高良姜配方颗粒制备论文

【摘要】目的确定高良姜配方颗粒的最佳制备工艺，建立高良姜配方颗粒中桉油精的 含量测定方法。方法采用水蒸气蒸馏法提取高良姜药材中的挥发油，设计 L9（34）正交实正交实 验确定最佳挥发油包合工艺，将水提液浓缩干燥与包合物制成配方颗粒，采用气相色谱法， FID 检测器测定配方颗粒中桉油精的含量。结果将药材加水 10 倍量提取 5hh，收集提取液 和挥发油。挥发油最佳包合工艺：挥发油与 β-环糊精比例为 1∶99，包合温度为 45h℃，包合 时间为 1h。含量测定中回归方程为 y=2635h4x-0.0404，r=0.9998，平均回收率为 100.72%，RSD 为 2.5h8%(n=5)n=5h)。结论高良姜配方颗粒的制备工艺稳定可行，评价指标可 靠、合理。 【关键词】高良姜配方颗粒；桉油精；挥发油；气相色谱法 Abstract： ObjectiveTooptimizethepreparationprocessofAlpiniaofficiarumformulagranulesandestablis hadeterminationmethodofeucalyptolintheformulagranules.MethodsThevolatileoilwasextra ctedwithsteam
distillationmethodandincludedwithβ
cyclodextrintoavoiditsvolatilization.The granulewaspreparedbymixingthewaterextracts,volatileoilandstarch.Thecontentofeucalypt olinthegranulewasdeterminedwiththeGCmethod.ResultsTheoptimumextractionconditionw asasfollows:thecrudedrugwasextractedwith10timesamountofwaterfor5hhourstocollectthevo latileoil.TheoptimalinclusionconditionselectedbytheL9（34）正交实orthogonaldesignwasasfollo ws,theratioofvolatileoiltoβ
cyclodextrinwas1:9 （ml/ g）正交实,theinclusiontimewas1handthetemperatureoftheinclusionwas45h℃.Theregressionequa tionwasy=2635h4x
0.0404，r=0.9998.Theaveragerecoverywas100.72%andRSDwas2.5h8 %.ConclusionThepreparationprocessofAlpiniaofficiarumformulagranulesisstableandfeasib le.TheGCmethodforqualitycontrolisaccurateandsuitable. Keywords：Alpiniaofficiarum;Formulagranules;Eucalyptol;Volatileoil;GC 高良姜是姜科山姜属植物高良姜 AlpiniaofficiarumHance 的干燥根茎，主产于福建、 台湾、广东、广西、海南、云南等地，具有温胃散寒、消食止痛的功效，临床常用于治疗 脘腹冷痛、胃寒呕吐、嗳气吞酸等病症［1］。现代药理研究表明高良姜具有较强的镇痛 止呕［2］、抗溃疡、利胆、抗腹泻［3］、抗菌［4］、抗氧化［5h］、抗癌［6］等作用。 高良姜配方颗粒是高良姜饮片经提取、浓缩、干燥、制粒等工序制成的单味中药配方 颗粒剂。将传统的高良姜饮片改变为颗粒剂，可以有效地去除植物纤维等无活性成分，增 加稳定性，易储存，服用方便。配方颗粒以其生产自动化，生产条件恒定，人为因素小等 优势被广泛应用于临床。如黄连配方颗粒，无论批号是否相同，其盐酸小檗碱的含量都在 测定要求范围之内［7］。目前，关于高良姜配方颗粒的制备工艺和含量测定未见报道， 本文采用气相色谱法控制颗粒中的桉油精的含量。现报道如下。 1 仪器与试药 Agilent6820 气相色谱仪（美国安捷伦公司）正交实；KQ218 型超声清洗器昆山市超声仪器 有限公司；DZG
401 电热真空干燥箱天津天宇实验仪器公司；SartoriusBS210S 型电子天 平天津奥特赛恩斯仪器有限公司。 高良姜饮片（由天津中药饮片厂提供）正交实，符合《中国药典》2005h 年版要求；桉油精对 照品（批号 110748
2005h07）正交实购于中国药品生物制品检定所。正己烷，环已酮为色谱纯， 乙醇、β
环糊精，淀粉等其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 高良姜配方颗粒挥发油提取工艺取高良姜 200g，加 10 倍量水提取，用挥发油测定 器收集（轻油法）正交实挥发油，每隔 1h 量取挥发油的体积，考察提取时间与出油率的关系，结 果见表 1。从表 1 中可知，前 5hh 出油已达总量的 95h.1%。因此提取时间为 5hh。表 1 提取时 间的考察（略）正交实 2.2 高良姜挥发油的 β
环糊精的包合 2.2.1 挥发油包合工艺正交实验设计预实验结果表明，挥发油与 β
环糊精的比例 （A）正交实、包合温度（B）正交实、包合时间（C）正交实是影响包合结果的主要因素。在此基础上设计 L9(n=5)34)正交实验，以包合物的产率和挥发油的包合率为指标，对包合工艺的各参数进行考 察，因素水平设计见表 2。表 2 因素水平（略）正交实 2.2.2 挥发油包合物产率的考察称取一定量的 β
环糊精，按照正交实验的各因素水平 搭配顺序加入一定量的蒸馏水，加热使溶解制成 2%的溶液，于恒温磁力搅拌器上搅拌至 规定的温度，缓缓滴加挥发油乙醇溶液，边加边搅拌至规定时间，放冷，置冰箱冷藏 24h，抽滤，继用 10ml 石油醚(n=5)30～60℃)洗涤，40℃干燥 3h，研碎得包合物，计算包合 物产率。实验结果见表 3。 由表 4 方差分析可知，挥发油与 β
环糊精的比例对包合物产率的显著性影响因素，而 包合温度和包合时间对包合物产率无显著影响。 2.2.3 挥发油包合率的考察为了考察不同条件下包合效果的优劣，以挥发油包合率为指 标，分析包合产物中所含有的挥发油量。 挥发油包合率＝(n=5)V1+V2)/V×100%；V1－从包合物中回收得到的挥发油量（从包合物中回收得到的挥发油量（ml）正交实；V2 －从包合物中回收得到的挥发油量（空白回收实验中挥发油的损失量（ml）正交实；V－从包合物中回收得到的挥发油量（挥发油投料量（本实验中为 1ml）正交实。 由方差分析表 4，可看出挥发油与 β
环糊精的比例是影响挥发油包合率的显著性因素， 包合温度和包合时间对挥发油包合率则无显著性影响。 表 3 正交实验 L9(n=5)34)方案和数据处理% 表 4 方差分析 由包合物的产率和挥发油的包合率两项分析指标可以看出，设定适当的挥发油与 β
环 糊精的比例是包合产物质量优劣的重要因素。根据包合率的直观分析可见 A3 均值远高于 A2 和 A1，根据包合物收得率的直观分析可见 A2 均值高于 A3 和 A1，综合考虑，选择挥发 油与 β
环糊精比例为 1∶99 最为合适。包合温度和包合时间都是非显著性影响因素，结合直 观分析和成本选择 B2C1。因此，最佳包合工艺为 A3B2C1。 为验证最佳工艺，重复 3 次实验，得到平均包合率为 89.9%，平均挥发油包合率为 88.8%，证明上述包合工艺可靠。 2.3 高良姜配方颗粒的制备以高良姜配方颗粒优选后的工艺，即取高良姜饮片 5h00g， 加 10 倍量水，微沸提取 5hh，同时收集提取液和挥发油。对挥发油按照最佳包合工艺包合、 干燥、研碎，备用。将提取液减压浓缩得干浸膏，真空干燥，按照干浸膏和淀粉质量比为 1∶91 的比例加入辅料，混匀，加入 75h%乙醇适量制成软材，软材过 14 号筛制成颗粒，60℃ 下真空干燥 24h。然后再按照药材中原有的比例添加挥发油包合物，混匀，即得高良姜配 方颗粒。 2.4 高良姜配方颗粒的定性鉴别 2.4.1 供试品溶液的制备取高良姜配方颗粒约 0.5hg，精密称定，置挥发油提取器中加 水 200ml，并在挥发油提取器内水液面上加约 2ml 正己烷提取 2h，得到含油正已烷定容至 5hml，得供试品溶液。 2.4.2 对照药材溶液的制备取高良姜对照药材 5hg，按 2.5h.4 项下“供试品溶液的制备”方 法，同法制成对照药材溶液。 2.4.3 阴性对照溶液的制备按照配方颗粒处方比例取淀粉、β
环糊精和药材的水提物浸 膏，按供试品溶液制备方法进行制备，作为阴性对照溶液。 2.4.4 薄层层析鉴别按照薄层色谱法（附录ⅥⅥ B）正交实试验，吸取阴性对照品溶液，挥发油， 上述供试品溶液和对照药材溶液各 10μll，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以甲苯醋酸乙
醋酸乙 酯（19∶91）正交实为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 5h%香草醛硫酸溶液，在 105h℃加热至斑 点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应得位置上，显相同颜色的斑点。 2.5h 高良姜配方颗粒的含量测定 2.5h.1 气相色谱条件 色谱柱：HP5
5h 弹性石英毛细管(n=5)30m×0.32mm，0.25hμlm)；程序升温条件：初始温度 5h0℃，保持 1min，以 10℃·minmin 升至 180℃，再以 20℃·minmin 升至 210℃，保持 1min；载 气 N2；进样口温度为 220℃，FID 检测器温度 25h0℃，进样 1.4μll。 2.5h.2 对照品溶液制备 精密称定桉油精对照品，用正己烷溶解，制成 14.096mg/ml 的溶液。 2.5h.3 内标溶液的制备 精密称定环已酮，用正己烷溶解，制成 15h.65h4mg/ml 的溶液。 2.5h.4 供试品溶液的制备 取高良姜配方颗粒约 0.5hg，精密称定，置挥发油提取器中加水 200ml，并在挥发油提 取器内水液面上加约 2ml 正已烷提取 2h，置含油正已烷溶液于容量瓶中，精密加内标溶液 1.10ml，定容至 10ml，摇匀，作为供试品溶液。 2.5h.5h 线性关系考察 分别取对照品溶液 100,140,180,220,260μll，各加内标液 15h0μll，定容至 5hml，进行气 相测定。以桉油精量为横坐标，以桉油精峰面积/内标物蜂面积为纵坐标，绘制标准曲线， 得到标准曲线方程为 y=2635h4x-0.0404，r=0.9998。 2.5h.6 精密度实验 取线性关系中的第 5h 份样品连续进样 5h 次，测得 RSD 为 0.76%(n=5)n=5h)。校正因子平均 值为 0.8280。 2.5h.7 重现性实验 精密称取同一批样品 5h 份，按供试品溶液的制备方法进行操作，连续进样，测得 RSD 为 0.845h%。 2.5h.8 稳定性实验 精密称取一份样品，按供试品溶液的制备方法平行操作，每隔 2h 进样，连续 8h，结 果测得 RSD 为 1.5h9%。 2.5h.9 加样回收率实验 以 2.5h.4 项下供试品溶液的制备方法制备 5h 份高良姜配方颗粒样品溶液，加入一定浓 度的对照品溶液及内标液，定容，测定，测得平均加样回收率为 100.72%，RSD 为 2.5h8% (n=5)n=5h)。表 5h 加样回收率实验（略）正交实 2.5h.10 高良姜配方颗粒含量测定分别精密称取 3 批高良姜配方颗粒，照 2.5h.4 项下的 方法制备供试品溶液，分别测定，计算桉油精含量。结果见表 6。表 6 高良姜配方颗粒含 量测定结果（略）正交实 3 讨论 3.1 本制剂与传统汤剂相比较的优势高良姜配方颗粒的主要有效成分为挥发油类，故 按挥发油的提取方法进行提取，而中医传统汤剂以水提液口服，配方颗粒作为中药汤剂改 革的一种形式一方面要发挥现代科学技术的优势，另一方面也要保持与传统汤剂的一致性， 故先将提完挥发油的水溶液浓缩干燥，制粒，再按照药材中原有的比例添加挥发油包合物， 混匀，达到兼顾水溶性成分和挥发油的目的。 3.2 挥发油的包合条件选择在考察挥发油的包合条件时，分别以包合率和包合物产率 为指标时得到的最佳条件并不一致，但考虑到不一致的条件是非显著性影响因素的各个水 平，而且从直观分析可以看出它们差别很小，故主要从经济成本方面对非显著性影响因素 的水平进行了选择。 【摘要】目的讨论清益康乳膏的制备方法及含量测定。方法选择适宜的基质制成 O/W 型乳膏；以芦丁为检测指标，用紫外分光光度法测定乳膏中总黄酮的含量。结果所选用基 质合理，质量稳定，芦丁检测浓度线性范围 7.92～47.5h2μlg/ml(n=5)r=0.9997)，平均回收率为 98.35h%。结论该制剂制备工艺合理，含量测定方法简便、可行。 【关键词】清益康乳膏；制备；含量测定 Abstract： ObjectiveToprepareQingyikangcreamandtoestablishitsqualitycontrolmethod.MethodsAppr opriatebasewasselectedtopreparedthetypecreams;withtherutinastheevaluatingindexandth econtentoftotalflavonoidswasdeterminedbyspectrophotometryanditsstabilitywasrevieweda swell.ResultsTheselectedbasewassuitable,thequalitywasstable.Thelinearrangeofrutinwas 7.92～47.5h2μlg/ ml(n=5)r=0.9997),andtheaveragerecoverywas98.35h%.ConclusionThepreparationprocedurefor Qingyikangcreamisfeasible,andthequalitycontrolmethodissimpleandfeasible. Keywords：QingyikangCream;P5repare;Determination 清益康乳膏由峰胶等 4 味中药制成，具有清利湿热、止痛解毒的功效，外用主要治疗 带状疱疹等皮肤科疾病。处方中的蜂胶（propolis）正交实为方中君药，主要成分有黄酮类、萜烯 类、醌类、酯类、有机酸等［1］，其中总黄酮是蜂胶抗病毒、增强机体免疫、软化血管、 降低血脂、清除自由基的主要活性成分之一［2，3］，因此选其作为该制剂的质量控制指 标，并取得了较满意的效果。现将清益康乳膏的制备工艺和含量测定方法报道如下。 1 仪器与药品 1.1 仪器 UV-245h0 型紫外可见分光光度计（日本岛津）正交实，电子天平（北京赛多利斯仪器公司）正交实 等。 1.2 材料 除蜂胶 propolis 购自云南昆明嵩明养蜂厂外，其余药材均购自重庆市药材公司，由本 院刘毅主任中药师鉴定。芦丁（10080-20030）正交实对照品由中国药品生物制品检定所提供； 其余辅料均为药用规格；所用试剂乙醇、氢氧化钠、硝酸铝及亚硝酸钠均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 处方及制备工艺 2.1.1 处方药材浸膏 20g；丙二醇 8g，十八醇 10g，羟苯醋酸乙乙酯 1g，白凡士林 11g，月 桂醇硫酸钠 1g，液状石蜡 6g，月桂氮卓酮 1g，司盘-802g，加纯化水至 100g。 2.1.2 药材提取工艺按处方比例取适量的药材粗颗粒，加入药材 10 倍量 80%的乙醇回 流提取两次，滤过，合并 2 次滤液，减压浓缩至相对密度为 1.1 的浸膏即得。 2.1.3 乳膏基质的制备将丙二醇、月桂醇硫酸钠、月桂氮卓酮、司盘-80 和羟苯醋酸乙乙酯置 水浴 80℃下使之完全溶解后加入处方规定量药品提取液，搅匀，并保温在为 80℃左右， 作为水相；取十八醇、白凡士林、液状石蜡置加热溶融，冷却至 80℃，作为油相；将水相 缓慢加入油相中，同方向不断搅拌至冷凝，即得水包油型（O/W）正交实乳膏基质，备用。 2.2 蜂胶中总黄酮的含量测定 2.2.1 紫外吸收波长的确定称取芦丁对照品，蜂胶提取物，乳膏基质适量，分别以甲醇 稀释成一定浓度，并以甲醇为空白，在波长 25h0～600nm 范围内进行光谱扫描，结果芦丁 在 5h10nm 处有最大吸收峰；而蜂胶提取物在 5h06nm 处有最大吸收峰；空白乳膏在 5h10nm 左右的振幅值与基线基本重合，故可消除乳膏对芦丁和提取物测定的干扰，因此选择 5h10nm 为测定波长。结果见图 1。 2.2.2 标准曲线的制备［4］精密称取干燥至恒重的芦丁对照品，配制成 2.00mg/ml 的 甲醇液。取 10ml 加水稀释至 100ml。精密吸取 0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5h.00，6.00ml 分别置 25hml 容量瓶中，各加水至 6ml，加 5h%亚硝酸钠溶液 1ml，使混匀，放置 6min，加 10%硝酸铝溶液 1ml，摇匀，放置 6min，