医药学论文：儿童风湿病患者肺炎支原体和EB病毒感染的研究

【摘要】 目的 探讨肺炎支原体和EB病毒感染与风湿病发病之间的相关性。方法 收集31例儿童风湿病患儿和30例正常对照组，应用酶联免疫吸附技术（ELISA）检测血清肺炎支原体（MP）和EB病毒（EBV）的IgM、IgA抗体。结果 风湿病患儿组MP－IgM阳性16例（51.6％），MP－IgA阳性10例（36.26％），EBV－IgM阳性2例（6.45%），EBV－IgA阳性1例（3.22%）；正常对照组MP－IgM、IgA阳性各2例（6.67％）；EBV－IgM、IgA均阴性。风湿病患儿组肺炎支原体感染明显高于正常对照组（P< 0.01和0.05）。结论 肺炎支原体是小儿风湿病患儿感染的常见病原体，可能参与其发病机制。

【关键词】 肺炎支原体 风湿病 EB病毒抗体 儿童

Study on the infection of mycoplasma pneumoniae，EB virus in the children with rheumatic diseases

【Abstract】 Objective To explore the relationship between the mycoplasma pneumoniae(MP) infection，EB virus（EBV） and rheumatic diseases.Methods Specific MP-IgM，MP-IgA and EBV－IgM，EBV-IgA antibody of 31 cases with rheumatic diseases and 30 controls were assayed with ELISA.Results 16 cases (51.6%)were MP-IgM positive，10 cases(36.26%) were MP-IgA positive，2 cases（6.67％）were EBV－IgM positive，and 1 case（3.22％）was EBV－IgA positive in rheumatic diseases group.Either 2 cases (6.67%) were MP-IgM positive，1 case (3.32%)was MP-IgA positive and no case was EBV－IgM，EBV-IgA antibody in controls. That of rheumatic diseases group was higher than that of controls.Conclusion MP may be the common pathogen in the children with rheumatic diseases and may attend the pathogenic machanism of rheumatic diseases

【Key words】 mycoplasma pneumoniae rheumatic disease EBV-antibody children

儿童风湿病是一种全身性的多系统损害的自身免疫性疾病，目前其发病机制尚未十分清楚。感染在儿童风湿病中的作用一直受到人们重视，但有关支原体感染尤其是肺炎支原体和EB病毒(EBV)感染与儿童风湿病的关系国内少见报道。我们采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测风湿病（包括系统性红斑狼疮、幼年型特发性关节炎、皮肌炎、系统性血管炎）患儿活动期血清肺炎支原体和EBV特异性抗体IgM、IgA，并与正常对照组作比较，旨在了解肺炎支原体感染与儿童风湿病的关系，以进一步探讨儿童风湿病的发病机制。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2000年8月～2002年9月收集小儿风湿病患儿31例，男10例，女21例，年龄2～14岁，平均年龄（8.0±3.2）岁，其中包括幼年型特发性关节炎(JIA)患儿12例（男5例，女7例）和系统性红斑狼疮(SLE)17例（男4例，女13例），系统性血管炎1例，皮肌炎［1］1例。均于疾病活动期抽取非抗凝静脉血2～3ml，离心后收集血清，置4℃保存；同时收集30例健康儿童作为正常对照组，男16例，女14例，年龄2～14岁，平均年龄（7.2±3.2）岁。

1.2 研究方法

1.2.1 MP-IgM的检测 采用Serodia MycoⅡ方法，试剂盒由日本FujiRebio inc生产。

1.2.2 操作步骤 (1)吸取200μl待测血清，56℃ 30min灭活补体。(2)将灭活后的待测血清25μl，进行倍比稀释1：10、1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280。每孔25μl加入U型反应孔内，同时设阳性血清对照。(3)于每份标本的1：10浓度孔中加入25μl非感应粒子作为阴性对照，以下浓度孔中加入25μl感应粒子。最终滴度则为1：20（阴性对照）、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280。轻轻混匀，加盖，于室温（20℃左右）反应3h。

1.2.3 检测方法 用目测法与阳性血清及非感应粒子对照判断结果。滴度≥1：80者为阳性。

1.3 MP-IgA的检测 采用ELISA，试剂盒由陕西华煜生物医学技术公司生产。操作步骤：(1)用标本处理液稀释标本（1：100）100μl加入相应孔中。设阳性、阴性、空白对照各一孔，置37℃水浴或湿盒30min；(2)弃去标本液以洗涤液洗涤3次，每次3～5min甩干；(3)加酶标抗体，每孔2滴，空白孔中只加洗涤应用液，置37℃湿盒20min；(4)弃去酶结合物，同上洗板5次，拍干；(5)加显色底物A、B各1滴，置37℃ 5～10min；(6)终止：每孔加50μl终止液终止反应；(7)结果判断：以空白对照孔调零点，酶标仪测450nm下各孔OD值，待测孔OD值/阴性孔OD值≥2.1者为阳性。