2019解放军文职招聘考试教育学生物知识点213
3、材料用具：洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片
材料：洋葱(可用葱、蒜替代);
用具：显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、剪刀、镊子、滴管
药品：质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量浓度0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液(将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋红液
4、方法步骤：
(1)洋葱根尖培养：提前3—4天在广口瓶中培养洋葱，待根长5cm时剪取生长健壮的根来实验，(要清楚根尖分区，切取错误将无法实验);
(2)装片制作：流程为：解离——漂洗——染色——制片
取材：上午10时到下午2时根尖有丝分裂活跃，此时各种条件均适于细胞的有丝分裂，或者在夜间0—1时取材固定备用(固定也用1份冰醋酸和3份体积分数为95%的酒精配制)，剪取根尖2—3mm淡黄色区域。
①解离：
解离液：质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精1：1混合均匀;解离时间：室温下3—5min，待酥软即可，此时为乳白色。解离时间不足，解离不充分不易压开;解离时间过长则解离过度，细胞散开不规则;
解离目的：去除细胞间质使细胞彼此分离
②漂洗：
待酥软后放入盛有清水的玻璃皿中漂洗;漂洗时间：约10min。
漂洗目的：去除根尖上多余的解离液(酸性物质盐酸)，防止解离过度和利于碱性染料染色
③染色：
原理：染色质中的碱性蛋白质组蛋白被染成深色(DNA未被着色)
染液：0.01g/ml—0.02g/ml的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)
时间：3—5min;适可： 染色时间过长染色过深，蓝紫色一片不易观察
时间过短染色过浅不易观察
④制片：取出根尖放在载玻片上，加一滴清水，用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一载玻片，用拇指轻压使细胞均匀散开(作用：使细胞彼此分散)
(3)观察：如果自制装片效果不太理想，可以观察洋葱根尖固定装片
①用显微镜观察，注意显微镜的正确使用(见显微镜专题)
低倍镜观察：找到分生区：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态;找到处于分裂状态的细胞移至视野中央，换上高倍镜
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(责任编辑：长理培训)
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