山茱萸炮制品探讨论文

【摘要】目的比较山茱萸不同炮制品中马钱素含量。方法高效液相色谱法。结果各炮 制品中的马钱素含量相对于生品含量有所降低。结论不同的炮制方法对山茱萸中的马钱素 含量有明显影响。 【关键词】山茱萸；炮制；马钱素；高效液相色谱法 TheComparisonoftheContentsofLoganininFructusCornibyDifferentProcesses Keywords：FructusCorni;Process;Loganin;HPLC 山茱萸具有补益肝肾、涩经固脱之功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿、 尿频、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症，是成药六味地黄丸、八味地黄丸等的重要原 料。目前认为山茱萸中所含的熊果酸、齐墩果酸、山茱萸苷、马钱素、没食子酸、莫诺苷 等为其主要活性成分［1］，具有降低血糖、增强免疫、利尿、降压、抗炎等药理作用 ［2］。《中国药典》2005 版规定测定马钱素含量作为山茱萸药材质量控制指标［3］。山 茱萸临床和入中成药多用其炮制品，并认为山茱萸生用以敛阴止汗力强，蒸制后以补肾涩 精，固精缩尿力胜，酒炙后借酒力温通，助药势，降低其酸性，滋补作用强［4］。马钱 素作为山茱萸中水溶性有效成分之一，其结构属于环烯醚萜苷类成分，炮制加热和加辅料 对其含量肯定有一定影响，但目前尚未见到有关报道。本研究以马钱素为考察指标，比较 不同炮制方法对其含量的影响，以期为制定山茱萸合理的炮制工艺提供实验依据。 1 器材 1.1 仪器与试剂 BS210S 型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；高效液相色谱 仪：LC-2010A(SHIMADZU)；检测器 SPD-M10A；工作站：Class－VP；H66025T 超声 清洗机（无锡超声电子设备厂）；101A-2 型干燥箱（中华人民共和国上海市实验仪器总 厂）；LDZX-40BI 型立式自动电热压力蒸气灭菌器（上海申安医疗器械厂）。马钱素对照 品（由北京格润得科技公司提供，纯度在 98%以上）；黄酒（河南濮阳亚光酒厂）；甲醇 （天津四友生物有限公司）、乙腈(杭州百林)为色谱纯；氯仿、无水乙醇等均为分析纯。 1.2 药材由宛西制药股份公司提供，产于河南西峡县山茱萸 GAP 种植基地，经河南中 医学院生药学科陈随清教授鉴定为山茱萸科植物山茱萸 CornusofficinalisSiet.etZncc.的干 燥成熟果肉。 2 方法 2.1 样品制备根椐《中国药典》净制要求，取山茱萸样品，除去杂质和残留的果梗和 核，即为净山茱萸，再按不同炮制方法的要求炮制成为以下实验样品。 2.1.1 生品取山茱萸样品，除去杂质和残留的果梗和核，放置备用。 2.1.2 加压酒蒸品取净山茱萸 100g，缓慢加入 40ml 黄酒搅拌均匀，加盖密闭闷润 20min 后将样品放入压力锅中蒸制，待温度升至 115℃后，保持该温度 1h，取出摊于瓷盘 中，于烘箱中 80℃烘 3h 至干，取出，置干燥器中放凉备用。 2.1.3 酒蒸品取净山茱萸 100g，缓慢加入 40ml 黄酒搅拌均匀，加盖闷润 40min，置于 滤布上摊开，放在蒸笼上蒸 3h 后，于烘箱中 80℃烘 3h 至干，取出，置干燥器中放凉备用。 2.1.4 酒炖品取净山茱萸 100g，缓慢加入 20ml 黄酒搅拌均匀,加盖闷润 60min，置不 锈钢锅中，隔水炖 3h，摊于瓷盘中，于烘箱中 80℃烘 3h 至干，取出，置干燥器中放凉备 用。 2.1.5 清蒸品取净山茱萸 100g，置于滤布上摊开，放在蒸笼上蒸 3h 后，取出摊于瓷盘 中，于烘箱中 80℃烘 3h 至干，取出，放于干燥器中放凉备用。 2.2 山茱萸不同炮制品中水分含量比较按照《中国药典》规定方法［3］分别称取山茱 萸炮制品粗粉 3g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，打开瓶盖，在 105℃干 燥 5h，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却 30min，精密称定重量，再在上述温度干燥 1h， 冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过 5mg 为止。根据减失的重量，计算山茱萸不同 炮制品中水分的含量。结果见表 1。表 1 山茱萸不同炮制品中水分的含量结果（略） 从山茱萸不同炮制品中水分含量可以看出，所有炮制品中含水量都在 7%～13%以内， 符合《中国药典》规定。此外，实验中所有炮制样品中的马钱素含量都按干燥品计算。 2.3HPLC 法测定马钱素含量 2.3.1 色谱条件色谱柱为 ODS 柱 4.6mm×250mm(大连依利特)；乙腈-水（15∶8585）为 流动相；检测波长 240nm；柱温 25℃；流速 1ml/min；分析时间 20min。 2.3.2 对照品溶液的制备精密称取马钱素对照品 0.46mg 置 2ml 容量瓶中，加甲醇(色谱 纯)使溶解并定容至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤（0.45μmm）,即得浓度为 0.23mg·ml-1 马钱 素对照品溶液。 2.3.3 标准曲线绘制依次自动进样马钱素对照品溶液 1，3，5，7，9μml 于高效液相色谱 仪中，按上述色谱条件测定,并对结果进行分析。以峰面积积分值为纵坐标，对照品含量为 横坐标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=1274329.13X-17626.1，r=0.9999。结果表明在 0.23～1.15μmg 范围线性关系良好。见表 2 和图 1。表 2 山茱萸马钱素标准曲线数据（略） 2.3.4 精密度实验连续自动进样马钱素对照品溶液 5μml，按前述条件测定峰面积积分值， 计算 RSD 值，结果表明精密度良好 RSD=0.097%。结果见表 3。表 3 精密度考察结果 （略） 2.3.5 稳定性实验分别在 0，2，4，6，8，10h 自动进样马钱素对照品溶液 5μml，照前 述色谱条件测定峰面积积分值计算 RSD 值，结果表明马钱素在 10h 内稳定性良 好,RSD=0.15％。结果见表 4。表 4 稳定性考察结果（略） 2.3.6 重复性实验称取山茱萸同一样品粗粉 5 份各约 1g，精密称定，按照供试品溶液 制备方法和色谱条件，制备供试品溶液并注入高效液相仪，计算含量，RSD=1.63％。结 果见表 5。表 5 重复性实验结果（略） 2.3.7 加样回收率实验取已知马钱素含量的山茱萸粉末约 0.5g，精密称定，共 5 份，分 别加入马钱素对照品，以下按供试品溶液制备项下操作，得到 5 份加样回收供试液。自动 进样各加样供试液 10μml，测定，用外标法根据峰面积积分值进行计算。结果见表 6。表 6 加样回收率实验结果（略） 每份加入对照品 4.040mg，样品含量 8.0810mg·g-1。 2.3.8 供试品溶液的制备各取样品粗粉约 1g，精密称定，置具塞三角瓶中，加入 30% 甲醇 10ml，超声提取 15min，倾出上清液抽滤，重复上述操作 4 次，用适量 30﹪甲醇清 洗残渣,合并滤液，定容至 50ml 容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。 2.3.9 样品含量测定取各供试品溶液分别自动进样 5μml，测定马钱素峰面积积分值，计 算样品含量。对照品和样品色谱图见图 2～4。结果见表 7。表 7 不同炮制品中的马钱素含 量（略） 熊果酸含量和马钱素含量均是以干燥品计，且是两次测定的平均值 从表 7 可知，马钱素含量相对于生品含量均有所降低，由高到低依次为生品>酒炖品> 加压酒蒸品>酒蒸品>清蒸品。 3 讨论 3.1 山茱萸由于药用历史悠久，炮制方法较多，本实验所采取的是临床常用的炮制方 法，加压酒蒸、清蒸、酒炖、酒蒸等炮制工艺中的加酒量、闷润时间、炮制时间，均经正 交实验优选确定。由于实验内容较多，篇幅所限，正交实验的研究过程没有报道。 3.2 实验结果表明，不同炮制方法和加入的辅料对马钱素含量有一定影响，其炮制品 中马钱素含量相对于生品均有所降低，且以清蒸品含量最低。马钱素含量降低的原因可能 是马钱素属于环烯醚萜苷类，在一定条件下易发生水解，炮制加热和加入辅料对其能产生 一定影响的缘故。 3.3 据药理作用研究表明，山茱萸具有免疫调节、抗炎、抗休克、降糖、强心作用， 其不同成分具有不同的免疫药理活性［4］。其中熊果酸体外具有一定的促进免疫效应， 并有抑菌、安定、降温和抗糖尿病等作用［1］；马钱素在低浓度(0.016 ｍｇ/ｍｌ)时有促 进淋巴细胞转化作用而高浓度(0.500 ｍｇ/ｍｌ)时则有抑制作用,提示马钱素对免疫反应有 双向调节作用［5］。本研究以马钱素作为山茱萸不同样品的考察指标，正是以其药理作 用为依据的，山茱萸炮制前后马钱素含量的变化，对其药理作用肯定有影响，其具体量效效 关系有待于进一步研究。 【关键词】中药材；混淆品；伪劣品；鉴别 中药材是加工中药饮片和生产中成药的原料药，其品种的真伪、质量的优劣直接影响 到临床用药的安全有效。在平时的监督检查中发现许多中药材伪劣品、混淆品出现的频率 较高，应引起注意。现总结如下［1，2］，供同道参考。 1 以水半夏充半夏 在监督检查中发现市场上所用半夏大部分为水半夏。水半夏与半夏来源、性状、功效 均不同，价格相差也很大，不可作半夏药用。其主要区别点为： 半夏为天南星科植物半夏的块茎，呈类球形，有的稍偏斜，直径 1～1.5cm，顶端有凹 陷的茎痕，周围密布麻点状根痕，下面钝圆，较光滑，饮片为椭圆形、类圆形，有的顶端 具凹陷的芽痕。水半夏为天南星科植物鞭檐犁头尖的块茎，呈类圆锥形、半圆形或椭圆形， 直径 0.5～1.5cm,顶端类圆形，有凸起的叶痕或茎痕，有的下端略尖。饮片为圆锥形、椭 圆形、长卵形，有的顶端有突起的叶痕或芽痕，另一端渐尖。 2 以川射干充射干用 在商品中射干与川射干常因药名相近，误将川射干作射干使用。川射干是地区习用品， 与射干来源和疗效均有差异，应注意鉴别，主要区别为： 射干为鸢尾科植物射干的根茎，呈不规则结节状，有短分枝，分枝顶端不膨大呈蛇头 状。长 2～10cm，直径 1～2cm，表面黄褐色，有排列较密胡环纹。质硬，断面黄色或棕 黄色，颗粒状，气微，味苦，微辛。川射干为鸢尾科植物鸢尾的根茎，呈扁圆柱形，常有 分枝，分枝顶端膨大，基部缩小，呈蛇头状，长 2～15cm，膨大部分直径 0.7～3cm。表 面灰棕色，膨大部分密生环节，愈近顶端越密。质松脆，断面黄白色，淡黄棕色或淡黄褐 色，气微，味辛苦、有麻舌感。 3 香加皮与地骨皮误用 商品中常将香加皮误作为地骨皮，主要区别为： 香加皮为萝摩科植物杠柳的根皮，外表面灰棕色或灰黄色，断面黄白色，有特异香气， 味苦，粉末显微鉴别含有方晶和乳汁管，无纤维。地骨皮为茄科植物枸杞或宁夏枸杞的根 皮，外表面灰黄色呈棕黄色，断面外层黄棕色，内层灰白色，气微，味微甘而后苦。粉末 显微鉴别有砂晶和纤维，无乳汁管。 4 以光皮木瓜充木瓜 木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠的干燥近成熟果实，同属植物木瓜的干燥成熟果实称光皮 木瓜，有的地区光皮木瓜与木瓜同等入药，应注意鉴别。 木瓜呈长圆形，多纵剖成两瓣，外表面有多数不规则的深皱纹，剖面边缘向内卷曲， 果肉细腻，味酸。光皮木瓜多纵剖成 2～4 瓣，外表面平滑不皱，剖面边缘平坦，果肉粗糙， 显颗粒性，味涩微酸，有沙粒感。 5 以水栀子充栀子 水栀子是药用栀子的混淆品，不能作栀子入药，其主要区别点为： 栀子为茜草科植物栀子的成熟果实，呈长卵圆形、椭圆形，长 1.5～3.5cm，直径 1～ 1.5cm,果梗较短，果皮薄而脆，种子团呈球形或卵圆形；水栀子为茜草科植物水栀子的干 燥果实，呈长椭圆形，长 3～5.5cm,直径 1.5～2cm,果梗较长 0.5～1cm，果皮稍厚，皱缩， 紧贴种子团，种子团呈长椭圆形。 6 以理枣仁充酸枣仁 酸枣仁为鼠李科植物酸枣的成熟种子，同科植物滇酸枣的种子称理枣仁，在个别地区 使用，常混称酸枣仁。其主要区别点为： 酸枣仁形状较小，表面紫红色或紫褐色，中间有一条隆起的纵线纹，显微特征：子叶 细胞中有的含草酸钙簇晶；理枣仁形状稍大而平坦，表面黄棕色或红棕色，中间的纵线纹 多不明显，显微特征：无结晶或有细小草酸钙结晶。 7 以聚花过路黄充金钱草 金钱草为报春花科植物过路黄的干燥全草，同科植物聚花过路黄的干燥全草常混于金 钱草中，在收购和使用过程中常发生混淆。主要区别点在于： 金钱草茎几乎光滑无毛，叶展开后呈宽卵形或心形，主脉明显，柄与叶片等长或更长， 花单生叶腋，具长梗。叶片用水浸后，对光透视可见黑色或褐色条纹；聚花过路黄茎被白 色柔毛，叶长卵形，基部楔形，羽状脉，柄为叶片长的 1/2，茎顶端的叶片呈莲座状着生。 花朵多集生于枝端，花梗极短。用水浸后，叶片对光透视可见红棕色腺点。 8 以紫云英种子充沙苑子 沙苑子为豆科植物扁茎黄花的干燥成熟种子，目前商品中出现较多的一种伪品为来源 于同科植物紫云英的种子，不能作沙苑子入药。主要区别在于： 沙苑子形状较小，略呈圆肾形而稍扁，约 2mm，表面腹中央处微凹，边缘一端向下微 弯，不成钩状；紫云英种子较大，呈斜长方状肾形，长约 3mm，表面腹中央处内陷较深， 边缘一端向内弯成钩状。 9 以汉中防已冒充防己 防己为防己科植物粉防己的干燥根，饮片断面灰白色，平坦，木部有排列较稀疏的浅 棕色放射状纹理，味苦；汉中防己为马兜铃科植物汉中防己的干燥根，饮片断面黄白色， 皮部较厚，木部有较密的放射状纹理，向外方二歧及多歧分叉，味微苦。 10 以水菖蒲冒充石菖蒲 石菖蒲为天南星科植物石菖蒲的干燥根，饮片表面棕褐色或灰棕色，断面纤维性，类 白或微红色，可见多数维管束小点及棕色油细胞，气芳香，味苦微辛；水菖蒲为同科植物 水菖蒲的干燥根茎，饮片表面类白色至棕红色，断面海绵样，类白色或淡棕色，有多数小 空洞及维管束小点，气较浓烈而特异，味辛。 【摘要】目的建立半夏及其伪品水半夏的紫外光谱鉴别方法。方法用中药鉴别紫外谱 线组法进行实验。结果半夏及其伪品水半夏水浸液的紫外谱线组图像、最大吸收峰数目及 峰位值具有明显差异。结论该法可用于半夏、水半夏的鉴别。 【关键词】紫外光谱组法;半夏;水半夏;鉴别 DistinguishingRhizomaPinelliaefromRhizomaTyphoniiFlagelliformisbyUltravioletSpec tralLineMethods Abstract： ObjectiveToestablishamethodfortheidentificationofRhizomaPinelliaefromRhizomaTyphoni iFlagelliformis．MethodsUltravioletlinemethodwasadopted．ResultsTheUVspectrumofthe twoherbaldrugsgavedifferentmaximumabsorptionpeaksbothinnumberandintendities．Con clusionThemethodwassimpleandaccurateandcanbeusedtodistinguishonefromtheother． Keywords： Ultrvioletspectrallinemethod;RhizomaPinelliae;RhizomaTyphoniiFlagelliformis;Identificatio n 《中国药典》(2005 年版)收载的半夏是天南星科多年生草本植物半夏 Pinelliaternata(Thunb.)Breit.的干燥块茎，具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功效。市 场上常以水半夏作为半夏的代用品。水半夏为天南星科植物鞭檐犁头尖 Typhoniumflagelliform(lodd.)Blume 的块茎，具有燥湿化痰、解毒消肿、止血的功效,主产