木瓜籽镇咳祛痰研究论文

一、实验材料 1.动物。清洁级昆明种小鼠,体重(22.0±2.0)g,g,雌雄兼用,由吉林大学动物实验中心提供。 2.木瓜籽提取液的制备。宣木瓜购自湖北宣城水果批发市场,经吉林大学药学院张静敏 教授鉴定为宣木瓜。去果肉,取木瓜籽 1kg,用 75%的乙醇加热回流提取 3 次,每次 2 小时,过 滤,合并滤液,除去乙醇以后制成 1L 的溶液(简称原液)g,,取原液 100ml,稀释成 500ml(简称稀释 液)g,。 3.仪器和试剂。盐酸依普拉酮片,上海衡山制药有限公司,批号:070510;氨水,分析纯,国 药集团化学试剂有限公司,批号,070102;氯化铵,分析纯,国药集团化学试剂有限公司,批 号,060520;722 型光栅分光光度计,山东高密彩虹分析仪器有限公司;梅特勒 AB135-S 十万 分之一天平,德国;HH-42 快速恒温数显水箱,常州国华电器有限公司;其它试剂购于北京化工。 4.统计学处理。应用 SPSS13.0 统计分析软件进行处理,实验数据以均数±标准差(x±s))g, 表示,实验结果进行多变量方差分析及 T 检验。 二、方法 1.镇咳作用研究。为研究木瓜籽提取物对小鼠镇咳作用的影响,选取昆明种小鼠雌雄各 20 只,随机分成 4 组,每组 10 只。用药组分别灌胃原液和稀释液 20ml/kg,对照组灌胃等量生 理盐水,阳性组直接用盐酸依普拉酮(20mg/kg)g,灌胃给药。连续给药 3d,末次给药 1h 后,将每 只小鼠分别置于引咳笼中,使小鼠接受饱和氨水的喷雾刺激 5s),从喷雾氨水开始计时,以腹肌 收缩,张嘴为准,观察和记录小鼠的刺激潜伏期及 2min 内咳嗽次数。 2.祛痰作用研究。为研究木瓜籽提取物的祛痰作用,采用酚红气管排泌法。 (1)g,酚红标准曲线的绘制。用天平精确城区酚红 0.100g,加 5%NaHCO3 溶液至 1000ml 容量瓶中。分别吸取此酚红溶液 0.25,0.5,0.75,1.00,1.25,1.50,1.75,2.00ml 于容量瓶中,加 水稀释至满刻度,用 722 分光光度计于 546nm 波长下测其吸光度,得回归方程 x=0.2257+5.3268y,r=0.9990,并绘制标准曲线。 (2)g,选取昆明种小鼠雌雄各 20 只,随机分成 4 组,每组 10 只。用药组分别灌胃原液和稀 释液 20ml/kg,对照组灌胃等量生理盐水,阳性组氯化铵组(2.0g/kg)g,灌胃给药。每只小鼠灌胃 给药 30min 后,腹腔注射 5%酚红生理盐水溶液 10ml/kg,30min 后脱臼处死,剥离气管周围组 织,剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管,放入盛有 1ml 蒸馏水的试管中,再加入 1mol/ LNaOH 溶液 0.1ml,以 1ml 蒸馏水/0.1mlNaOH 溶液为空白,546nm 处测量溶液的吸光度 (A)g,。 三、结果 1.镇咳作用 结果见表 1。原液组、稀释组能显著抑制氨水诱发小鼠的咳嗽潜伏期和咳嗽次数,显示 其具有镇咳作用,且呈现量效关系。 2.祛痰实验 结果见表 2。由表 2 可见,原液组及稀释液组的木瓜籽的乙醇提取物均能增加小鼠气管 的酚红排泌量,呈现量效关系,原液组效果优于氯化铵阳性对照组,提示木瓜籽具有祛痰作用。 四、讨论 采用抑制氨水诱咳的方法,研究了木瓜籽乙醇提取物的镇咳作用。本实验首次发现了木 瓜籽乙醇提取物的镇咳作用,这可能与提取物中的酚苷类成分有关;采用酚红气管排泌法研究 了木瓜籽乙醇提取物的祛痰作用,实验表明木瓜籽有祛痰作用,但作用不如镇咳那样显著。可 能与提取部位有关,需要进一步活性筛选。 本文从镇咳祛痰两方面对木瓜籽润肺化痰的功效进行了初步药理研究。结果表明,高剂 量组效果明显高于低剂量组,显示出了镇咳祛痰活性,但其量效关系及镇咳祛痰有效成分还需 进一步研究。由于木瓜籽多被扔倒,甚为可惜,经过研究可发现,一方面利于变废为宝,一方面 又促进开发其新的药理活性。本实验为最终阐明木瓜籽润肺化痰作用物质基础提供了药理 实验依据。