医药学论文:破壁灵芝孢子粉的研究进展
【关键词】 破壁;灵芝孢子粉;研究进展
【Abstract】 The ganoderma lucidum divides into the fungus red iris and the ganoderma lucidum, has straightens up the solid this effect and so on, "This after" is called the high-grade goods. In recent years, were very many to ganoderma lucidum's chemical composition and the clinical function research, also gradually increased to ganoderma lucidum's germ cell spore for medicinal purposes value research. Along with research unceasingly thorough, the research worker used many kinds of effective methods to carry on the broken-down wall to the ganoderma lucidum spore, the authors summarizes the broken-down wall ganoderma lucidum the research recent situation.
【Key words】 broken-down wall;ganoderma lucidum spore powder;research progress
灵芝是担子菌纲多孔菌科(Polyproraceae)灵芝属(Ganoderma)真菌赤芝[Ganoderma lucidium (Leyss.exFr.)Karst.]和紫芝[Ganoderma japonicum(Fr.)Lloyd.]的总称,由菌丝体和子实体组成,其菌丝无色透明,具分隔及分枝,表面常分泌白色草酸钙结晶。子实体由菌丝形成,分菌柄、菌盖和菌伞下边的子实体三部分,成熟后的子实体木质化,其皮壳组织革质化,有赤褐色光泽;内壁为子实层,孢子从子实层内产生,孢子褐色,卵形,8~11μm×5~7μm,中央含一个大油滴。灵芝具有扶正固本等功效。目前,对灵芝的化学成分及其药理作用等方面都进行了比较深入的研究,但是灵芝孢子具双层壁[1],褐色内层有许多针状小突起伸入透明光滑的孢子壁外层,一般的化学和物理方法很难打破灵芝孢子的双层壁,因此限制了对其化学成分、生物活性成分的深入研究。随着技术的进一步发展,人们采用多种有效的方法对灵芝进行破壁研究,本文就对目前该方面的研究近况作一综述。
1 灵芝孢子的破壁
有效的灵芝孢子破壁方法可以促进对其生物活性成分的提取及药用价值的研究。灵芝孢子破壁方法包括机械法、酶法、过冷液氮淬冷法和低温玻璃化破碎法等。蒋家新等[2]采用酶法破壁,破壁率达42%,但用此法想要进一步提高破壁率就会造成灵芝营养物质损害的增加和新的蛋白杂质。吴华等[3]利用超声波细胞粉碎机,并在高压的条件下将灵芝孢子粉破壁,并就此方法建立了比较好的破壁工艺。周顺华等[4]采用一种新型的低温玻璃化破碎技术进行了灵芝孢子破壁实验,取得了较好的效果。不久后笔者又利用过冷液氮淬冷破壁法进行了灵芝孢子破壁实验;证明了该方法具有效果较好、破壁率较高,设备、操作简便及效率高等优点;增加冻结、解冻循环次数能在一定程度上提高灵芝孢子破壁率。最近,杨晓强等[5]利用最新的超微粉碎技术将灵芝子实体的细胞壁打破,并在国内、外率先采用微粉动态提取技术提取灵芝多糖,取得了较好的结果。但以上方法普遍存在成本高、效率低、破壁率相对较低等缺点。目前王春涛、崔宁等[6,7]根据撞击流技术的原理,用超临界CO2作为超高压工作介质和加速、撞击的载体,研制开发了超高压超临界撞击流粉碎试验系统,并将其用于制备破壁灵芝孢子粉,明显提高了破壁率,并对其制备工艺进行了研究,取得了较为满意的效果。
可用光学显微镜观察灵芝孢子的破壁与否,未破壁的孢子壁光滑完整,破壁处理后的孢子壁则残缺不全,内容物呈不规则团块状[8]。
2 破壁灵芝孢子粉化学成分的研究
灵芝不管是孢子还是子实体的化学成分都很复杂,特别是灵芝孢子具有双层壁较难打破,对其化学成分还需要进一步的深入研究。目前认为,灵芝化学成分组成大概可分为几类:蛋白质和氨基酸类、糖肽类、维生素类、胡萝卜素、甾醇类、三萜类、生物碱类、脂肪酸类、内酯和无机离子类等,其中多糖、三萜类化合物、核苷、生物碱等是灵芝的主要有效成分,对这几类主要有效成分,特别是多糖的分离提取、药理作用以及临床作用的研究已成为了热点。
2.1 破壁灵芝孢子粉多糖的研究 随着灵芝孢子壁被人们用有效的方法打破,对灵芝孢子粉的化学成分研究也不断展开。2006年黄晓兰等[9],研究了灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同,结果表明,不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;朱俊洁等[10]采用破壁提取综合法将灵芝孢子破壁和有效成分提取结合起来, 经过一次加工处理在降低提取费用的同时提高了灵芝孢子多糖提取得率;刘英梅等[11]2006年,通过正交试验法,优化了灵芝孢子粉中多糖提取的工艺过程,得出较为可行的孢子粉多糖提取最佳工艺。目前,用苯酚-硫酸法测定灵芝多糖是比较常用的方法,2005年朱建国等[12],用苯酚-硫酸法初步建立了灵芝孢子粉多糖含量测定的方法,得到测定中显色的最佳条件为:5%的苯酚1.6ml,浓硫酸8ml,温度为20℃,反应时间为24min。2006年白在贤等[13]采用硫酸葸酮比色法测定破壁灵芝孢子粉中多糖类含量,同时考察了该方法的专属性、准确性、精密性及线性关系。结果表明此法准确、可靠、重现性较好,可用于破壁灵芝孢子粉中多糖的含量测定。
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