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医药学论文:人参、甘草诱导PBMC分泌细胞因子和SIL

来源: 2017-10-10 20:56

 

【摘要】 目的 探讨人参、甘草体外诱导人外周血单个核细胞(PBMC)分泌细胞因子机制。方法 我们选择生晒参、红参、甘草三种中药的提取液加入PBMC培养液中,孵育5d后,采用ELISA方法测定上清液中的细胞因子水平。结果 生晒参、红参、甘草能诱导PBMC分泌细胞因子和SIL-2R,其中药组TNF-α、SIL-2R、IL-2、IFN-γ含量明显高于细胞对照组,特别是生晒参诱生PBMC高分泌IFN-γ尤为突出。结论 生晒参、红参、甘草对体外诱导PBMC分泌TNF-α、IL-2、IFN-γ细胞因子和SIL-2R。

【关键词】 生晒参 红参 甘草 PBMC 细胞因子

Studies on the role of induced cytokines,SIL-2 by ginseng and glycyrrhiza in PBMC

【Abstract】 Objective In order to elucidate the role of ginseng and glycyrrhiza in cellular immunity regulation and study the mechanism of induced cytokines by the Chinese medicines in vitro.Methods PBMC were induced by water-solubility extract respectively from radix ginseng,radix ginseng rubra and glycyrrhiza, and cytokines levels was assayed by the methods of ELISA.Results Radix ginseng,radix ginseng rubra and glycyrrhiza could induce high levels of cytokines. The levels of TNF-α,SIL-2R,IL-2 and IFN-γ among the group of Chinese medicine were significant higher than that of control group, especially high-level production of IFN-γ induced by radix ginseng.Conclusion Radix ginseng,radix ginseng rubra and glycyrrhiza play a role of positive regulation for immunity system in vitro as immunopotentiator. Radix ginseng was stronger than the radix ginseng rubra and glycyrrhiza, but they have a different mechanism of immune regulation.

【Key words】 radix ginseng radix ginseng rubra glycyrrhiza PBMC cytokines

近年来有关人参、甘草调节免疫功能的研究已有许多报道[1],但对其体外诱导PBMC分泌细胞因子和SIL-2R很少报道。本实验人参、甘草诱导外周血单个核细胞的细胞因子和SIL-2R分泌的调节作用。

1 材料与方法

1.1 材料
1.1.1 生晒参、红参、甘草标准品 购自中国药品生物制品检定所。

1.1.2 诱生细胞 本院职工健康献血员。

1.1.3 TNF-α检测试剂 美国Genzyme公司。

1.1.4 淋巴细胞分离液 中国医学科学院天津血液病研究所。

1.1.5 IMDM营养液 美国GIBCO公司。

1.1.6 IL-2(白细胞介素Ⅱ)检测试剂盒 美国Biosos公司。

1.1.7 IFN-γ(干扰素-γ)检测试剂盒 美国Biosos公司。

1.1.8 SIL-2R检测试剂盒 白求恩医科大学免疫教研室。

1.2 方法

1.2.1 中药制备 取生晒参、红参、甘草标准品各5g,分别加入双蒸水50ml,浸泡24h,加热回流2h,用中性滤纸过滤,置4℃冰箱沉降24h。4℃ 14000rpm离心10min,弃沉淀物,将上清液除菌,分装,4℃保存备用。

1.2.2 分离PBMC 取肝素抗凝血50ml,用无Ca2+,Mg2+,Hank's液将抗凝血1:1稀释后,缓慢加在淋巴细胞分离液上,抗凝血与无Ca2+,Mg2+,Hank's液和淋巴细胞分离液的比例为1:1:1, 1700rpm离心20min,吸取淋巴细胞层,加入无Ca2+、Mg2+,Hank's液混匀洗涤,1300rpm离心10min,弃上清,重复洗涤2次。进行细胞计数后,备用。

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