联的迹象,但不如前一横断面 分析中的那样强烈,对总人群、吸烟者或高血压病人也没达到统计学意义。但这次分析证实, 高水平 MBL 对糖尿病人(CHD)P=002)或高胆固醇血症病人(CHD)P=0004)与心肌梗塞风险大为减小 有关。鉴于上述在糖尿病人中的结论“测量 MBL 可用于心性风险的辅助评估,也可能帮助评 估预防治疗的需要”,本研究发现,100 例冠心病人血浆 MBL 含量的平均值为 3900μg/L,g/L;60 例健康对照组血浆 MBL 含量的平均值为 2056μg/L,g/L。经 t 检验,t=4071,P<001,二者均值 比较差别有统计学意义,说明血浆 MBL 可能参与冠心病的发生、发展,但具体作用及机制还 有待进一步研究。 【摘要】目的:进一步探讨引起血清碱性磷酸酶活力降低的原因。方法:2001~2005 年采用 AMP―buffer 方法进行了碱性磷酸酶活性测定共 2568 例。其中 126 例低于正 常,88 例为患者,83 例为男性。结果:重症肾病并伴有肾衰患者占 365%,营养不良患者占 18%,镁缺乏患者占 88%,甲状腺机能减退患者占 48%,严重贫血患者占 3%,其余 24 例(CHD)占 299%)没有与血清 ALP 活力降低有明显关系的症状。结论:血清 ALP 活性降低主要见于重 症慢性肾炎并伴有肾衰、营养不良和甲状腺功能不全、镁缺乏、严重贫血等。血清 ALP 活 性增高或降低均有重要意义。 【关键词】碱性磷酸酶,肝硬化,甲状腺机能减退 碱性磷酸酶(CHD)Alkalinephosphatase,ALP)又称正磷酸单酯磷酸水解酶,由成骨细胞产 生,以骨胳与牙齿、肾脏和肝脏中含量较多。临床上通常着重于 ALP 活力增高的疾病研究, 很少注意患者临床疾病与 ALP 活力降低的关系。因此,我们着手研究了 ALP 活力降低的临 床意义。 1 材料与方法 11 仪器:日立 7600 全自动生化分析仪。 12 试剂:由上海申能―德赛诊断技术有限公司提供。 (CHD)1)试剂Ⅰ:16mmol/L 对硝基苯磷酸二钠。(CHD)2)试剂Ⅱ:2―氨基―2―甲基―1―丙醇 缓冲液,浓度 09mmol/L;pH102;MgCl2 浓度 10mmol/L。 13 测定方法及反应原理:采用国际临床化学联合会(CHD)IFCC)推荐的 AMP―buffer 方法。 测定 ALP 的酶促反应如下:对―硝基苯磷酸盐+H2OALP 对硝基苯酚+磷酸盐。对硝基苯磷 酸盐是无色的,而对硝基苯酚在 405nm 波长有最大吸收,对硝基苯酚形成的速率与血清中 ALP 活性成正比,测定 405nm 波长下吸光度增加的速率,即可测出 ALP 的活性。 14 血清样本与疾病分类:样本为血清或肝素抗凝血浆,避免溶血,置 4℃冰箱,10h 内测 其 ALP 活性。检查每一例 ALP 活性低下的患者病例,并记录下列临床指标:年龄、性别、临 床诊断、肾病史和血清镁含量、用药及输血史。将患者分为症状与 ALP 活性低下有关(CHD)占 79%)和无关(CHD)占 29%)两组,我们着重研究成年男性 ALP 活性低下与临床症状有关患者。 2 结果 测定 2568 例本院住院患者血清 ALP,其频率分布如图所示,呈正偏态高斯分布。ALP 活性低下(CHD)<30U/L)的频率为 48%,共 126 例,其中患者 88 例,男性 83 例,占 964%;5 例为 女性,其中 29 例(CHD)占 365%)为重症肾炎并伴有肾衰患者。这些患者病前检查 ALP 活性平均 值为 71U/L(CHD)分布范围 30~100U/L)。患病后肾衰患者 ALP 活性平均值下降为 20U/L(CHD)分布 范围 8~29U/L),平均值降低 718%。在调查中,有 15 例患者伴低蛋白质血症,其 ALP 活性 平均值为 18U/L,同时血清镁浓度有不同程度偏低。把上述与 ALP 活性降低有关的患者(CHD)共 59 例),分为五个临床类型:即肾衰、营养不良、血清镁缺乏、甲状腺功能不全和严重贫血。 每种类型占总数(CHD)n=59)的百分比分别为:50%、25%、12%、8%、5%。如表所示。83 例 ALP 降低患者中除 59 例症状与 ALP 活性降低有关外,其余 24 例患者无与 ALP 活性低下 有关的疾病。表 159 例临床症状与 ALP 活性降低有明显关系的患者情况 3 讨论 通过试验我们发现 ALP 活性低下的患者占所有受试者的 48%。ALP 活性降低的主要 原因是重症肾炎并伴有不同程度肾衰。患者肾实质受损,致肾脏对 ALP 的分泌减少,使血清 ALP 活性降低,其均值下降 718%。肾衰患者 ALP 活性与血清镁浓度多同时降低,血清镁浓 度降低 542%。镁离子是 ALP 的稳定剂和激活剂。镁离子缺乏使 ALP 在生产过程中不能被 激活,从而活性下降。ALP 活性降低的确切原因尚有待进一步探讨。甲状腺功能不全与 ALP 低下也有明显关系,但服用甲状腺素后 ALP 活性可以恢复正常。在本次试验中甲状腺功能 不全的两例患者经过甲状腺素治疗后 ALP 活性已恢复正常。甲状腺功能不全患者 ALP 活性 低下与其血清镁和锌浓度有关,血清镁和锌浓度恢复正常后,其 ALP 活性也多恢复至正常。 相比之下,严重的贫血患者与 ALP 活性低下没有明显关系,在实验中我们发现只有 1/10 贫血 患者 ALP 活力低于正常。本次试验未统计妇女和儿童,他们的血清 ALP 活性低下可能有其 它诊断价值。儿童 ALP 活性降低会影响骨骼发育,甚至骨骼发育停止,成为临床上的呆小症、 软骨发育不全及恶质病;妇女中以老年妇女 ALP 活性降低者为多见,可能与老年妇女绝经后 雌激素分泌减少,影响骨质的再吸收,骨质疏松使血清 ALP 活性低下有关。综上所述,血清 ALP 活性降低主要见于重症慢性肾炎并伴有肾衰、营养不良和甲状腺功能不全、镁缺乏、 严重贫血等。血清 ALP 活性增高或降低均有重要意义。 【摘要】目的:研究治疗外阴上皮内非瘤样病变的新方法。方法:将 93 例该病患者随机 分为实验组和对照组,实验组病人 68 例采用自制中药方剂愈白汤水煎坐浴,每日三次,每次 30min,三个月为一疗程。对照组 25 例采用肤轻松软膏及丙酸睾丸素外涂。结果:实验组病 人 68 例,治愈 52 例,治愈率 7647%;有效 10 例,有效率 1471%;总有效率 9118%。对照 组病人 25 例,治愈 1 例,治愈率 4%;有效 10 例,有效率 40%;总有效率 44%。结论:愈白汤 治疗外阴上皮内非瘤样病变效果显着,且无毒副作用,可推广使用。 【关键词】外阴上皮内非瘤样病变;愈白汤 【ABSTRACT】Objective:Toinvestigatethenewtherapyfornonneoplasticepit helialdisordersofskinandmncosa.Methods:25patientsinthecontrolgroupwereap pliedtoointmentwithfluocinoloniacetonidumandoinmentwithtestosteronepropio nate,and68patientsintheresearchgrouptookhipbathwithChinesetraditionalmedi cineYubaiTangtocleanthegenitalorgans,threetimeseveryday,30minuteseveryti me,andthreemonthsweretakenasaperiodoftreatment.Results:Intheresearchgro up,therewere52patientswhohadbeencured,thecuredratiowas7647%,10patient shadeffect,theeffectratiowas1471%,andsothetotaleffectratiowas9118%.Inthec ontrolgroup,therewas1patientwhohadbeencured(CHD)curedratio4%),10patientshad effect(CHD)effectratio40%),thetotaleffectratiowas44%.Soitisremarkablysignificantto comparethecurativeeffectsforthetwogroups(CHD)P<001).Conclusion:TraditionalChi nesemedicineYubaiTanghasobvioustherapeuticeffectonnonneoplasticepithelial disordersofskinandmncosawithoutpoisonousandilleffect,andsothiskindofnewth erapycanbegeneralized. 【KEYWORD)S】Nonneoplasticepithelialdisordersofskinandmncosa;YubaiTa ng 外阴上皮内非瘤样病变是女性外阴皮肤和粘膜组织发生变性及色素改变的一组慢性疾 病。因病变部位皮肤和粘膜多呈白色,故又称其为外阴白色病变。本病病程较长,复发率高, 目前无特效治疗方法。为研究治疗此病的新方法,我们将 20031~200512 月于河北省怀 来县医院门诊就诊的患此病病人 93 例,随机分对照组和实验组进行观察治疗;对照组 25 例 采用肤轻松软膏及丙酸睾丸素外涂;实验组 68 例病人给予中药愈白汤治疗,结果报道如下 [1,2]。 1 资料与方法 11 一般资料河北省怀来县医院 20031~200512 月门诊经病理检查确诊为本病的 93 例病人,随机分为两组。实验组 68 例,采用中药愈白汤坐浴治疗;对照组 25 例,局部外用肤 轻松及丙酸睾丸素软膏。93 例病人中,硬化性苔癣 50 例,鳞状上皮细胞增生 43 例,两组病 人年龄、病程、病理分型上均无显着性差异(CHD)P<005)。 12 方法中药愈白汤由以下中药组成:黄芪 60g、淫羊藿 30g、丹参 20g、野百合 20g、山慈姑 10g、苍术 20g、生地 20g、白花蛇舌草 30g、赤勺 20g、白术 20g、黄 柏 20g、地肤子 20g、土茯苓 30g。以上药物布包水煎,熏洗坐浴,每日 2~3 次,每次 30min,3 个月为一疗程。对照组外阴涂擦肤轻松软膏及丙酸睾丸素软膏,每日一次,30d 为 一疗程。 13 疗效判定标准痊愈:症状消失,外阴皮肤粘膜颜色、弹性基本恢复正常,病理检查为 “正常皮肤和粘膜”。有效:症状消失,原白色病变区域缩小、变红,或部分转为褐色。无效:症 状无缓解,病变区皮肤面积未缩小或反而增大[3,4]。 【关键词】苦参 苦参(CHD)SophoraflavescensAit)为豆科槐属植物,是我国历史悠久的传统药物之一,其性 味苦寒,归心、肝、肾、大肠、膀胱经,具有清热燥湿,祛风杀虫,利尿的功能。用于热痢、便 血、黄疸、尿闭、赤白带下、阴痒、湿疹、湿疮、皮肤搔痒、疥疮麻风、外治滴虫性阴道 炎。其主要成分为苦参碱 matrine,氧化苦参碱 oxymatrine 等多种生物碱类成分,苦参醇 kurarinol、苦参丁醇 kuraridinol 等多种黄酮类成分,另含氨基酸类,挥发油类,糖类,有机酸 类,内酯类成分等[1]。近几年,对苦参化学成分和生物活性的研究不断深入,现将国内外对苦 参药理活性的研究现状综述如下。 1 抗肿瘤活性 肿瘤的发生和发展不仅是肿瘤细胞增殖和分化异常所致,而且还是肿瘤细胞异常凋亡的 结果。因此,抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞分化和凋亡,对临床治疗肿瘤有一定的指导意 义。近几年的研究表明,苦参对恶性葡萄胎、绒癌、子宫癌、埃氏腹水瘤和淋巴内癌细胞都
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