2017年军队文职人员招聘考试科目-农学类考试资料：生物化学蛋白质的分子量测定

 　（一）根据化学组成测定最低分子量

　　用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量，并假设分子中只有一个这种元素的原子，就可以计算出蛋白质的最低分子量。例如，肌红蛋白含铁0.335%，其最低分子量可依下式计算：

　　最低分子量＝铁的原子量÷铁的百分含量×100

　　计算结果为16700，与其他方法测定结果极为接近，可见肌红蛋白中只含一个铁原子。最低分子量只有与其他方法配合才能确定真实分子量。

　　（二）渗透压法

　　在理想溶液中，渗透压是浓度的线性函数，而与溶质的形状无关。所以可用渗透压计算蛋白质的分子量。但是实际的高分子溶液与理想溶液有较大偏差，当蛋白质浓度不大时，可用以下公式计算：

　　M=RT/lim(Π/C)

　　其中R是气体常数(0.082)，T是绝对温度，Π是渗透压（以大气压计），浓度单位是g/L。测定时需测定几个不同浓度的渗透压，以Π/C对C作图并外推求出C为零时的Π/C值，带入公式求出分子量。此方法简单准确，与蛋白质的形状和水化程度无关，但要求样品均一，否则测定结果是样品中各种蛋白的平均分子量。

　　（三）沉降分析法

　　蛋白质在溶液中受到强大离心力作用时，如其密度大于溶液密度，就会沉降。用超速离心机（每分钟6－8万转）测定蛋白质的分子量有两种方法：沉降速度法和沉降平衡法。

　　温馨提醒：