解放军文职招聘考试何谓酶活力测定

 16.何谓酶活力测定，影响酶促反应的因素有哪些?

酶活力是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力测定实质是测定一个被酶所催化的化学反应速度。酶反应速度可用单位时间反应底物的减少或产物的增加来表示，酶反应速度越快，所表示的酶活力越高。

影响因素：

⑴ 底物浓度的影响  一般选用底物的浓度 [S] = 100Km (Km为米氏常数，是重要的酶反应动力学常数)，此时反应速度可达最大速度的99%；

    ⑵ pH的影响  氢离子浓度可能改变酶的活性中心的解离状况，升高或降低酶的活性；也能破坏酶的结构与构象导致酶失效；还可能作用反应系统其他组成成分影响酶反应，甚至改变可逆反应进行的方向。通常借助缓冲系统来控制pH；

    ⑶ 温度的影响  温度影响化学反应的速度；影响酶的稳定性；还影响酶的构象和酶的催化机制。实验中温度变动应控制在±0.1℃以内。酶反应温度通常选用25℃、30℃或37℃；

⑷ 辅助因子的影响  有些酶需要金属离子，有些则需要相应的辅酶物质。

17.何谓生物检定法，简述应用范围

    检定法是利用药物对生物体（整体动物、离体组织、微生物等）的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。是以药理作用为基础、生物统计为工具，运用特定的试验设计，通过供试品和相应的标准品或对照品，在一定的条件下比较产生特定生物反应的剂量比例，来测得供试品的效价。

    由于生物差异的存在，生物检定结果误差较大，重现性也较差，加上测定费时等，所以生物检定主要用于无适当的理化方法进行检定的药物。如：一些采用理化方法不能测定含量或理化测定不能反映临床生物活性的药物；一些结构复杂、分子量较大，而且往往结构相似、比例不定的多种成分组成的一些生物制品及一些神经介质、激素等微量生理活性物质。

18、简述毛细管区带电泳（CZE）的分离模式 

毛细管区带电泳（CZE）是毛细管电泳中最基本、应用也最广泛的一种分离模式，主要用于以离子状态存在的样品。与HPLC相比，更具有高效、高速、微量、低消耗的优点，但检出的灵敏度和精密度则不及。

     CZE通常采用的石英毛细管柱，在一般情况下（pH>3）,管内壁上硅羟基解离释放氢离子至溶液中而带负电，和溶液形成双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子整体的朝负极方向移动，产生渗流。而电解质溶液中，带电粒子在电场作用下，以不同速度向其所带电荷相反方向迁移，产生泳流。既然泳流与渗流同时存在，正离子的运动方向和电渗流一致，应最先流出；中性粒子的电泳速度为零，其运动速度相当于电渗流速度；负离子运动方向与电渗流方向相反，故将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子移动速度不同实现分离。